① 如何选择酶标仪
2020年,新冠肺炎全球爆发,常规的核酸检测判别是否感染新冠病毒,血清抗体检测则可以揭示中国人群新冠病毒的感染情况,随着疫情防控常态化,大规模血清检测对于监控人群免疫情况十分必要。如此看来,作为酶联免疫检测的核心仪器,酶标仪的采购情况被业内看好。
酶标仪作为一个常用的仪器,其基本功能不外乎一个比色测定,与比色计所不同的是在测定波长范围、吸光度范围、光学系统、检测速度、震板功能、温度控制、定性和定量测定软件功能等方面的差异,当然全自动酶免疫分析系统还具有自动洗板、温育、加样等功能。那么,实验室在选购酶标仪的时候都要注意哪些关键信息呢?
滤光系统
酶标仪最简单的是用滤光方式来划分。一般来说,可以分为滤光片型和光栅型两大类。也有一些酶标仪里面同时装上了滤光片和光栅。但是滤片和光栅并不能同时完成同一个检测,本质上还只是把滤片和光栅放在了一起,并没有使两者糅合而产生新的技术突破。光栅型滤光系统具有使用方便,可以进行光谱扫描,灵活性等优点。当然,滤光片系统也有其显著的优势,例如价格较为便宜,检测灵敏度高,带宽的可选择性,可以进行快速的滤光片切换,可配备有自动加样系统,在化学发光检测中光线的透过率高。目前,滤光片系统应用更广,因为它可以让实验者完成更多的试验。
测定波长
一般酶标仪的测定波长在400~750nm或800nm之间,完全可以满足ELISA的显色测定。目前国内常见的ELISA试剂盒所使用的标记用酶均为辣根过氧化物酶(HRP),底物通常为四甲基联苯胺(TMB)和邻苯二胺(OPD),其在过氧化氢溶液的存在下,经HRP作用,分别氧化为2,2,—二氨基偶氮苯(DAB)和联苯醌。当pH值为5.0左右时,DAB在450nm波长处有最大吸收,当pH值降为L 0时,最大吸收波长移至492 nm,同时摩尔消光系数变大,显色加深,因而常用强酸如硫酸或盐酸终止反应。TMB的氧化产物联苯醌在波长450nm处有最大消光系数,如果HRP量少,H:O:和TMB过量时,则形成蓝色的阳离子根。降低pH,即可使蓝色的阳离子根转变为黄色的联苯醌,使用硫酸作为终止剂可使产物稳定90min。因此,450nm和492 nm两个波长是目前ELISA测定最常用的。各种酶标仪都配有放置滤光片的可自动转换的部件,可以同时安装6~8片滤光片,所配备的滤光片均应包括上述两个波长,有的酶标仪以490nm滤光片替代492nm滤光片,影响不大。除了这两个基本滤光片外,考虑到双波长比色的需要,还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片,其他滤光片可根据自己的需要选择。有时,有的实验室希望用酶标仪作微量生化测定,故酶标仪生产厂家对其生产的酶标仪扩展了紫外检测功能,此时需要一个340 nm波长滤光片。此时,酶标仪的测定波长范围就成为340—750nm或800nm。酶标仪有单波长和双波长检测功能。有时使用者不知在什么情况下使用单或双波长检测。所谓的“单波长”就是使用一种对显色具最大吸收的波长即450 nm或492 nm进行比色测定;而“双波长”则除了用对显色具最大吸收的波长即450 nm或492 nm进行比色测定外,同时用对特异显色不敏感的波长如630 nm进行测定,酶标仪最后打印出来的吸光度则为二者之差。630 nm波长下得到的吸光度是非特异的,来自于板孔上诸如指纹、灰尘、脏物等所致的吸收。因此,在ELISA比色测定中,最好使用双波长,且不必设空白孔。
测定的吸光度范围
通常,酶标仪的吸光度测定范围在0~2.5之间即可以满足ELISA的测定要求。早期的酶标仪可测定的吸光度一般在0~2.5之间,但现在基本上都做了拓宽,可达到3.5以上,并且能保持很好的精密度与线性。因此,对于酶标仪的吸光度范围不必去刻意追求大的吸光度范围,主要要看在一定的吸光度范围内的线性和精密度如何。
光学系统
酶标仪的光学系统采用的是垂直光路多通道(通常为8或12通道,亦有单通道)检测,一般为硅光管或光导纤维,除测定通道外,有的酶标仪还有一个参比通道,每次测定可进行自我校准。酶标仪的光学系统功能如何,均可通过酶标仪测定的吸光度范围、线性度、精密度和准确度等体现出来。光学系统好的话,则上述指标也应较佳。测定的精密度与测定通道之间的均一性有直接关系。单通道可避免因通道不同所致的差异。
检测速度
酶标仪的检测速度是指其完成比色测定所需要的时间。检测速度快,有利于提高检测的精密度,即避免由于测定过程中,因测定时间不同所致的各微孔间吸光度间的差异。目前市场上常见的酶标仪检测速度都非常快,通常在数秒钟内。
震板功能
酶标仪的震板功能是指酶标仪在对ELISA板孔进行比色测定前对其进行振荡混匀,使板孔内颜色均一。目前市场上常见的酶标仪均有震板功能,所不同的是震板方式,有的可按上下、左右或旋转等方式及振荡幅度等任意调节;有的则较为固定。使用有震板功能的酶标仪,在进行ELISA测定显色反应完成加入终止剂后,可不必振荡混匀,直接放人酶标仪上测定即可。
温育功能
温育功能是指酶标仪本身能按要求自动精确地控制仪器内部的温度,使得ELISA测定中微孔板条的温育过程可在仪器内部完成,而无需再外配温箱。目前,只有少部分酶标仪具有此种功能,温育功能只是酶标仪的一个附加功能,是否具有并不能说明酶标仪档次的高低及仪器的优劣。作为实验室是否选择,则可根据自己实验室的条件及需要来决定。
软件功能
软件功能是指酶标仪所具有的对ELISA定性和定量测定及其他测定方式如酶标动力学、紫外和凝集等数据的统计分析并报告结果的功能。软件功能是中高档酶标仪的一个非常重要的功能。如果硬件方面区别不大,则软件就成为判定酶标仪优劣的惟一指标。对于用户来说,好的软件功能,对实际工作会有较大的帮助。ELISA定性测定,酶标仪如具有阳性判断值(cut-off)及其测定“灰区”(即指测定吸光度处于cut—off周围的一定区域,此区域内结果应为“可疑”)的统计计算功能,不但方便了实验室工作人员,而且在某些特定的情况下,有很高的实用价值。因此,如目的是定量测定,则在酶标仪的软件功能中,最好要有这种曲线回归方程计算分析功能。其他诸如连点、直线等回归计算,则可根据酶标仪的应用目的而定,如兼用于微量生化测定,则此类回归计算就很有必要。此外,酶标仪兼做酶标动力学、凝集反应测定所需的软件是否应具备,当然也应根据使用目的而定。由于此类软件一般都较为昂贵,酶标仪常另外单独按需配备,如果不是实验室特殊需要,就不必强求这种软件功能。
语言界面
通常进口的中高档酶标仪人机对话多采用英文。这对于某些基层实验室可能会存在语言方面的困难,从而难以最大限度地发挥酶标仪的作用。为解决这方面的问题,已有一些酶标仪采用了中文界面。这样就大大方便了广大基层实验室技术人员的使用。综上所述,尽管酶标仪的发展极为快速,种类繁多,功能也不断加强,但其最根本的功用是不变的,即比色测定。大凡比色测定,其基本要求就是在一定吸光度范围内要有好的测定准确性、线性和精密性。同样的吸光度范围,测定的准确性、线性和精密性越好则酶标仪亦越佳。而且,由于用于酶标仪比色测定的为多孔(通常为96孔)微孔板条,为保证测定的孔间重复性,则测定速度也是一个较重要的性能指标。至于其他如震板、温育及有关的软件功能,则是选配功能,不影响酶标仪其他的使用性能。答案来自
② 迄今为止,我国检测新冠病毒有哪些方法
1、荧光PCR法。PCR法指的是聚合酶链式反应,能将微量的DNA大幅增加。荧光PCR检测的原理为——随着PCR的进行,反应产物不断累积,荧光信号强度也等比例增加。最后通过荧光强度变化监测产物量的变化,从而得到一条荧光扩增曲线图。
2、联合探针锚定聚合测序法。这种检测主要是用专门的仪器检测测序载片上DNA纳米球携带的基因序列。这种检测的灵敏度高,不容易漏诊,但结果也容易受多种因素的影响而不准。
3、恒温扩增芯片法。检测原理是基于核酸之间的互补结合特性开发的一种检测方式,能够用于定性或定量测量存在于生物体内的核酸。
4、病毒抗体检测。抗体检测试剂是检测血清中由病毒进入人体后刺激人体产生的IgM或IgG抗体,IgM抗体出现较早,IgG抗体出现较晚。
5、胶体金法。胶体金法是用胶体金试纸进行检测,也就是常说的快速检测试纸。这种试纸经过特殊标记,上面有孔,用于滴入受检者的血清样本。
6、磁微粒化学发光法。化学发光法是一种高度敏感的免疫检测,凡具有抗原性的物质都可以用这种方法测定。
③ 做核酸检测时应怎样做好个人防护
做核酸检测时需要时刻谨记:间隔一米!带好口罩!
我们分三个阶段来说吧
阶段一:出门前
带好身份证,手机,备用口罩,免洗洗手液等需要的物品,但是咱们还是以简为主哈,能不多带就不多带。
出门前洗手并且佩戴好口罩,将免洗洗手液放在门口。
这样做完和酸回来,刚进家就可以给自己来个消毒。
阶段二:途中
这一环是最需要小心的哦。
途中我们尽量不要随意触碰公共设施(以防将附着在这些公共设施上的病毒带到自己身上),避免乘坐公共交通工具,可以选择步行,骑行或者乘坐自家的私家车去往采集点。
阶段三:到达采集点
这个时候咱们一定要听从志愿者的安排!
时刻谨记:间隔一米!带好口罩!
阶段四:采集时/采集结束后
将口罩取下,配合大白采取样本。
采集结束后,可以将被用口罩换上。
以上就是一些小建议啦
对啦,给大家科普一个小知识。
多地已经将新冠病毒抗原检测临时性纳入医保啦~
【为进一步加强新冠肺炎疫情防控医疗保障工作,国家医保局办公室21日印发《关于切实做好当前疫情防控医疗保障工作的通知》,明确参保人在定点基层医疗机构发生的相关费用按统筹地区现行规定支付,在定点零售药店购买新冠病毒抗原检测试剂的费用,可使用个人账户支付。】
先来给大家解释一下,这个里面的抗体检测是什么意思。
新冠病毒抗体检测试剂:检测新冠病毒特异性IgM抗体和IgG抗体。
一般IgM抗体是在新冠病毒感染3-5天出现,表示急性感染。IgG抗体是在新冠病毒感染两周左右出现,表示既往曾经感染过新冠病毒。
简单点说,和新冠病毒核酸检测不同的是,新冠病毒抗体检测是检测新冠病毒特异性的两种抗体。如果检测出lgm抗体,就说明,你是急性感染,有新冠。
再来给大家说说抗体检测有什么优势。
我搜集了一些资料,分享给大家。
与核酸检测相比,采样简单、检测效率高是抗体检测最突出的特点。
1、样本来源灵活,血浆、血清、全血均可,避免了目前核酸检测采集呼吸道标本对医护人员暴露风险大的问题。
2、IgM 和 IgG 检测采用免疫层析或胶体金的方法,通过采集患者指尖血或静脉血,只需要极少量血液就可以完成检测,这样就可以实现床旁检测或入室检测。
3、操作简便,无需任何仪器设备,操作者、操作空间不受任何限制。
4、适用面广泛,适用于社区卫生服务中心、基层医院、三级医院门急诊、发热门诊的早期筛查。
近日,各地陆续宣布将新冠病毒抗原检测临时纳入医保。
那么有什么好处呢?
1:省钱
开头我们说到核酸检测的费用哪怕一降再降,也还是有些小贵。
但新冠病毒抗体检测的检测费用最高不会超过15元。
如果只是单纯的进行新冠病毒抗原检测,公立医院应该免收一般诊疗费,自测的患者,不得收取新冠病毒检测项目费用。
这绝对是省了一大笔钱。
2:方便
对我们被检测的人群还是给我们做检测的人群都提供了很大的方便。
(参考资料 网络 博禾医生 济南本地宝)
④ 病毒检测盒的原理是什么,为何其他国家都很缺
病毒试剂盒的生产技术已经相当成熟,只是大规模量产很难,新冠病毒让各个国家对检测试剂盒的需求大幅增加,而且对新冠病毒的检测至少需要P3级别的实验室,于是导致很多国家的检测能力跟不上。
从3月份开始,中国之外的其他国家陆续爆发新冠肺炎,很多国家普遍面临的难题是检测能力不足,检测试剂盒不够,那么试剂盒检测病毒的原理是什么?里面又有什么高科技呢?
检测原理
除了类生物的朊病毒之外,其余病毒都由蛋白质外壳包裹核酸组成,对该类病毒的检测主要有三个办法:
病毒检测试剂盒也是一样的,要在短时间实现大规模产量很难,从生产生物酶,制作试剂盒子包装,原材料的供应等等都是问题,相信全世界也没有几个国家能做到,但是我们国家率先做到了,对于其他产业链不完整的国家,可能原材料都成问题。
⑤ 新冠病毒可以居家自测吗
传言:
新冠病毒检测试剂盒出家用自测版。
辟谣:
胶体金法的抗体检测试剂操作简便,类似于早早孕检测试剂,可能因此被误认为是所谓的“家用自测版”,但实际上,国家批准的用途明确规定只能是医疗机构使用,不适合一般人群使用,原因在于采集血样需要一定条件、试验需要相应温度湿度、结果判定需要相应的专业知识(尤其是处于临界状态)。此外,任何检测试剂都是对疾病的辅助诊断。
目前,新冠病毒检测试剂盒分为病原体抗原、抗体和核酸检测试剂,属于第三类医疗器械,必须经国家药品监督管理局批准取得医疗器械注册证,这些经批准注册的新冠病毒检测试剂盒,均需要具备条件的实验室及专业的医疗机构才能完成检测,核酸检测试剂盒需要相应的专有检测设备,化学发光法的抗体检测试剂同样需要专有设备。因此,这类试剂盒切不可用来自行使用,更不能经由网络销售给消费者个人。
病原学试剂检测包括病毒核酸检测和病毒特异性抗原检测,试剂盒一般有免疫诊断与核酸检测两大类。
免疫诊断是应用抗原-抗体特异性结合原理,使用特定标记物进行分析检测的技术。免疫学检测一般有ELISA(酶联免疫吸附试验)、化学发光(CLIA)以及胶体金快速检测等,ELISA和化学发光检测时间也相对较长,检测灵敏度较高,一般需要30-120分钟;胶体金快速检测一般5-15分钟,检测灵敏度相对较低,不需专门的实验室和设备,适宜基层操作。
核酸检测是通过检测病原体特异性核酸序列来完成的,主要应用聚合酶链式反应,即通常所说的PCR检测,其优势在于极高灵敏度,同时特异性强、扩增环节自动化程度高,窗口期较短,一般3-5天(理论上核酸只要感染粘膜,就可以检测到),相对封闭的操作环境可以降低样本对环境的污染。核酸诊断包括:荧光定量PCR、数字PCR、高通量测序(NGS)和恒温扩增技术。
附件:国家已经批准的新冠检测试剂清单(截至3月6日)
国家目前已批准的新冠病毒检测试剂有11个产品,其中荧光PCR法8个,恒温扩增法1个,测序法1个,胶体金法2个,化学发光法3个。
辟谣专家:曾明 国家药典委员会疫苗专业委员会委员 研究员
复核专家:岳秉飞 中国食品药品检定研究院 研究员
⑥ 核酸检测怎么做
核酸检测目前都是取咽拭子的方法(病毒感染口腔粘膜上皮后会寄宿于口腔粘膜上皮,通过采咽拭子达到取样目的),1 小时内送到专门检测室内进行。这个性质决定不可能每个患者想做就能立马做,比如大半夜来的患者就做不了,只能等待第二天仪器开机。
取咽拭子是一个高危的操作。据目前临床研究来看,新型冠状病毒感染肺炎的传播途径有三种,直接传播、气溶胶传播、接触传播。其中飞沫混合在空气中,形成气溶胶,吸入后导致感染。所以对于取样的人员而言,有被感染的风险。
除了从武汉抵深者,其他市民如果有需要,也可以前往这些医院检测,核酸检测单项服务的价格约为160元(不含诊查费或诊金)。
以香港大学深圳医院为例,该院已开通核酸筛查门诊,每天8∶00-20∶00开放,市民可直接在“香港大学深圳医院”微信公众号预约“核酸筛查门诊”。
港大深圳医院的专科门诊诊金为100元/人次,核酸筛查费用为160元/人次,共260元,可使用深圳市一档医保支付,一般24小时可出结果。
⑦ 外国只有快速核酸检测吗
美国FDA批准抗原快速检测技术 核酸检测不再是唯一检测方法
CACLP
2020-09-07 19:40:28
近日,美国食品药品监督管理局(FDA)将针对抗原检测的紧急使用授权发布给雅培的BinaxNOW COVID-19 Ag卡。该产品是一种快速、可靠、高度便携且价格低廉的新冠检测工具,可用于大规模检测冠状病毒感染。这类检测技术可以从卡条上直接读取结果,类似于家庭妊娠测试。雅培称,该产品“使用成熟的侧向流技术,在不需要仪器的情况下,只需15分钟即可获得结果,临床研究显示其灵敏度为97.1%,特异度为98.5%”。
美国FDA官方消息
FDA设备和放射健康中心的主任Jeff Shuren指出:
这项新的COVID-19抗原测试是对现有测试的重要补充,因为在几分钟内就可以从测试卡上直接读取结果。这意味着人们能几乎实时地知道他们是否感染了该病毒,鉴于其更简单的设计以及该公司预计在未来几个月内将进行的大量测试,这种新的抗原测试会是我们抗击疫情的重要进步。
休斯敦贝勒医学院分子病毒学和微生物学的教授兼主任Joseph Petrosino指出:
这种测试和应用程序的大规模应用,将让上千万的人获得快速且可靠的测试。
抗原检测方法简介
新型冠状病毒基因编码多个结构蛋白,例如N蛋白、E蛋白和S蛋白等,这些蛋白包括多个抗原表位,利用抗原与抗体特异性结合的原理,可通过抗体检测抗原的存在,从而直接证明样本中含有新型冠状病毒。抗原检测试剂的适用样本类型一般为感染部位样本,如鼻拭子、咽拭子等。
抗原检测试剂卡条示意图
快速检测新冠病毒抗原的测试卡条是将能够结合同一抗原的一对抗体分别固定于免疫层析检测试纸条的检测线(T线)与结合垫上,结合垫上的抗体带有显色标记(荧光标记或胶体金标记)。在试纸条滴样处滴加样品,样品会向试纸条另一端流动,当流动至结合垫,样品中的抗原会与结合垫上的标记抗体结合,形成“标记抗体-抗原”复合物;当样品流动至检测线时,抗原会被T线上的抗体捕获,形成“标记抗体-抗原-捕获抗体”复合物,随着T线上捕获抗原的不断增加,T线会出现愈加明显的颜色变化。C线处固定了二抗,无论样品中是否含有待测抗原都会显色。所以如果T线显示颜色,则说明待测样本中含有待测抗原。
与核酸检测法相比,抗原检测技术的优势是什么
任何一种检测都有其优劣势,关键是在合适的场景运用,操作过程尤其是采样环节需符合规范。分子检测固然有着优异的敏感度和特异性,而且近年来分子诊断的检测速度也在大大提升,但不可否认分子诊断依旧存在着一些局限:比如,不是所有的医院门急诊都有条件配备 RT-PCR 或其他分子检测,而且普遍情况下分子检测耗时相对较长,且成本相对较高。因此,病原体的免疫学检查以其快速、便捷和低成本的优势更容易被普及。
1、快速:检测一个样本仅需10-15分钟,可以做到现场快检。RT-PCR方法需要4-6小时才能得到检测结果,且由于设备等原因,不能做到现场快检。
2、操作简便,无需特殊设备和人员培训;而RT-PCR方法检测需要特殊的昂贵仪器设备,如荧光定量PCR仪。核酸检测是一项精密的实验,对操作人员的要求也较高,需要经过专门的操作培训。
3、特异性高:双抗夹心法保证了抗体交叉反应低,从而有效提高了免疫学方法的特异性,减少假阳性的发生。
4、灵敏度稳定:理论上,由于核酸检测可以将病毒模板扩增,其灵敏度高于免疫学检测方法。而免疫学方法对样本的要求相对较低,抗原蛋白较稳定,因而抗原检测试剂盒灵敏度表现稳定。
总之,新型冠状病毒(SARS-COV-2)抗原检测法诊断快速、准确、对设备和人员要求低,其特点非常适合大规模新冠病毒感染疑似病例的快速排查,对疫情集中暴发的快速诊断非常有效。
国内IVD企业从未示弱
本次新冠疫情爆发以来,国内的很多IVD企业一直表现优异,国外能做出来的检测技术我们“中国速度、中国技术、中国制造”也从未示弱。编者从江苏美克医学技术有限公司了解到,在疫情前期公司就研发生产出抗体检测试剂支援全国和全球各地疫情防控,在此之后公司继续在抗原检测、中和抗体检测等技术方面进行突破。据悉,该公司的抗原检测产品和中和抗体检测产品已获得欧盟CE认证,可正式出口到对欧盟CE认可的国家和地区。
相关测试数据对比表媲美国外厂家(由公开数据整理)
抗原检测产品
除了抗原检测产品外,美克医学还研发出更加快速、方便的中和抗体检测产品,目前产品已经在多家医疗机构对疫苗接种人群和新冠肺炎康复人群体内的中和抗体水平进行了验证,与中和实验的检测结果一致性达到
⑧ 抗原检测前不能喝可乐、橙汁
抗原检测前不能喝可乐、橙汁?
抗原检测前不能喝可乐、橙汁?最近,社交平台频繁出现与抗原检测试剂盒有关的“实验”视频:用可乐滴入试剂盒,发现可乐抗原检测“阳性”,抗原检测前不能喝可乐、橙汁?
网络上近日流传称,抗原检测时,用可乐或橙汁会导致抗原检测试剂呈弱阳性。据网传图片显示,标注滴入可乐字样的抗原试剂中,下方T位出现颜色非常淡的黄色横条。而其他,滴入其他液体的试剂均显示正常。另一段网传视频显示,采用橙汁滴入抗原试剂也会出现假阳性情况。
一份发表于由耶鲁大学、冷泉港实验室等联合建立的临床医学资料库MedRxiv的研究也显示,汽水、能量饮料或酒精饮料(伏特加和威士忌)等可能会让人们在未感染新冠病毒的情况下新冠抗原检测呈阳性。
研究数据显示,一个样本(1/14;7%)泉水产生了阴性结果。十种饮料(10/14;71%)产生阳性或弱阳性结果。三个样品(3/14;21%)产生了无效结果,其中,主要是浓缩果汁饮料。饮料的pH值(13/14中的pH 5.0,93%;1/14中的pH 6.5;7%)或饮料的糖含量(范围0-10.7克/100毫升)与其阳性结果之间没有明显的相关性。4种人造甜味剂均产生负面结果。
研究指出,出现这种情况,不是因为新冠检测仪质量差,而是因为软饮中的酸性物质可能会起反应,使得结果呈阳性。
在上海网络平台辟谣中,上海交通大学医学院上海市免疫学研究所教授王颖表示,可乐作为一种常见的饮料,其组成复杂,如果直接倒入含有保存液的提取管中,并将此混合液加入测试卡的样本孔后,随着液体的扩散,有可能使在T位和C位的抗体发生结构变化,从而显示出不用于胶体金紫红色的其他颜色条带,所获得的条带并没有结果判定的意义。
香港大学病毒学家金冬雁告诉界面新闻,抗原检测与验孕检测的原理相同。从抗原检测试剂结构来看,试剂由对照部分与样本部分两部分构成,即本身试剂内对照部分就含有阳性成分。采用非正确手段进行抗原检测,很容易将破坏试剂内部结构,导致对照部分与样本部分混合,造成假阳性。
金冬雁表示,通过前述现象得出的结论并不科学且没有意义,应该按说明书正确使用抗原试剂检测。当前国内审批通过且获认证的抗原检测试剂均能达到检测标准,不需要过度担心。
自国家开放抗原检测以来。截至目前,国家药监局已批准27个新冠病毒抗原检测试剂产品。其中,胶体金法有19款,分别来自万孚生物、诺唯赞等;乳胶法共5款,分别来自丽珠集团、北京金沃夫等。荧光免疫层析法则有3款,分别来自华大基因、北京华科泰、深圳生物。
针对不同技术路线的新冠抗原试剂,相关厂家也对上述情况进行了解析。
以乳胶法为例。4月14日,丽珠集团相关负责人告诉界面新闻,橘子汁及其他果汁、酱油、其他碳酸饮料等液体成分复杂,而且有一定的酸碱性,有可能和“T线”、“C线”上的生物原料染色或产生反应,或者破坏标记物(特别是非共价链接的标记物),将它们直接滴入试剂卡有可能会产生阴性、阳性、无效等一系列结果,这是没有意义的。
上述负责人表示,任何工具都有专用属性,新冠抗原检测卡是专门检测人是否感染新型冠状病毒的检测工具,必须针对性地使用。
丽珠集团相关负责人还表示,丽珠的新冠抗原检测试剂盒采用彩色乳胶微球粒作为信号标记,乳胶微球粒径均一,且比常规胶体金颗粒大5-10倍,检测灵敏度有所提高。彩色乳胶微球合成时掺入了羧基等活化基团,标记抗体与乳胶通过化学键共价连接,比胶体金与蛋白之间通过电荷连接更稳定。因此,出现前述情况的假阳性概率较低。
目前新冠抗原自测试剂有三种方法:荧光层析法、胶体金法和乳胶法,其中荧光层析法需要专业设备,广泛的自测有难度;丽珠的自测抗原试剂采用乳胶法。胶体金法和乳胶法是不需要仪器可以自己检测的;胶体金法和乳胶法对比,乳胶法结果更清晰,结果更稳定。而荧光免疫层析法则需要额外的设备配合判读。
以胶体金法为例。4月14日,某胶体金法抗原获批公司相关负责人告诉界面新闻,抗原检测中需要使用抗体(专业称为双抗体夹心法),而抗体本质上属于蛋白质。因为蛋白质有其特定的活性PH范围,当它所处的溶液环境发生变化时,例如遇到酸,容易聚集从而失去活性。
因此,在抗原检测中,如果在加样孔滴入酸性液体(例如橙汁,柠檬汁,可乐等),试剂中的抗体或会直接产生大量聚集不移动(表现为结果阅读区空白一片),或与结果阅读区域T/C线抗体一起聚集沉淀显色,形成假阳性现象。
而在荧光免疫层析法方面。华大基因相关负责人告诉界面新闻记者,华大的新冠抗原检测试剂盒采用荧光免疫层析法,荧光定量免疫层析产品以功能化纳米微球为载体技术,结合荧光标记物探针,发光稳定性高,仪器直接检测激发荧光信号而非传统金标定量所采用的CCD表层光密度扫描技术。
检测信号具有较高的信噪比、更高的信号检测量和检测灵敏度。因此,出现前述情况的假阳性概率均较低。
最近,网上流传各种视频:
不用捅鼻子,直接滴入抗原试剂,
几分钟后,检测结果显示阴性;
把橙汁滴入板条加样孔,
没过多久便出现了“两条杠”……
人们开始迷惑抗原检测有效吗?
该如何认知试剂盒的检测结果?
来看权威解答
抗原检测的'对象是人体样本
生物芯片上海国家工程研究中心专家指出新冠病毒抗原检测的对象应是人体样本。按照规范的检测流程操作,才能确保抗原检测结果的准确性。
滴入可乐或橙汁,
试剂盒呈现“弱阳性 ”?
生物芯片上海国家工程研究中心主任郜恒骏指出,目前用于抗原检测的试剂盒用的是胶体金技术,胶体物质容易受到酸性素质破坏。可乐或者橙子的ph值比较低,直接用可乐或者橙汁加样,会破坏胶体金的结构,可能造成假阳性结果。
但是,人吃橙子、喝可乐是进入消化道,从口腔到食管再到胃。而抗原检测是从鼻腔粘膜中取样本,检测前吃橙子或喝可乐,不会对检测结果有影响。
直接滴入抗原试剂液
甚至清水也会测出来阴性?
有市民做了个小实验,将用于抗原检测的棉签直接放进试剂中搅一搅,然后把试剂滴入试剂盒,很快试剂盒的c区出现了一条红线。“我还没捅鼻子呢,抗原检测就呈阴性了。这是不是说明,抗原检测试剂盒本身有问题?”
对此,新冠病毒检测领域的有关专家指出,若加入的样本中无新型冠状病毒抗原,则t区的检测线不显色,只有c区一条红线,表明是阴性结果。其实,c区的红线也叫质控线,无论样本中是否含有新冠抗原,加样后的抗原检测试剂盒,一定会出现c线。只要c线没有显色,检测结果就是无效的,需要使用新的检测试纸重测或者选择核酸检测。
专家提醒:
1、检测前,需洗手做好清洁,不使用已破损的试剂盒,确保抗原检测结果的准确性。
2、抗原检测中,检测物不规范而导致或阴或阳的结果,并不能说明检测盒本身有问题。
最近,社交平台频繁出现与抗原检测试剂盒有关的“实验”视频:或是用可乐滴入试剂盒,发现可乐抗原检测“阳性”;换成橙汁,结果也是“阳性”;还有人用自来水或直接将试剂盒自带提取管里的保存液滴入试剂盒,发现“检测”结果是“阴性”……面对这些结果,很多网友向上海辟谣平台询问:抗原检测试剂盒可靠吗?
这个问题的答案其实很简单:不按照产品说明进行抗原检测,所有的结果都无效,不能证明试剂盒不可靠。
如果了解一下抗原检测试剂盒的原理,就不难发现为何用可乐、橙汁、自来水或其他液体进行抗原检测的结果不具备参考性了:
观察一下试剂盒可以发现,C位距离样本孔较远,T位距离样本孔较近。其中,T位含有能与测试液中的病毒抗原发生反应的成分(专业术语为“抗特异性抗体”),简单将该成分命名为“抗体1”,主要用来判断测试液中是否含有病毒抗原成分。
C位含有能够与测试液体中含有的另外一个抗体进行反应的成分(专业术语也叫“特异性抗抗体”),简单命名为“抗体2”。“抗体1”和“抗体2”不一样,当同样液体样本流过时,或是变色,或是不变色。
将含有人体鼻拭子、咽拭子等成分的测试液滴入样本孔后,液体发生扩散。如果在T位产生紫红色条带,那么表明测试液中含有病毒抗原成分;如果T位没有显示紫红色条带,则表明测试液中不含有病毒抗原成分。当测试液再行扩散到C位时,正常情况下都会出现紫红色条带,表明该试剂盒是合格的;如果C位没有紫红色条带,则表明该试剂盒不合格,所获得的结果不可靠。
了解了抗原检测试剂盒的原理,就不难知道为什么不应该用可乐、橙汁、自来水或任何不符合产品说明的液体进行检测了:抗原检测试剂盒的反应仅针对按照使用说明采样得到的人体样本,如鼻拭子、咽拭子等;而可乐、橙汁等其他液体,与人体样本完全不同,它们会破坏提取管里的测试液的成分,加入测试孔后进行反应所产生的任何颜色,都不具备参考性。
由此可见,当我们使用抗原检测试剂盒时,应该严格按照使用说明书进行采样和检测,而不是自作主张地换成其他液体进行“实验”。更不应该做的,是把那些没有科学依据的“实验”冠以“抗原检测结果不准确”的结论,通社交平台分享。
何况,在已有媒体、专业机构等澄清“可乐、橙汁等其他液体检测结果没有意义”的情况下,仍有人使用各种液体进行“实验”并传播不实结论,这已经不是单纯地出于好奇或提醒,而是涉嫌故意误导公众、扰乱检测秩序了。
常见的液体种类数以百计,除了可乐、橙汁、自来水,还有酱油、醋、茶水等,难道都要一一做实验、再请专业机构辟谣吗?这会浪费大量的公共资源。用网络上的话来说,故意进行这类实验且传播不实结论的人,可谓“不是傻就是坏”。
还有网友向上海辟谣平台提出,这些“实验”视频可能会让部分检测者在进行抗原检测时弄虚作假,怎么办?对于这一问题,公众首先不用过于担心。因为核酸检测结果始终是判断是否感染新冠病毒的“金标准”,抗原检测只是快速筛查方式,是辅助手段。
更重要的是,对检测者个人来说,只有按照使用说明进行抗原检测,才能准确了解自己的身体状况。如果弄虚作假,不仅是对他人的不负责,更是对自身健康的不负责。
上海辟谣平台已经多次澄清了各种不正确使用抗原检测试剂盒的做法,可面对那些换种液体又出现的新谣言,由衷地希望:相关网友不要再把抗原检测试剂盒当做恶搞或传播谣言的工具,视频发布平台也要承担审核责任,杜绝这类含有误导内容的视频传播。按规范进行抗原检测,是防控疫情的有效手段,希望每个人都能严肃对待,积极配合。
⑨ 核酸检测是怎么检测
核酸检测是通过磁分离技术将病毒核酸分离,可检查艾滋病、乙肝或丙肝,还可用于新冠病毒的检查。核酸检测是采用PCR扩增方法进行检测血液中是否存在病毒核酸,是利用磁珠上标记特异性吸附特异性核酸,然后在通过磁分离技术将病毒核酸分离出来,适合用来检查艾滋病、乙肝或者丙肝等疾病的感染。核酸检查是准确度比较高,灵敏度高的医学方法,但是核酸检查的成本高,需要去三甲医院才可以进行检查,而且核酸检查适合于目前的新冠状病毒感染者,可以及时的区分出患者。
⑩ 核酸检测实验室主要仪器有哪些
1、核酸提取仪
核酸提取仪是实验室的必备仪器,应用配套的核酸提取试剂能够自动完成样本核酸的提取工作。核酸提取仪是通过磁珠提取法研制出来的一种高通量、高灵敏度的自动核酸纯化提取设备。可以利用机器磁棒架上的磁棒,将吸附有核酸的磁珠移动至不同试剂孔内,经过细胞裂解、核酸吸附、清洗与洗脱等处理,即可得到高纯度的核酸。
2、离心机
离心机也是实验室最基本的仪器,主要是血液离心和DNA、RNA样品核酸提取时用。这里推荐湖南可成离心机。
迷你离心机可使用可成Super MiniStar迷你离心机,微型离心机外观新颖独特,灵巧多用,配备两种离心转子和多种试管套,适用于1.5ml、0.5ml、0.2ml离心管和PCR用0.2ml,8连排离心管。
台式高速离心机使用可成台式高速离心机1-16K,该机型体积小,占用空间小,微机控制,配微量转子,离心速度上升快,离心效率高,常用于DNA样品核酸提取。
台式低温高速离心机可用可成台式高速冷冻离心机 1-16KR,此机型体积小巧,设计紧凑,进口高能效环保制冷系统,具有优良的温度控制性能,制冷快,是RNA样品核酸提取的理想选择。
台式低速离心机推荐使用可成台式低速离心机4-5N,此机型采用无碳刷变频电机,操作宁静噪音低,可快速分离血清。且离心腔内设有独立紫外线灭菌装置,能使细菌、病毒丧失生存力及繁殖力进而消灭细菌、病毒,达到消毒灭菌成效。