❶ 二抗顯影原理
二抗顯影原理是一種生物學技術，它可以用來檢測和定位某種特定的蛋白質或其他生物分子在細胞或組織中的分布。它的基本原理是，利用一種特定的抗體與某種特定的抗原結合，以檢測抗原的存在。抗體本身可以通過免疫細胞化學方法來檢測，而抗原可以通過免疫細胞化學方法或其他技術來檢測。抗體與抗原結合後，可以通過一種特定的染料或標記物來檢測，從而實現對抗原的檢測。二抗顯影技術可以用來檢測和定位某種特定的蛋白質或其他生物分子在細胞或組織中的分布，從而為進一步研究蛋白質或其他生物分子的功能提供重要的信息。
❷ 抗體檢測是什麼意思
1、抗體檢測是包含較多范圍，抗體是針對抗原所產生，如針對病毒的抗原，常見抗乙型肝炎抗體、乙型肝炎病毒表面抗原抗體、乙型肝炎病毒核心抗原抗體、乙型肝炎病毒e抗原抗體，以及巨細胞病毒抗體、EB病毒抗體等，均屬於抗體檢測。
2、對於細菌所產生的抗體，如抗鏈球菌溶血素O抗體、抗傷寒桿菌抗體、抗布氏桿菌抗體等，主要是為診斷與鑒別診斷，以及了解病情。而自身抗原產生的自身抗體，如抗核抗體、ENA抗體等，對於診斷自身免疫病較有意義。
3、此外，當注射疫苗以後需檢測抗體，是為了解注射疫苗後是否產生抗體，如注射乙肝疫苗後是否有保護作用。抗體檢測是綜合性，應根據不同情況，從而進行相應抗體的檢測。
❸ 抗體和抗原是什麼意思
對於你的補充問題
對乙型肝炎的診斷，主要靠化驗檢查。常規檢查有肝功能，包括血清膽紅素（T-BiI）谷丙轉氨酶（GPT）。乙肝表面抗（HBsAg）等。血清膽紅素及谷丙轉氨酶升高，均說明肝內有炎症。乙肝表面抗原陽性說明已感染了乙肝病毒。
如果乙肝表面抗原為陽性者，可進一步檢查乙肝系列。它們分別為：（1）乙肝表面抗（HBsAg），（2）乙肝表面抗體（抗-HBs）。（3）e抗原（HBeAg).(4)e抗體(抗-HBe).(5)核心抗體(抗-HBc)。簡單地講；第（1）項代表感染。第（2）項代表抵抗力。第（3）項代表病毒復制。第（4）項須結合第（1）項分析；第（1）項陽性者第（4）代表病毒復制。第（1）項為陰性者，第（4）項陽性只能說明感染過乙肝把病毒已經痊癒。第（5）項陽性的臨床意義與第（4）項大致相同。平時說的大三陽指第（1），（3），（5）項陽性，為急性期感染。平時說的小三陽指第（1），（4），（5）項陽性，多為慢性期感染。所謂的攜帶者，指第（1），（5）項陽性。乙肝患者痊癒後，多有第（2），（4），（5）項陽性或第（4），（5）項陽性或第（2），（4），（5）項單項陽性。
個別病人需做特殊檢查，可檢查HBV-DNA，PCR，以確定有無病毒復制。慢性患者，須查甲胎球蛋白（AFP），以排除肝硬化及肝腫瘤。除做化驗檢查外，肝病患者還應該做B型超聲檢查。
抗原(antigen, Ag)是一類能誘導免疫系統發生免疫應答，並能與免疫應答的產物(抗體或效應細胞)發生特異性結合的物質。抗原具有免疫原性和反應原性兩種性質。
免疫原性是指抗原刺激機體後，機體免疫系統能形成抗體或致敏T淋巴細胞的特異性免疫反應。
反應原性是指產生的抗體或致敏T淋巴細胞能與抗原進行特異性結合的免疫反應。
既具免疫原性又具反應原性的抗原稱免疫原。某種物質之所以能成為一個良好的免疫原，是因為它有特異的化學結構，這就是抗原決定簇。抗原決定簇可以與相應的淋巴細胞表面的受體蛋白結合引起免疫應答。一個抗原決定簇只能激活一種淋巴細胞(對於B細胞)只刺激產生一種類型抗體。一個抗原可以有一個或多個抗原決定簇。抗原功能性決定簇的總數稱抗原結合價。抗原決定簇少，抗體與抗原結合就少，往往就見不到反應。天然抗原或復雜的半抗原決定簇往往多達幾十個，因此可以與很多抗體分子交互結合。
有些分子本身沒有免疫原性，不能引起免疫反應，但是如果把它們和某些載體分子，如蛋白質分子結合起來就有了免疫原性，就能使動物對這一復合分子產生特異的抗體。這種本身無免疫原性，但有反應原性，一旦把它與載體結合就有了免疫原性的物質，就稱半抗原或不完全抗原。如寡糖，類脂和一些簡單的化學物質等。嗎啡就是一種半抗原，把它與蛋白分子結合起來，就可以使動物體產生相應抗體，此抗體可作為檢測是否吸毒的試劑。
抗原相對分子量一般都在10X103以上，而在4X103以下者一般無免疫原性。在一定相對分子量范圍內，分子量大者免疫原性強，這是因為：
1、相對分子量大，表面抗原決定簇就多，而淋巴細胞要求一定數量抗原決定簇刺激才能活化；
2、大分子化學結構穩定，在水中呈膠體，不易被機體破壞或排除，這樣在體內存留時間就長，有利於持續刺激淋巴細胞。核酸本身免疫原性很低，但只要有5個核苷酸與蛋白質分子載體連接，就能刺激機體產生抗體。
抗原可分外源性抗原和內源性抗原兩類，前者如細菌、病毒、花粉、各種毒素以及小型動植物；後者主要為機體從未接觸過的物質或構象發生改變的自身成分，如變性的IgG重鏈、晶狀體物質、精子、腦組織等。
抗體是人或動物受抗原物質（如細菌或其毒素、病毒等）刺激後，由漿細胞合成和分泌的一種特異性蛋白質。抗體是人體抵抗感染的一種重要武器。19世紀末，德國科學家Behring發明了用含白喉抗毒素的動物血清注射給白喉患兒，使其治癒。此後醫學家們用含有不同抗體的動物血清或人血清來治療或預防多種傳染病。由於Behring開創了抗體治療傳染病的方法，對防治傳染病作出了卓越貢獻，本世紀初榮獲諾貝爾醫學獎。但傳統的人工生產抗體的方法是將抗原物質（如細菌或其毒素等）注射給動物（如馬、羊等），使動物產生針對該抗原物質的抗體。人們抽取免疫動物的血液，分離出含抗體的血清。這種體內生產抗體的傳統方法有許多缺點。例如所獲得的抗體不純，不能連續生產，動物飼養與管理工作繁重等，故長期以來醫學家們一直在探索在試管內（即體外）生產抗體的方法， 1976年英國劍橋大學兩位科學家Milstein和Koh1er將小鼠骨髓瘤細胞與免疫小鼠的脾細胞雜交。小鼠骨髓瘤細胞能在體外無限增殖傳代並能分泌無抗體活性的球蛋白；免疫小鼠脾細胞能產生針對某種抗原的抗體，但不能在體外無限增殖。將兩者融合成一種雜交瘤細胞，後者繼承了兩個親代細胞的特點，既可在體外無限增殖，又可產生針對某種抗原的抗休。一個雜交瘤細胞在體外不斷增殖所形成的細胞集團，被稱之為克隆。在同一克隆中所有的細胞產生相同的抗體，此抗體稱之為單克隆抗體（簡稱McAb）。它是單一特異性的高純度的抗體，可在體外連續大量生產。McAb在臨床醫學及基礎醫學領域發揮了巨大作用，給某些難治疾病的診斷、防治帶來了新的希望。如針對某種腫瘤細胞的McAb與毒素、抗癌葯物或放射性物質結合成復合物（醫學上稱為生物導彈），將此復合物注射到病人體內，可定向殺傷McAb所針對的腫瘤細胞，而對其它正常細胞則無作用，這是任何其它抗癌治療方法辦不到的。因此，單克隆抗體技術被譽為現代生物科學的一項革命性突破，是當今四大生物工程技術之一。由於Milstein和kohler的傑出貢獻，1984年他倆共同獲取了諾貝爾醫學獎。
❹ 核酸抗體怎麼檢查 是怎麼解釋的
1、核酸檢測的物質是病毒的核酸（可以理解為老百姓常說的遺傳基因）。核酸檢測是查找患者的呼吸道標本、血液或糞便中是否存在外來入侵的病毒的核酸，來確定是否被新冠病毒感染。因此一旦檢測為核酸「陽性」，即可證明患者體內有病毒存在。所以說，核酸檢測陽性可以作為新型冠狀病毒感染確診的金標准。
2、抗體檢測的物質是人體受病毒感染刺激而產生的特異性抗體。病毒進入人體一段時間後,會刺激人體產生IgM（免疫球蛋白M）或IgG（免疫球蛋白G）,我們可以通過檢測血清中的抗體，間接證明人體已感染新冠病毒，這就是抗體檢測。
3、如果把人體被新冠病毒感染比喻為小偷入室盜竊，找到病毒核酸，相當於抓了小偷的現行。而找到了病毒的抗體，相當於找到了小偷留在作案現場的指紋或足跡等痕跡。
❺ western結果怎樣統計分析
1、 一般分析是用方差分析、T檢驗。
2、統計分析是指運用統計方法及與分析對象有關的知識，從定量與定性的結合上進行的研究活動。它是繼統計設計、統計調查、統計整理之後的一項十分重要的工作，是在前幾個階段工作的基礎上通過分析從而達到對研究對象更為深刻的認識。它又是在一定的選題下，集分析方案的設計、資料的搜集和整理而展開的研究活動。系統、完善的資料是統計分析的必要條件。
運用統計方法、定量與定性的結合是統計分析的重要特徵。隨著統計方法的普及，不僅統計工作者可以搞統計分析，各行各業的工作者都可以運用統計方法進行統計分析。只將統計工作者參與的分析活動稱為統計分析的說法嚴格說來是不正確的。提供高質量、准確而又及時的統計數據和高層次、有一定深度、廣度的統計分析報告是統計分析的產品。從一定意義上講，提供高水平的統計分析報告是統計數據經過深加工的最終產品。
❻ 醫院化驗的抗核抗體是檢查什麼疾病的
抗核抗體檢查是自身免疫性疾病篩選試驗。抗核抗體在多種自身免疫病中均呈不同程度的陽性率，如系統性紅斑狼瘡（SLE，95%～100%）、類風濕性關節炎（RA，10%～20%）、混合性結締組織病（MCTD，80%～100%）、乾燥綜合征（SjS,10%～40%）、全身性硬皮病（85%～90%）、狼瘡性肝炎（95%～100%）、原發性膽汁性肝硬化（95%～100%）等，但經皮質激素治療後，陽性率可降低。抗核抗體在類風濕患者中約有20%～50%IgG型ANA呈陽性，小兒類風濕ANA的陽性率約19%～35%，伴發虹膜睫狀體炎者陽性率高（50%～90%），故ANA陽性預示類風濕有發生慢性睫狀體炎的可能。已發現75%類風濕患者有多形核白細胞的特異性ANA或抗中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）可使白細胞核受到破壞。
一種自身免疫病可檢測出多種自身抗體，檢出一種抗核抗體又可涉及多種相關的自身免疫病，因此臨床醫師往往需要參考多項免疫指標，結合臨床表現和其他輔助檢查綜合分析作出診斷。
❼ 急切求解WB,IHC的意思！
(一)WB
Western免疫印跡（Western Blot）是將蛋白質轉移到膜上，然後利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白，可用相應抗體作為一抗進行檢測，對新基因的表達產物，可通過融合部分的抗體檢測。
一、原理
與Southern或Northern雜交方法類似，但Western Blot採用的是聚丙烯醯胺凝膠電泳，被檢測物是蛋白質，「探針」是抗體，「顯色」用標記的二抗。經過PAGE分離的蛋白質樣品，轉移到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）上，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質，且能保持電泳分離的多肽類型及其生物學活性不變。以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原，與對應的抗體起免疫反應，再與酶或同位素標記的第二抗體起反應，經過底物顯色或放射自顯影以檢測電泳分離的特異性目的基因表達的蛋白成分。該技術也廣泛應用於檢測蛋白水平的表達。
二、試劑准備
1、SDS-PAGE試劑:見電泳實驗。
2、勻漿緩沖液：1.0M Tris-HCl(pH 6.8)1.Oml；10%SDS 6.0ml；β-巰基乙醇 0.2ml；ddH2O 2.8ml。
3、轉膜緩沖液：甘氨酸 2.9g；Tris 5.8g；SDS 0.37g；甲醇200ml；加ddH2O定容至1000ml。
4、0.01M PBS(pH7.4)：NaCl 8.0g；KCl 0.2g；Na2HPO4 1.44g；KH2PO4 0.24g；加ddH2O至1000ml。
5、膜染色液：考馬斯亮蘭 0.2g；甲醇80ml；乙酸2ml；ddH2O118 ml。包被液（5%脫脂奶粉，現配）：脫脂奶粉1.0g 溶於20ml的0.01M PBS中。
6、顯色液：DAB 6.0mg；0.01M PBS 10.0ml；硫酸鎳胺 0.1ml；H202 1.0μl。
三、操作步驟
（一）蛋白質樣品獲得：細菌誘導表達後，可通過電泳上樣緩沖液直接裂解細胞，真核細胞加勻漿緩沖液，機械或超聲波室溫勻漿0.5-1min。然後4℃，13,000g離心15min。取上清液作為樣品。
（二）電泳：制備電泳凝膠，進行SDS-PAGE。
（三）轉移：（半乾式轉移）
1、電泳結束後將膠條割至合適大小，用轉膜緩沖液平衡，5min×3次。
2、膜處理：預先裁好與膠條同樣大小的濾紙和NC膜，浸入轉膜緩沖液中10min。
3、轉膜：轉膜裝置從下至上依次按陽極碳板、24層濾紙、NC膜、凝膠、24層濾紙、陰極碳板的順序放好，濾紙、凝膠、NC膜精確對齊，每一步去除氣泡，上壓500g重物，將碳板上多餘的液體吸干。接通電源,恆流1mA/cm2，轉移1.5hr。轉移結束後，斷開電源將膜取出,割取待測膜條做免疫印跡。將有蛋白標準的條帶染色，放入膜染色液中50s後，在50%甲醇中多次脫色，至背景清晰，然後用雙蒸水洗，風干夾於兩層濾紙中保存，留與顯色結果作對比。
（四）免疫反應：
1、用0.01M PBS洗膜，5min ×3次。
2、加入包被液，平穩搖動，室溫2hr。
3、棄包被液，用0.01M PBS洗膜，5min×3次。
4、加入一抗（按合適稀釋比例用0.01M PBS稀釋，液體必須覆蓋膜的全部），4℃ 放置12hr以上。陰性對照，以1%BSA取代一抗，其餘步驟與實驗組相同。
5、棄一抗和1%BSA，用0.01M PBS分別洗膜，5min×4次。
6、加入辣根過氧化物酶偶聯的二抗（按合適稀釋比例用0.01M PBS稀釋），平穩搖動，室溫2hr。
7、棄二抗，用0.01M PBS洗膜，5min×4次。
8、加入顯色液，避光顯色至出現條帶時放入雙蒸水中終止反應。
四、注意事項
1、一抗、二抗的稀釋度、作用時間和溫度對不同的蛋白要經過預實驗確定最佳條件。
2、顯色液必須新鮮配置使用，最後加入H2O2。
3、DAB有致癌的潛在可能，操作時要小心仔細。
（二）IHC
免疫組織化學 IHC
免疫組織化學又稱免疫細胞化學，是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應和組織化學的呈色反應，對相應抗原進行定性、定位、定量測定的一項新技術。它把免疫反應的特異性、組織化學的可見性巧妙地結合起來，藉助顯微鏡(包括熒光顯微鏡、電子顯微鏡)的顯像和放大作用，在細胞、亞細胞水平檢測各種抗原物質(如蛋白質、多肽、酶、激素、病原體以及受體等)。 免疫組化技術近年來得到迅速發展。50年代還僅限於免疫熒光技術，50年代以後逐漸發展建立起高度敏感，且更為實用的免疫酶技術。
免疫組織化學的全過程包括：1.抗原的提取與純化；2.免疫動物或細胞融合，制備特異性抗體以及抗體的純化；3.將顯色劑與抗體結合形成標記抗體；4.標本的制備；5.免疫細胞化學反應以及呈色反應；6.觀察結果。
免疫組化基礎知識
免疫組織化學的概念：
免疫組化是利用抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質)，對其進行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學。
免疫組化實驗所用的抗體有哪些？
免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。單克隆抗體是一個B淋巴細胞克隆分泌的抗體，應用細胞融合雜交瘤技術免疫動物制備。多克隆抗體是將純化後的抗原直接免疫動物後，從動物血中所獲得的免疫血清，是多個B淋巴細胞克隆所產生的抗體混合物。
免疫組化實驗所用的組織和細胞標本有哪些？
實驗所用主要為組織標本和細胞標本兩大類，前者包括石蠟切片（病理大片和組織晶元）和冰凍切片，後者包括組織印片、細胞爬片和細胞塗片。其中石蠟切片是製作組織標本最常用、最基本的方法，對於組織形態保存好，且能作連續切片，有利於各種染色對照觀察；還能長期存檔，供回顧性研究；石蠟切片製作過程對組織內抗原暴露有一定的影響，但可進行抗原修復，是免疫組化中首選的組織標本製作方法。
石蠟切片為什麼要做抗原修復？有哪些方法？
石蠟切片標本均用甲醛固定，使得細胞內抗原形成醛鍵、羧甲鍵而被封閉了部分抗原決定簇，同時蛋白之間發生交聯而使抗原決定簇隱蔽。所以要求在進行IHC染色時，需要先進行抗原修復或暴露，即將固定時分子之間所形成的交聯破壞，而恢復抗原的原有空間形態。
常用的抗原修復方法有微波修復法，高壓加熱法，酶消化法，水煮加熱法等，常用的修復液是pH6.0的0.01 mol/L的檸檬酸鹽緩沖液。
免疫組化常用的染色方法有哪些？
根據標記物的不同分為免疫熒光法，免疫酶標法，親和組織化學法，後者是以一種物質對某種組織成分具有高度親合力為基礎的檢測方法。這種方法敏感性更高，有利於微量抗原(抗體)在細胞或亞細胞水平的定位，其中生物素——抗生物素染色法最常用。
抗體交叉反應的原因：
指抗體除與其相應的抗原發生特異性反應外還與其它抗原發生反應。產生的原因有以下幾個方面：
1. 抗原特異性指用於免疫動物的抗原性物質中含有多種抗原分子，它引起動物產生針對多種抗原分子特異性的相應抗體。任何其它物質只要含有一種或多種與上述物質相同的抗原分子，必將與上述多特異性的抗血清發生交叉反應。
2. 共同決定簇即兩種抗原分子中都含有相同的抗原決定簇。
3. 決定簇相似，兩種不同的抗原決定簇，如果結構大致相同，由於空間構象關系，某一決定簇的相應抗體可以與大致相同的決定簇發生交叉反應。當然抗原一抗體之間構象相似時的結合力小於吻合時的結合力。
多抗和單抗特性比較：
1.均一性。一種單抗中，每個抗體的化學結構和氨基酸順序都相同，只有一種Ig亞類。即單抗是一種純度很高的均一抗體。而從不同動物，不同時期所得到的多抗，各有不同的化學組成。多抗是多種種類和亞類Ig的混合物。
2. 穩定性。單抗的穩定較差，對PH變化敏感，對熱不穩定，提純過程中易變性，而多抗的穩定性則較好。
3. 特異性。單抗是單一地針對抗原的某一決定簇，所以用它進行血清學反應時，特異性強，敏感性高，一般不發生交叉反應。而多抗能與抗原上的多種抗原決定簇結合，所以特異性較差，較易引起交叉反應。
4.重復性。單抗的重復性好，而多抗每批都不一樣。
5. 沉澱反應。多抗由於與抗原多價結合容易形成網路樣沉澱，而單抗只與抗原結合產生二聚體，不能直接形成抗原抗體沉澱物。
抗體的保存：
抗體儲存容器應由不吸附蛋白質的材料製成，常用的有聚丙烯，聚碳酸酯和硼硅酸玻璃。如儲存的抗體中蛋白濃度很低（10-100mg/L），就應另加隔離蛋白以減少容器對抗體蛋白的吸附，隔離蛋白常用0.1%-1.0%的牛血清白蛋白。絕大多數已稀釋的抗體應存在4℃-8℃條件下，以免凍融對抗體蛋白產生有害效應。抗體原液和已分離的免疫球蛋白組分應保存於-20℃條件下，並避免反復凍融。冷凍的抗體溶液應置於室溫中緩慢地解凍，應絕對避免用高溫快速解凍。被細菌污染的抗體常會出現假陽性結果，應將污染的抗體溶液及其他試劑棄之。為防止細菌污染，可於抗體溶液中加入0.01%疊氮鈉。抗體經真空冷凍乾燥後置-20℃以下可保存3-5年。保存稀釋後的單抗應加入0.1%疊氮鈉濃度。大多數稀釋抗體可進行冷凍保存，少數抗體可能會丟失抗原活性。大多數單抗，只要蛋白濃度適當，可在4℃下保存數月。
希望你能滿意 謝謝！！！o(∩_∩)o... ^_^