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衣原体检测标本是什么

发布时间:2022-06-13 16:36:59

① 衣原体感染的检查

1.抗原检测
(1)涂片镜检可取眼结膜、宫颈拭子或刮片做涂片,下呼吸道感染纤维支气管镜刷取分泌物或灌洗液检测上皮细胞胞浆内的沙眼衣原体包涵体。方法简便,但检出率低于30%。
(2)酶联免疫吸附试验(ELISA)检测临床标本中衣原体抗原,该方法敏感、简便快速,但与细菌有交叉反应,可出现假阳性,尤其是鼻咽部标本。
2.核酸检测
聚合酶链反应(PCR)用于检测衣原体DNA,能从标本中直接鉴定衣原体的种和型别。核酸探针检测活检标本中的衣原体DNA。
3.抗体检测
生殖道感染无并发症者可产生低滴度的抗体;约20%急性衣原体尿道炎患者不产生抗体。常用的有:
(1)补体结合试验适用于性病淋巴肉芽肿、鹦鹉热及肺炎衣原体感染诊断,敏感度较低。
(2)微量间接免疫荧光试验本实验是诊断肺炎衣原体感染最敏感的方法之一。若双份血清效价呈4倍增加,或单份血清IgM抗体效价≥1:16,或IgG抗体效价≥1:512,可诊断为急性感染。
(3)直接荧光抗体测定可以检测衣原体各种类型的标本,该法敏感、特异、快速,为一种操作性和实用性都很强的诊断技术。

② 女性支原体衣原体的检验

支原体主要存在于人和动物的腔道粘膜。支原体生殖道感染与非淋菌性尿道炎或宫颈炎有关,此外可引起前列腺炎、附睾炎、输卵管炎、流产、死产和不育症等。能引起人类非淋菌性尿道炎的主要有解脲支原体、人型支原体、生殖支原体。在正常人的泌尿生殖道中也可能有支原体寄生。
实验室诊断主要采用液体分离培养和固体分离培养法
[原理]
解脲支原体(Uu)具有尿素酶,能分解尿素产氨,使含酚红指示剂Uu液体培养基pH值升高变碱性,液体颜色由黄变红。
人型支原体(Mh)具有精氨酸酶,能分解精氨酸产氨,使含酚红指示剂的Mh液体培养基pH值升高,液体颜色由黄变红。
生殖支原体在含5%CO2环境中的固体培养基上,可形成煎蛋状集落。但是,由于生殖支原体生长缓慢,而且需要的营养成分复杂,因此,分离培养的难度较大。目前主要靠DNA探针及PCR技术检测生殖支原体。
[方法]
1.标本采集:
男性:用无菌棉拭子插入尿道约2cm处旋转,静止数秒钟后取材。女性:抹去宫颈口粘液,用无菌拭子插入宫颈管l-2cm旋转取材。
尚可用前列腺液、精液、尿液离心沉淀物作标本。
2.接种:将标本洗入Uu或Mh液体培养基,或用滤菌器过滤接种。
3.培养:置37℃恒温箱孵育1~3天,每日观察培养基颜色变化。
[结果]
液体培养基由黄色变红色,清亮透明可初步判断为Uu或Mh阳性。
衣原体:专性细胞内寄生,并有近似的细胞壁结构,含DNA、RNA及核蛋白体,具有独特生活周期的原核细胞型微生物。
衣原体的发育周期分为原体和始体两个阶段。原体具有传染性,可在宿主细胞外存活,始体仅存在于细胞内无传染性。能引起人类非淋菌性尿道炎的主要有沙眼衣原体。
实验室诊断主要是衣原体抗原检测(快速胶体金法)
[原理]
衣原体脂多糖抗原与胶体金标记的单克隆抗体结合形成复合物,复合物经虹吸作用而移动,在结果窗被含有的单克隆抗衣原体抗体捕获而形成黑色沉淀线。
[方法]
1、取材:
男性:用无菌棉拭子插入尿道约2cm处旋转,静止数秒钟后取材。
女性:抹去宫颈口粘液,用无菌拭子插入宫颈管l-2cm旋转取材。
尚可用尿道取材、溃疡部位或腹股沟横痃抽吸液。
2、标本处理:将拭子置于采集管内加入提取缓冲液于刻度,800C水浴10分钟,放置室温冷却至少5分钟。
3、检测:滴加5滴标本提取物于试验板的检测窗,静置15分钟,读取结果。
[结果]
结果窗出现一条黑线,表明试验阳性,如无,试验阴性。
结果窗出现一弱黑线,表明结果可疑。

③ 衣原体和支原体检查取什么做检验标本

宫颈口的或者阴道分泌物,去医院直接和大夫说我查支原体衣原体,很简单,二天后出结果!!

④ 衣原体感染的检查项目有哪些

生殖道衣原体感染的诊断需要依靠性接触史、临床表现和化验检查结果。当有典型的尿道炎、宫颈炎症状时,诊断不难。但由于无症状感染多见,化验检查显得十分重要。
通过化验可以确定病因,从而针对病因进行治疗,并有助于对病人的性伴侣做治疗以防止进一步传播;还可发现无症状感染者,有助于消除传染源;在女病人中检查并治疗衣原体感染将能防止异位妊娠或不孕的发生。
诊断沙眼衣原体感染的化验检查方法包括标本涂片染色显微镜检查、衣原体培养法、衣原体抗原检测、DNA检测及PCR检测。涂片检查是一种简便、价廉的诊断方法,可用于新生儿眼结膜刮片的检查,但它不适宜用于生殖道沙眼衣原体感染的诊断,因为在这种情况下,它的敏感性和特异性均较低。
血常规
周围血白细胞计数一般正常,嗜酸性粒细胞增多。
x线检查
衣原体肺炎胸片无特异性,多为单侧下叶浸润,表现为节段性肺炎,严重者呈广泛双侧肺炎。沙眼衣原体肺炎胸片显示双侧广泛间质和肺泡浸润,过度充气征比较常见,偶见大叶实变。
直接涂片镜检
取咽分泌物、痰、呼吸道教膜或其他部位标本做涂片,进行GZmesa染色,原体染成红色,始体染成深蓝色。沙眼衣原体包涵体因含有糖原。801染色染成褐色。
快速抗原检测
多采用单克隆抗体直接免疫荧光法检测标本中的衣原体,还可应用2I—IsA法加入抗衣原体抗体、酶标抗体18G及底物进行比色定量检测。这两种方法简便敏感。
衣原体分离
肺炎衣原体培养最好用Hela细胞或Hep一2细胞,一般取气管或鼻咽吸取物作为临床标本,及时接种。衣原体鉴定多采用Hela细胞或Hep一2细胞培养后通过特异性单克隆荧光抗体法(MFA),该技术敏感性高,特异性强,如能早期采集标本,可在48h内获得阳性结果。
血清学检全
采用补体结合试验,着恢复期血清抗体效价比急性期血清效价增高4倍或4倍以上,即有诊断意义,但无早期诊断意义。微量免疫荧光法(MrF)适用于沙眼衣原体。
PcR技术
普通PcR技术检测肺炎衣原体特异性DNA,具有快速、简便、特异的优点,敏感性高于细胞分离技术,但在检测咽拭于标本中效果不够理想。用套式PcR(nPcR)检测可显著提高其敏感性。

⑤ 衣原体dna检测是什么

衣原体检查就是通过具体感染的症状,通过x线检查、病原学、血清学等检查做综合分析,对是否感染了衣原体及严重程度进行诊断或对治疗效果进行评估。致病性衣原体主要有肺炎衣原体及沙眼衣原体,主要引起肺炎及上呼吸道系统炎症和泌尿生殖系统感染。对于支原体感染导致的肺炎症状,临床上一般进行血液检查和胸部x线检查。泌尿系统感染还需要做涂片检测及细胞培养等病原学检查以及血清特异性抗体检测。
病原衣原体主要有肺炎衣原体、沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体,前两者临床最常见。肺炎衣原体被认为是引起肺炎、支气管炎及其他呼吸道感染的常见病原菌。沙眼衣原体除可导致沙眼外,还是公认的性疾病传播的传染源之一。在非淋菌性尿道炎中,几乎一半是由沙眼衣原体感染造成的,其可引起尿道综合征和性病淋巴肉芽肿,男性尿道炎、附睾炎,女性不孕、子宫颈炎、盆腔炎等。新生儿通过产道感染,可引起新生儿眼炎或新生儿肺炎。沙眼衣原体还可以引起成人肺炎,对孕妇危害也较大,可造成宫外孕、流产、死胎、绒毛膜羊膜炎、早产等。鹦鹉热衣原体可引起鹦鹉热,是人类吸入受感染的鸟排泄物的尘粒而感染,发病时常有高烧、头痛、肌肉痛、寒战和上下呼吸道不适,部分患者可并发脑炎、心肌炎或血栓性静脉炎。

⑥ 肺炎衣原体的鉴定检测方法

临床依据患者的症状和体征,很难鉴别细菌性、病毒性、肺炎支原体或肺炎衣原体的感染,以致在临床用药上存在困难,一般只能依赖实验室通过人体体液标本进行病因检测。碘染色法和姬姆萨染色法不适用于Cpn的检测。细胞免疫组织化学法对组织切片进行生物素-抗生物素-过氧化物酶系统着色(又称ABC法)。在冠状动脉硬化斑块上可检出Cpn-EB,透射电镜证明在AS泡沫细胞内有特征性的0.4µm大小的EB。该系统设备价格高昂,技术要求高,只限于科研应用。故不适合直接涂片。
目前常用的检测方法有如下几种:
分离培养
分离培养是Cpn特异性实验室诊断方法,可用鼻咽或喉拭子、痰和胸腔积液标本分离Cpn,鼻咽部拭子是进行分离的理想标本,喉和痰液分离Cpn有何差别还不清楚。Cpn需要在组织中进行培养,无细胞培养基不适合Cpn繁殖,Cpn能在呼吸道来源的细胞系如:HEp-2和HL细胞系中稳定生长。拭子采用涤棉、金属线为好,拭子既应注意防污染,亦要防止细胞和Cpn受抑制,取得的标本通常置于加抗生素和小牛血清的蔗糖磷酸缓冲液(保存于4℃,不超过24h),标本置于室温会降低其活性,如果不能在24h内处理,标本应置于−70℃冰箱保存。接种后72h,要证实菌株,可用Cpn特异性或衣原体种特异性(即抗LPS)荧光结合单克隆抗体进行染色。Cpn包涵体不包含糖原,因此不被碘染色。
但是,肺炎衣原体的组织培养较其他衣原体困难,在作分离培养时,常采取以下措施以增强肺炎衣原体的感染性及促进其在细胞中的生长:①接种物离心(3000r/min)。②培养细胞用30µg/ml的二乙氨基乙基葡聚糖(DEAE-dextran)预处理。③加入细胞生长抑制剂,如环己酞亚胺1µg/ml以抑制宿主细胞生长。Kuo等在研究肺炎衣原体培养所需氨基酸时发现,赖氨酸和蛋氨酸的部分或完全缺失可不同程度地促进肺炎衣原体的生长,但该促进作用在加入环己酞亚胺后变得不明显。Theunissen等观察了SPG保存液的pH、离子强度、温度对肺炎衣原体感染HL细胞的影响,发现pH大于8或小于5,原体的存活率迅速减低;在含10%小牛血清的SPG中,外加NaCI浓度小于80mmol/L时原体的活性受到影响,而0.346~4mmol/L的Ca2+或0~2.5mmol/L的Mg2+对原体感染性的影响不明显;在0~20℃24h内,SPG中原体95%以上存活,温度超过20℃,原体的存活率随存放时间的延长下降迅速 。
血清学检测
最常用的血清学方法是补体结合反应。一般用加热处理过的衣原体悬浮液作为抗原(属特异抗原)来测定被检血清(属特异血清)。哺乳动物和禽类一般于感染后7d、10d出现补体结合抗体。通常采取急性和恢复期双份血清,如抗体滴度增高4倍以上,认为系阳性。关于血清学普查判定标准,国内暂定1∶16或以上为阳性,1∶8为可疑,1∶4以下为阴性。
酶联免疫吸附试验(ELISA)
ELISA已用于痰标本的Cpn抗原检测。优点为特异性强、操作简便、易于自动化,并且可用于大批量标本的检测,另外,快速试验过程仅需1h,临界值易判断,由于可检测血清中IgM和IgG,故能区分急性感染和既往感染,适合于临床实验室作为Cpn感染的常规检查;缺点为敏感性差,阳性预期值较低,不适合人群的筛查。
微量免疫荧光抗体检测(MIF)
MIF技术对肺炎衣原体的诊断是特异的且敏感性高,因此被国内外学者誉为Cpn感染诊断的“金标准”。MIF抗体包括3种:IgM、IgG和IgA。初次感染(原发感染)时,IgM于发病后3周出现,IgG于发病后6~8周出现,而IgA反应较弱或不出现;再次感染(重复感染)时,IgG常在1~2周内出现,且效价可以很高,但往往没有IgM出现或其效价很低。目前诊断标准为:①急性感染:双份血清抗体效价升高4倍以上或IgM=1∶16或IgG≥1∶512;②既往感染:IgM<1∶16且1∶16≤IgG<1∶512;③未感染过∶IgG1∶8。总之,MIF试验是经典的国际通用的方法,对Cpn的诊断具有高度的特异性。但该方法的抗原片制作过程复杂,实验室要求条件高。
无论采用何种检测方法,急性期及恢复期的双份血清标本中,肺炎支原体特异性抗体滴度呈4倍或4倍以上增高或减低时,均可确诊为肺炎支原体感染,这是目前国际上公认的标准。
分子生物学检测
用分子生物学方法检测血管组织中Cpn,结果取决于样本收集和操作、引物设计、核酸抽提、扩增物的检测以及假阳性、假阴性结果的预防与鉴别等环节。最常用的引物是omp1、16SrRNA、3SrRNA、Cpn特异性克隆PstI片断等,测定扩增产物多应用琼脂糖电泳、Southernblot、EIA、聚丙烯酰胺胶电泳等。目前分子诊断技术中已有聚合酶链反应(PCR)、套式聚合酶链反应(nPCR)、连接酶链反应(LCR)、转录介导扩增试验(TMA)、基因探针杂交等方法。作为分子生物学方法,PCR法具有快速、简便、灵敏的特点,是Cpn诊断的发展方向。总之,分子生物学方法具有快速、简便、灵敏的优点,是Cpn感染诊断的重要手段。很多学者建议将各种分子生物学方法之间或与其他诊断方法联合应用,并且证明了联合应用能提高Cpn感染诊断的敏感性。如PCR与ELISA联合应用的方法诊断Cpn感染的敏感性高于免疫荧光法、传统PCR法以及ELISA法。此外,其中基因探针杂交和LCR单独使用灵敏度不足,宜与PCR联合应用。nPCR不仅特异性与灵敏度颇占优势,而且由于无须增添任何设备,能开展PCR检测的单位均可实施,是较为适合国情的方法 。

⑦ 衣原体标本该怎样采集处理及检测

标本采集

取材:男性:用无菌棉拭子插入尿道约2厘米处旋转,静止数秒钟后取材。女性:抹去宫颈口粘液,用无菌拭子插入宫颈管1~2厘米旋转取材。尚可用尿道取材、溃疡部位或腹股沟横痃抽吸液。

标本处理:将拭子置于采集管内加入提取缓冲液于刻度,80摄氏度水浴10分钟,放置室温冷却至少5分钟。

检测:滴加5滴标本提取物于试验板的检测窗,静置15分钟,读取结果。

⑧ 衣原体支原体怎么检查

1血常规:周围血白细胞计数一般正常嗜酸性粒细胞增多
2x线检查:衣原体肺炎胸片无特异性多为单侧下叶浸润表现为节段性肺炎严重者呈广泛双侧肺炎沙眼衣原体肺炎胸片显示双侧广泛间质和肺泡浸润过度充气征比较常见偶见大叶实变
3直接涂片镜检:取咽分泌物痰呼吸道教膜或其他部位标本做涂片进行GZmesa染色原体染成红色始体染成深蓝色沙眼衣原体包涵体因含有糖原801染色染成褐色
4快速抗原检测:多采用单克隆抗体直接免疫荧光法检测标本中的衣原体还可应用法加入抗衣原体抗体酶标抗体18G及底物进行比色定量检测这两种方法简便敏感
5衣原体分离 肺炎衣原体培养最好用Hela细胞或Hep一2细胞一般取气管或鼻咽吸取物作为临床标本及时接种目前衣原体鉴定多采用Hela细胞或Hep一2细胞培养后通过特异性单克隆荧光抗体法(MFA)该技术敏感性高特异性强如能早期采集标本可在48h内获得阳性结果
6血清学检全 采用补体结合试验着恢复期血清抗体效价比急性期血清效价增高 4倍或4倍以上即有诊断意义但无早期诊断意义微量免疫荧光法(MrF)适用于沙眼衣原体
7PcR技术 普通PcR技术检测肺炎衣原体特异性DNA具有快速简便特异的优点敏感性高于细胞分离技术但在检测咽拭于标本中效果不够理想用套式PcR检测可显著提高其敏感性

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