猪抗原抗体检测是什么意思

① idexx猪瘟病毒抗体检测试剂盒用的什么抗原

概述

猪瘟病毒（CSFV）、牛病毒性腹泻性病毒(BVDV)以及边界病（BDV）都属于黄病毒属的成员。由于CSFV的高致病力和高致死率，它已给养殖业造成了巨大的损失。猪感染高致病力毒株后在潜伏期就可以造成传染，经历急性猪瘟或亚急性猪瘟临床症状的猪在出现症状前大量排毒，但耐过后的猪只体内有明显的CSFV抗体，且不再排毒。感染温和性毒株的猪呈慢性感染，在病死前会长期或间歇性地排毒。怀孕母猪可以通过胎盘感染胎儿导致流产、木乃伊化或产出弱猪、畸形胎等。先天性感染低毒力病毒的结果是产出持续性感染的仔猪，仔猪出现免疫耐受，不表现任何症状向外排毒。猪也有可能感染BVDV或BDV。尽管这些感染通常呈温和过程并且是自限性的，但有效的将它们同猪瘟病毒区分是很重要的。

原理

猪瘟病毒抗体ELISA检测试剂盒是用来检测猪血清或血浆中猪瘟病毒抗体的检测试剂盒。该试剂盒是用猪瘟病毒抗原包被的微量反应板，利用阻断ELISA原理来检测猪血清或血浆中猪瘟病毒抗体。如果被检样品中存在猪瘟病毒抗体，它们就会阻断辣根过氧化物酶标记（HRPO）的抗猪瘟病毒的单克隆抗体。单克隆抗体与猪瘟病毒抗原的结合可以通过辣根过氧化物酶与底物的显色程度进行判定，即用酶标仪在单波长450nm或双波长450nm与620nm测定该反应体系的吸光度。当被检样品中含有猪瘟病毒抗体（阳性结果）时，显色就会变浅，当被检样品中不含有抗猪瘟病毒抗体（阴性结果）时，显色就会变深。样本的阻断率可以通过450nm波长样本吸光度与阴性对照吸光度的比值来确定

试剂

一个ELISA反应板可以检测92份样品（另加两个对照，每个双孔），或46个未知样品，每个样品加双孔。双孔检测法有利于检测结果的准确性。

1.用猪瘟病毒抗原包被的ELISA反应板

2.洗涤液（10×）

3.阴性对照

4.阳性对照

5.样品稀释液

6.辣根过氧化物酶标记(HRPO)的抗猪瘟病毒的单克隆抗体

7.TMB底物

8.终止液

自备器材

1．微量移液器，50μl和100μl。

2．一次性微量移液器使用的吸头。

3．蒸馏水或去离子水。

4．洗板用的洗瓶或洗板机。

5．温箱或微量反应板用的封条。

6．酶标仪。

注意事项

1．要认真阅读操作说明，按操作说明进行操作。

2．试剂盒及试剂盒中的所有试剂要保存在2~7℃。

3．没有用过的微量反应板必须密封于塑料袋中并保存在2~7℃。

4．不同批次的试剂或说明书不可混合使用。

5．使用处理各个试剂时要小心，严防细菌和真菌对试剂的污染。

6．禁止使用过期的试剂。

7．在处理样本和试剂盒中的试剂时禁止吃食物、喝水和吸烟等。

8．各个样本使用不同的吸头，以防污染。

9．每次检测都要加阳性对照和阴性对照。

10．稀释各种试剂组分时只能使用超纯水。

11．底物溶液对眼睛、皮肤以及呼吸系统都有刺激作用，在使用过程中要防止该溶液接触眼睛和皮肤。

12．终止液中含有强酸HCl,容易引发烧伤，处理该溶液时一定要小心谨慎。

13．用吸量管吸取液体时禁止用嘴。

14．该试剂盒仅用于体外检测。

试剂准备

包被的微量反应板，样品稀释液，阳性对照，阴性对照，酶标二抗，底物溶液和终止液使用前无需处理。

洗涤液(10×)浓缩的洗涤液在使用前必须用超纯水进行10倍稀释。被稀释了的洗涤液可以在4℃的条件下保存3天，或冰冻条件下保存一年。如：250ml的洗涤液需用25ml的浓缩洗涤液和225ml的超纯水充分混合配成而成。注意：如果浓缩液中含有结晶，在使用之前必须将它融化，应将该液温水浴30分钟以上。

样品准备

新鲜的、冷藏（4°C少于8天）的、冰冻的血清或血浆都可以用于检测。

操作步骤

1．在使用时，所有的试剂盒组分都必须恢复到室温18~25℃。使用前应将各组分放置于室温至少一小时。

2．分别将50μl样品稀释液加入每个检测孔和对照孔中。

3．分别将50μl的阳性对照和阴性对照加入相应的对照孔中，注意不同对照的吸头要更换，以防污染。

4．分别将50μl的被检样品加入剩下的检测孔中，注意不同检样的吸头要分开，以防污染。

5．轻弹微量反应板或用振荡器振荡，将反应板中的溶液混匀。

6．将微量反应板用封条封闭或于湿箱中（18~25℃）孵育2小时，也可以将微量反应板用封条封闭或于湿箱中孵育过夜。

7．吸出反应孔中的液体，并用稀释好的洗涤液洗涤3次，注意每次洗涤时都要将洗涤液加满反应孔，弃去反应孔中的洗涤液并拍干反应板。也可以用洗板机洗涤3次，每个反应孔应加300μl左右的洗涤液。注意洗板时要小心，以免样本之间的交叉污染。

8．分别将100μl的抗-CSFV酶标二抗(即取即用)加入反应孔中，用封条封闭反应板并于室温下或湿箱中孵育30分钟。

9．洗板（见6）后，分别将100μl的底物溶液加入反应孔中，并于避光、室温条件下放置10分钟。加完第一孔后即可计时。

10．在每个反应孔中加入100μl的终止液终止反应。注意要按加酶标二抗的顺序加终止液。

11．在450nm处测定样本以及对照的吸光度值，也可用双波长（450nm和620nm）测定样本以及对照的吸光度值，空气调零。

12．计算样本和对照的平均吸光度值（见计算）。

计算方法

计算被检样本的平均值OD450（＝ODTEST）、阳性对照的平均值（＝ODPOS）、阴性对照的平均值（＝ODNEG）。

根据以下公式计算被检样本和阳性对照的阻断率；（阳性对照阻断率以同样方法计算）

ODNEG－ODTEST

阻断率＝————————×100%

ODNEG3

试验有效性

阴性对照的平均OD450应大于0.50。阳性对照的阻断率应大于50％。

结果判定

如果被检样本的阻断率大于或等于40％，该样本就可以被判为阳性（有CSFV抗体存在）。如果被检样本的阻断率小于或等于30％，该样本就可以被判为阴性（无抗CSFV抗体存在）。如果被检样本的阻断率在30~40％之间，就应在数日后再对该动物进行重测。

② 什么是抗原检测和核酸检测的区别在哪儿

抗原就像是病毒外面穿的“衣服”，核酸则是病毒里面的基因。
抗原检测就是从抗体出发去测“衣服的部分，让病毒显示出来。
抗原检测更方便、快捷，但敏感性稍差。
核酸检测更复杂，获取结果时间长，但敏感性更高。

③ 猪病常用的血清学诊断方法有哪些

抗原和相应的抗体在动物体内或体外都能发生特异性结合反应，这种反应称为抗原抗体反应，习惯上把体内的抗原抗体反应称为免疫反应，体外的抗原抗体反应称为血清学反应，因为抗体主要存在于血清中。

血清学反应可以用已知的抗体检查未知的抗原，也可用已知抗原测定未知的抗体。人们根据抗体能与相应抗原发生反应并出现可见的抗原—抗体复合物的原理，设计了许多血清学诊断方法，不仅可以检测动物体内乃至体外的病原微生物，或其抗原性成分，而且还可以测定动物机体对病原微生物的侵袭或对其抗原成分的免疫反应。在抗原—抗体复合物成不可见状态时，可以通过琼脂扩散、凝集实验以及酶标记等指示系统，使其变为可见或可测状态。

目前已知的血清学诊断方法很多，现仅介绍几种在目前条件下规模化猪场通过学习都能做到的诊断方法：

（1）凝集试验猪病诊断过程中常用的操作方法有以下几种：

①全血平板凝集试验实践中主要用于细菌性疾病的抗体检测和抗原（经分离培养后）的鉴定。现举例用已知猪丹毒抗原（丹毒杆菌的纯培养液）测定被检猪血清中的抗体。其操作步骤如下：

a.材料猪丹毒凝集抗原，玻片，9号针头，酒精棉球，酒精灯，铂耳（取血环）等。b.操作用铂耳取已知抗原1滴，置于玻片上。用酒精棉球擦拭针头，铂耳在酒精灯上灼烧消毒。用针头刺破被检猪的耳静脉，以铂耳取血与玻片上的抗原等量混合，在2～3分钟内观察结果。c.结果判定出现颗粒状的凝集，为阳性反应。否则为阴性。

②试管凝集试验是一种定量法，用于测定被检血清或其他体液中有否某种抗体及其效价，可做临床的辅助诊断，或用于流行病学监测。在猪场中，本法常用于猪布氏杆菌病的诊断。

A.材料布氏杆菌病试管凝集抗原（1∶20倍稀释），布氏杆菌病阳性血清、阴性血清（1∶25倍稀释），稀释液（0.5 %石炭酸生理盐水），灭菌小试管，1毫升吸管，试管架，待检血清等。B.操作取试管7支置于试管架上，设阳性和阴性血清及抗原对照各1支，测定管4支，以后每增加1个样品，只需增加4支测定管。

按表10示意稀释血清，加抗原，完成后每支试管内应含1毫升液体。

④ 一头猪有猪瘟抗原还有猪瘟抗体是为什么

本人顺便路过这里,发现这个问题。就我所知，回答如下：猪瘟疫苗本身就是抗原，注射后会在体内增殖，伴随着增殖而刺激产生免疫反应，抗体会在14天到21天时出现明显检测信号，随之抗原消失，消失时间约16天以后，如果用最新的分子诊断方法检测可发现可持续至40天左右。当然，你用的金标法，最多可在16天内检测到，如果在16天后检测到，很可能有强毒感染，而不是疫苗毒持续的结果。

另外，猪瘟疫苗免疫失败的现象比较常见，如果在免疫后很长时间内还能检测到猪瘟，很可能猪群中原本就有猪瘟毒感染，而没有发病，这样会导致检测结果抗原抗体同时阳性。

抗体阳性并不代表没有野毒感染。抗原阳性也并不代表抗体阴性。

⑤ 母猪猪瘟抗体为阳性说明什么

如果你猪场做猪瘟免疫的话，说明是好的，猪瘟的抗体还有，但没有做免疫的话，有可能是感染猪瘟病毒了。但你还是要多方面的考虑，也有可能是你做的猪瘟免疫，但也同时感染了猪瘟病毒，那么也能检测阳性，如果你不放心的话，最好做一下PCR，就能确定是不是得猪瘟病了。

⑥ 猪病进行抗体检测，想问一下有谁知道那个阻断率是什么还有尽可能的详细说明一下有关抗体检测结果的分析

阻断率是在竞争ELISA方法时用的，比如猪瘟抗体就是用阻断率来表示。抗体结果分析，无非就看阴阳性，整个抗体水平整齐度，用来监测疫苗的效果，也可以提示某些疾病的感染

⑦ 抗原 检测与抗体检测的区别

目的不同：抗原检测是检查体内是否还有病原体，抗体检测是检查机体对病原体是否有抗性。
时间点不同：抗原检测一般在潜伏期、急性期或病程初期，抗体检测要晚一些，不同时间段检测到不同的分型抗体可以判断病程进展程度。
病程初期一般呈抗原阳性，抗体阴性；病程恢复期抗原阴性，抗体阳性。（不同的传染病，抗原转阴及抗体阳转有不同表现）。
没有哪个更好之说，也不能只看单一的检测结果，都很重要，它们不可能有相同的结果（定量），在疾病诊断上缺一不可。

⑧ 抗体和抗原是什么意思

对于你的补充问题
对乙型肝炎的诊断，主要靠化验检查。常规检查有肝功能，包括血清胆红素（T-BiI）谷丙转氨酶（GPT）。乙肝表面抗（HBsAg）等。血清胆红素及谷丙转氨酶升高，均说明肝内有炎症。乙肝表面抗原阳性说明已感染了乙肝病毒。

如果乙肝表面抗原为阳性者，可进一步检查乙肝系列。它们分别为：（1）乙肝表面抗（HBsAg），（2）乙肝表面抗体（抗-HBs）。（3）e抗原（HBeAg).(4)e抗体(抗-HBe).(5)核心抗体(抗-HBc)。简单地讲；第（1）项代表感染。第（2）项代表抵抗力。第（3）项代表病毒复制。第（4）项须结合第（1）项分析；第（1）项阳性者第（4）代表病毒复制。第（1）项为阴性者，第（4）项阳性只能说明感染过乙肝把病毒已经痊愈。第（5）项阳性的临床意义与第（4）项大致相同。平时说的大三阳指第（1），（3），（5）项阳性，为急性期感染。平时说的小三阳指第（1），（4），（5）项阳性，多为慢性期感染。所谓的携带者，指第（1），（5）项阳性。乙肝患者痊愈后，多有第（2），（4），（5）项阳性或第（4），（5）项阳性或第（2），（4），（5）项单项阳性。

个别病人需做特殊检查，可检查HBV-DNA，PCR，以确定有无病毒复制。慢性患者，须查甲胎球蛋白（AFP），以排除肝硬化及肝肿瘤。除做化验检查外，肝病患者还应该做B型超声检查。

抗原(antigen, Ag)是一类能诱导免疫系统发生免疫应答，并能与免疫应答的产物(抗体或效应细胞)发生特异性结合的物质。抗原具有免疫原性和反应原性两种性质。

免疫原性是指抗原刺激机体后，机体免疫系统能形成抗体或致敏T淋巴细胞的特异性免疫反应。
反应原性是指产生的抗体或致敏T淋巴细胞能与抗原进行特异性结合的免疫反应。

既具免疫原性又具反应原性的抗原称免疫原。某种物质之所以能成为一个良好的免疫原，是因为它有特异的化学结构，这就是抗原决定簇。抗原决定簇可以与相应的淋巴细胞表面的受体蛋白结合引起免疫应答。一个抗原决定簇只能激活一种淋巴细胞(对于B细胞)只刺激产生一种类型抗体。一个抗原可以有一个或多个抗原决定簇。抗原功能性决定簇的总数称抗原结合价。抗原决定簇少，抗体与抗原结合就少，往往就见不到反应。天然抗原或复杂的半抗原决定簇往往多达几十个，因此可以与很多抗体分子交互结合。

有些分子本身没有免疫原性，不能引起免疫反应，但是如果把它们和某些载体分子，如蛋白质分子结合起来就有了免疫原性，就能使动物对这一复合分子产生特异的抗体。这种本身无免疫原性，但有反应原性，一旦把它与载体结合就有了免疫原性的物质，就称半抗原或不完全抗原。如寡糖，类脂和一些简单的化学物质等。吗啡就是一种半抗原，把它与蛋白分子结合起来，就可以使动物体产生相应抗体，此抗体可作为检测是否吸毒的试剂。

抗原相对分子量一般都在10X103以上，而在4X103以下者一般无免疫原性。在一定相对分子量范围内，分子量大者免疫原性强，这是因为：
1、相对分子量大，表面抗原决定簇就多，而淋巴细胞要求一定数量抗原决定簇刺激才能活化；
2、大分子化学结构稳定，在水中呈胶体，不易被机体破坏或排除，这样在体内存留时间就长，有利于持续刺激淋巴细胞。核酸本身免疫原性很低，但只要有5个核苷酸与蛋白质分子载体连接，就能刺激机体产生抗体。

抗原可分外源性抗原和内源性抗原两类，前者如细菌、病毒、花粉、各种毒素以及小型动植物；后者主要为机体从未接触过的物质或构象发生改变的自身成分，如变性的IgG重链、晶状体物质、精子、脑组织等。

抗体是人或动物受抗原物质（如细菌或其毒素、病毒等）刺激后，由浆细胞合成和分泌的一种特异性蛋白质。抗体是人体抵抗感染的一种重要武器。19世纪末，德国科学家Behring发明了用含白喉抗毒素的动物血清注射给白喉患儿，使其治愈。此后医学家们用含有不同抗体的动物血清或人血清来治疗或预防多种传染病。由于Behring开创了抗体治疗传染病的方法，对防治传染病作出了卓越贡献，本世纪初荣获诺贝尔医学奖。但传统的人工生产抗体的方法是将抗原物质（如细菌或其毒素等）注射给动物（如马、羊等），使动物产生针对该抗原物质的抗体。人们抽取免疫动物的血液，分离出含抗体的血清。这种体内生产抗体的传统方法有许多缺点。例如所获得的抗体不纯，不能连续生产，动物饲养与管理工作繁重等，故长期以来医学家们一直在探索在试管内（即体外）生产抗体的方法， 1976年英国剑桥大学两位科学家Milstein和Koh1er将小鼠骨髓瘤细胞与免疫小鼠的脾细胞杂交。小鼠骨髓瘤细胞能在体外无限增殖传代并能分泌无抗体活性的球蛋白；免疫小鼠脾细胞能产生针对某种抗原的抗体，但不能在体外无限增殖。将两者融合成一种杂交瘤细胞，后者继承了两个亲代细胞的特点，既可在体外无限增殖，又可产生针对某种抗原的抗休。一个杂交瘤细胞在体外不断增殖所形成的细胞集团，被称之为克隆。在同一克隆中所有的细胞产生相同的抗体，此抗体称之为单克隆抗体（简称McAb）。它是单一特异性的高纯度的抗体，可在体外连续大量生产。McAb在临床医学及基础医学领域发挥了巨大作用，给某些难治疾病的诊断、防治带来了新的希望。如针对某种肿瘤细胞的McAb与毒素、抗癌药物或放射性物质结合成复合物（医学上称为生物导弹），将此复合物注射到病人体内，可定向杀伤McAb所针对的肿瘤细胞，而对其它正常细胞则无作用，这是任何其它抗癌治疗方法办不到的。因此，单克隆抗体技术被誉为现代生物科学的一项革命性突破，是当今四大生物工程技术之一。由于Milstein和kohler的杰出贡献，1984年他俩共同获取了诺贝尔医学奖。