艾滋病抗體檢測用哪些物品

⑴ HIV的檢測步驟有哪些

目前艾滋檢測方法很多，步驟也不同。可以到醫院或疾控免費檢測，也可在家自測唾液收集器天貓檢測項目的樣品種類

1. HIV 抗體檢測：全血、血清、血漿、口腔黏膜滲出液、尿液以及干血斑樣品。

2. HIV 抗原檢測：全血、血清、血漿、病毒培養上清液。

3. T 淋巴細胞亞群測定：EDTA 或肝素抗凝全血。

4. HIV-1 病毒載量、基因型、耐葯檢測：血漿、濾紙干血斑（DBS）。

5. HIV 核酸定性與定量、基因型檢測和 HIV-1 分離培養：淋巴細胞富集液、外周血單核淋巴細胞（PBMC）及全血。

當然，實驗室最常用的仍然是血液標本，其他只作為補充樣本。

HIV 抗體檢測

HIV 抗體檢測是艾滋病實驗室檢測的優先選擇項目，在國內絕大多數初篩實驗室應用最廣泛。

1. 初篩方法

（1）酶聯免疫吸附試驗（ELISA）

ELISA 法檢測 HIV 抗體是 HIV 初篩實驗室最常用最普遍的方法，目前檢測試劑已經發展到第四代，即同時檢測血液中 HIV-1P24 抗原和 HIV-1/2 抗體，秉承「寧可錯殺一千，不可漏網一個」的革命精神，其靈敏度遠高於特異性，直叫 HIV 抗體無處遁形。

（2）化學發光或免疫熒光試驗（CIA/IFA）

這個試驗方法是近 10 年迅猛發展的一種新型檢測方法，其採用發光或熒光底物，既可檢測抗體，也可聯合檢測抗原抗體，用發光或熒光儀測定結果，其靈敏度較 ELISA 有了進一步的提高，同時帶來的是檢測成本的增加和假陽性率的增高。

（3）快速檢測（RT）方法

此類方法操作簡便快速，適用於應急檢測、門診急診檢測，但靈敏度和特異性遠不如 ELISA 和發光法，但是經濟實惠，也有一定的市場影響力。主要包括以下幾種方法：明膠顆粒凝集試驗（PA）、免疫滲濾試驗、免疫層析試驗。

2. 確認實驗

（1）免疫印跡試驗（WB）

WB 採用間接法檢測樣品中的抗 HIV-1/HIV-2 特異性抗體。採用聚丙烯醯胺凝膠電泳把分子量大小不等的 HIV-1 蛋白分離開來，經過一系列處理後，硝酸纖維素膜顯示與特異抗原的結合的抗體條帶，從而確診抗體的存在。

（2）條帶/線性免疫試驗（RIBA/LIA）

實驗原理基本同 WB 法，不再贅述。

HIV-1 抗原檢測

1. 篩查實驗

（1）酶聯免疫吸附實驗（ELISA 法）：即第四代抗原抗體聯合檢測試劑盒。抗體包被固相反應孔（管）的底部，待測樣本中 P24 抗原與包被抗體形成抗原抗體復合物，再加入酶（HRP）標記的 HIV-1 抗體與抗原結合，加底物顯色，在酶標儀上讀取結果。因同時檢測抗原抗體，靈敏度大大提高，有效縮短了 HIV 感染的檢測窗口期，但因試劑成本較高，在普通篩查實驗室推廣有一定難度。

（2）酶聯熒光分析法（ELFA）：待測樣品的 p24 抗原與包被在固相孔（管）內的 p24 抗體結合，並被生物素標記的 p24 抗體識別。臨床實驗室應用前景不明朗，需要熒光檢測設備，成本較高。

（3）電化學發光法（ECLIA）：待測樣品的 p24 抗原與包被抗體的磁性微粒和發光劑標記的抗體在反應管中溫育，形成磁性微珠包被抗體-抗原-發光劑標記抗體復合物。

（4）抗原抗體快速檢測法：同快速方法（RT）檢測抗體，不同之處是用 HIV 抗體包被載體，檢測靈敏度同樣較差。

2. 中和試驗

中和試驗主要是 p24 抗原檢測的補充試驗，還可做 HIV-1RNA 的定性或定量檢測，以排除篩查試驗的假陽性。

（1）酶聯免疫吸附實驗（ELISA 法）：待檢樣品先與中和劑（p24 抗原的抗體）共同孵育，如果樣品中存在 p24 抗原，中和抗體將與之結合形成復合物，而不能與固相載體上的捕獲抗體結合。

（2）酶聯熒光分析法（ELFA）：原理和檢測步驟同上述酶聯免疫吸附實驗（ELISA 法），中和率 ≥ 60 %，認為樣品中的 p24 抗原是真陽性。

（3）電化學發光法 (ECLIA)：原理和檢測步驟同上述酶聯免疫吸附實驗（ELISA 法），中和率大於 50%，認為樣品中的 p24 抗原是真陽性。

HIV 核酸檢測

目前國內 HIV 核酸檢測試劑主要為 Taqman 實時熒光 PCR 檢測試劑，可檢測血漿、血清、組織器官或血液製品的 HIV-1RNA 和 DNA，DBS 可用於檢測 RNA/DNA。全球目前正式用於臨床診斷 HIV-1 急性期感染的核酸檢測試劑比較少，主要是美國 FDA 批準的 Gen-Probe 公司生產的 Aptima HIV-1 RNA 核酸定性檢測試劑和歐盟批準的 Abbott M2000 HIV-1 RNA/DNA 定性檢測試劑。

臨床診斷相關的檢測策略及結果報告

HIV 檢測陽性結果的檢測過程一般經歷兩個階段，初篩和復檢程序。以 HIV 抗體檢測為例，具體流程如下：

試劑 1 進行初篩，結果無反應，報告「HIV 抗體陰性」；結果有反應，不能出具陽性報告，必須進入復檢試驗。對初篩有反應的樣品，用原有試劑雙份或雙孔進行復檢試驗（或者兩種試劑復檢），如均無反應，報告「HIV 抗體陰性」；如均有反應或一個有反應一個無反應，進行補充試驗（抗體確證試驗和 HIV-1 核酸試驗），報告 HIV 感染待確定。

⑵ 如何進行艾滋病病毒抗體檢測

艾滋病病毒抗體檢測方法有初篩試驗和確認試驗組成。初篩試驗結果陽性者再做確認試驗以明確診斷。目前的艾滋病病毒抗體檢測都使用新一代試劑，同時檢測艾滋病病毒1型和艾滋病病毒2型。初篩檢測的方法主要是間接酶聯免疫吸附試驗（ELISA
)，確認檢測的方法為免疫蛋白印跡試驗（WB）。

⑶ 艾滋病抗體的檢查方法

艾滋病病毒抗體檢測
艾滋病病毒抗體檢測：檢測血液中的艾滋病病毒抗體是目前最常用的檢測艾滋病病毒感染的實驗室方法，一般要經過兩個步驟：首先做初篩試驗，如果為陽性，再做確認試驗，確認試驗陽性才可診斷為艾滋病病毒感染。
常用的方法有：
1病原檢測病原檢測主要指用病毒分離培養、電鏡形態觀察、病毒抗原檢測和基因測定等方法從宿主標本中直接檢測病毒或病毒基因。由於前兩種方法難度大，且需要特殊設備和專業技術人員。因此僅抗原檢測和RT-PCR(反轉錄－PCR)可用於臨床診斷。
2 抗體檢測血清中HIV抗體是判斷HIV感染的間接指標。根據其主要的適用范圍，可將現有HIV抗體檢測方法分為篩檢試驗和確證試驗。
3 確證試劑篩檢實驗陽性血清的確證最常用的是Western blot（WB），由於該法相對窗口期較長，靈敏度稍差，而且成本高昂，因此只適合作為確證實驗。隨著第三代和第四代HIV診斷試劑靈敏度的提高，WB已越來越滿足不了對其作為確證實驗的要求。FDA批準的另一類篩檢確證試劑是-免疫熒光-試驗（IFA）。IFA比WB的成本低，而且操作也相對簡單，整個過程在1-1.5小時內即可結束。此法的主要缺點是需要昂貴的熒光檢測儀和有經驗的專業人員來觀察評判結果，而且實驗結果無法長期保存。現在FDA推薦在向WB不能確定的供血員發布最終結果時以IFA的陰性或陽性為准，但不作為血液合格的標准。
4篩檢試驗篩檢試驗主要用於對供血員進行篩查，因此要求操作簡便，成本低廉，而且靈敏、特異。目前世界上主要的篩檢方法仍然是ELISA，還有少數的顆粒凝集試劑和快速ELISA試劑。ELISA有很高的靈敏度和特異性，操作簡單，僅需要實驗室配備酶標儀和洗板機即可應用，特別適合於試驗室大規模篩檢使用。顆粒凝集實驗是另一種操作簡單方便，成本低廉的檢測方法，該方法結果可通過肉眼判定，靈敏度很高，特別適合發展中國家或大量篩選供血員時使用，缺點是必須使用新鮮樣品，特異性較差。80年代後期發展起來的斑點印跡檢測（Dot-blot assay）是一種快速ELISA（Rapid ELISA）方法，這種方法操作極為簡便，過程短暫，整個過程多數在5-10分鍾內甚至3分鍾內即可結束，但該法比ELISA和顆粒凝集試劑昂貴得多。金免疫測定是以膠體金為標記物，以硝酸纖維素膜為載體的固相免疫測定，分為滲濾和層析兩種形式。用於HIV抗體檢體金試紙條屬於金免疫層析，且大多數為間接法及雙抗原夾心法，兩種方法各有優缺點，但都簡單而快速，數分鍾即可得出結論，不需儀器設備，操作人員不需特殊訓練，試劑穩定，適用於單份測定等。