豬抗原抗體檢測是什麼意思

① idexx豬瘟病毒抗體檢測試劑盒用的什麼抗原

概述

豬瘟病毒（CSFV）、牛病毒性腹瀉性病毒(BVDV)以及邊界病（BDV）都屬於黃病毒屬的成員。由於CSFV的高致病力和高致死率，它已給養殖業造成了巨大的損失。豬感染高致病力毒株後在潛伏期就可以造成傳染，經歷急性豬瘟或亞急性豬瘟臨床症狀的豬在出現症狀前大量排毒，但耐過後的豬只體內有明顯的CSFV抗體，且不再排毒。感染溫和性毒株的豬呈慢性感染，在病死前會長期或間歇性地排毒。懷孕母豬可以通過胎盤感染胎兒導致流產、木乃伊化或產出弱豬、畸形胎等。先天性感染低毒力病毒的結果是產出持續性感染的仔豬，仔豬出現免疫耐受，不表現任何症狀向外排毒。豬也有可能感染BVDV或BDV。盡管這些感染通常呈溫和過程並且是自限性的，但有效的將它們同豬瘟病毒區分是很重要的。

原理

豬瘟病毒抗體ELISA檢測試劑盒是用來檢測豬血清或血漿中豬瘟病毒抗體的檢測試劑盒。該試劑盒是用豬瘟病毒抗原包被的微量反應板，利用阻斷ELISA原理來檢測豬血清或血漿中豬瘟病毒抗體。如果被檢樣品中存在豬瘟病毒抗體，它們就會阻斷辣根過氧化物酶標記（HRPO）的抗豬瘟病毒的單克隆抗體。單克隆抗體與豬瘟病毒抗原的結合可以通過辣根過氧化物酶與底物的顯色程度進行判定，即用酶標儀在單波長450nm或雙波長450nm與620nm測定該反應體系的吸光度。當被檢樣品中含有豬瘟病毒抗體（陽性結果）時，顯色就會變淺，當被檢樣品中不含有抗豬瘟病毒抗體（陰性結果）時，顯色就會變深。樣本的阻斷率可以通過450nm波長樣本吸光度與陰性對照吸光度的比值來確定

試劑

一個ELISA反應板可以檢測92份樣品（另加兩個對照，每個雙孔），或46個未知樣品，每個樣品加雙孔。雙孔檢測法有利於檢測結果的准確性。

1.用豬瘟病毒抗原包被的ELISA反應板

2.洗滌液（10×）

3.陰性對照

4.陽性對照

5.樣品稀釋液

6.辣根過氧化物酶標記(HRPO)的抗豬瘟病毒的單克隆抗體

7.TMB底物

8.終止液

自備器材

1．微量移液器，50μl和100μl。

2．一次性微量移液器使用的吸頭。

3．蒸餾水或去離子水。

4．洗板用的洗瓶或洗板機。

5．溫箱或微量反應板用的封條。

6．酶標儀。

注意事項

1．要認真閱讀操作說明，按操作說明進行操作。

2．試劑盒及試劑盒中的所有試劑要保存在2~7℃。

3．沒有用過的微量反應板必須密封於塑料袋中並保存在2~7℃。

4．不同批次的試劑或說明書不可混合使用。

5．使用處理各個試劑時要小心，嚴防細菌和真菌對試劑的污染。

6．禁止使用過期的試劑。

7．在處理樣本和試劑盒中的試劑時禁止吃食物、喝水和吸煙等。

8．各個樣本使用不同的吸頭，以防污染。

9．每次檢測都要加陽性對照和陰性對照。

10．稀釋各種試劑組分時只能使用超純水。

11．底物溶液對眼睛、皮膚以及呼吸系統都有刺激作用，在使用過程中要防止該溶液接觸眼睛和皮膚。

12．終止液中含有強酸HCl,容易引發燒傷，處理該溶液時一定要小心謹慎。

13．用吸量管吸取液體時禁止用嘴。

14．該試劑盒僅用於體外檢測。

試劑准備

包被的微量反應板，樣品稀釋液，陽性對照，陰性對照，酶標二抗，底物溶液和終止液使用前無需處理。

洗滌液(10×)濃縮的洗滌液在使用前必須用超純水進行10倍稀釋。被稀釋了的洗滌液可以在4℃的條件下保存3天，或冰凍條件下保存一年。如：250ml的洗滌液需用25ml的濃縮洗滌液和225ml的超純水充分混合配成而成。注意：如果濃縮液中含有結晶，在使用之前必須將它融化，應將該液溫水浴30分鍾以上。

樣品准備

新鮮的、冷藏（4°C少於8天）的、冰凍的血清或血漿都可以用於檢測。

操作步驟

1．在使用時，所有的試劑盒組分都必須恢復到室溫18~25℃。使用前應將各組分放置於室溫至少一小時。

2．分別將50μl樣品稀釋液加入每個檢測孔和對照孔中。

3．分別將50μl的陽性對照和陰性對照加入相應的對照孔中，注意不同對照的吸頭要更換，以防污染。

4．分別將50μl的被檢樣品加入剩下的檢測孔中，注意不同檢樣的吸頭要分開，以防污染。

5．輕彈微量反應板或用振盪器振盪，將反應板中的溶液混勻。

6．將微量反應板用封條封閉或於濕箱中（18~25℃）孵育2小時，也可以將微量反應板用封條封閉或於濕箱中孵育過夜。

7．吸出反應孔中的液體，並用稀釋好的洗滌液洗滌3次，注意每次洗滌時都要將洗滌液加滿反應孔，棄去反應孔中的洗滌液並拍干反應板。也可以用洗板機洗滌3次，每個反應孔應加300μl左右的洗滌液。注意洗板時要小心，以免樣本之間的交叉污染。

8．分別將100μl的抗-CSFV酶標二抗(即取即用)加入反應孔中，用封條封閉反應板並於室溫下或濕箱中孵育30分鍾。

9．洗板（見6）後，分別將100μl的底物溶液加入反應孔中，並於避光、室溫條件下放置10分鍾。加完第一孔後即可計時。

10．在每個反應孔中加入100μl的終止液終止反應。注意要按加酶標二抗的順序加終止液。

11．在450nm處測定樣本以及對照的吸光度值，也可用雙波長（450nm和620nm）測定樣本以及對照的吸光度值，空氣調零。

12．計算樣本和對照的平均吸光度值（見計算）。

計算方法

計算被檢樣本的平均值OD450（＝ODTEST）、陽性對照的平均值（＝ODPOS）、陰性對照的平均值（＝ODNEG）。

根據以下公式計算被檢樣本和陽性對照的阻斷率；（陽性對照阻斷率以同樣方法計算）

ODNEG－ODTEST

阻斷率＝————————×100%

ODNEG3

試驗有效性

陰性對照的平均OD450應大於0.50。陽性對照的阻斷率應大於50％。

結果判定

如果被檢樣本的阻斷率大於或等於40％，該樣本就可以被判為陽性（有CSFV抗體存在）。如果被檢樣本的阻斷率小於或等於30％，該樣本就可以被判為陰性（無抗CSFV抗體存在）。如果被檢樣本的阻斷率在30~40％之間，就應在數日後再對該動物進行重測。

② 什麼是抗原檢測和核酸檢測的區別在哪兒

抗原就像是病毒外面穿的「衣服」，核酸則是病毒裡面的基因。
抗原檢測就是從抗體出發去測「衣服的部分，讓病毒顯示出來。
抗原檢測更方便、快捷，但敏感性稍差。
核酸檢測更復雜，獲取結果時間長，但敏感性更高。

③ 豬病常用的血清學診斷方法有哪些

抗原和相應的抗體在動物體內或體外都能發生特異性結合反應，這種反應稱為抗原抗體反應，習慣上把體內的抗原抗體反應稱為免疫反應，體外的抗原抗體反應稱為血清學反應，因為抗體主要存在於血清中。

血清學反應可以用已知的抗體檢查未知的抗原，也可用已知抗原測定未知的抗體。人們根據抗體能與相應抗原發生反應並出現可見的抗原—抗體復合物的原理，設計了許多血清學診斷方法，不僅可以檢測動物體內乃至體外的病原微生物，或其抗原性成分，而且還可以測定動物機體對病原微生物的侵襲或對其抗原成分的免疫反應。在抗原—抗體復合物成不可見狀態時，可以通過瓊脂擴散、凝集實驗以及酶標記等指示系統，使其變為可見或可測狀態。

目前已知的血清學診斷方法很多，現僅介紹幾種在目前條件下規模化豬場通過學習都能做到的診斷方法：

（1）凝集試驗豬病診斷過程中常用的操作方法有以下幾種：

①全血平板凝集試驗實踐中主要用於細菌性疾病的抗體檢測和抗原（經分離培養後）的鑒定。現舉例用已知豬丹毒抗原（丹毒桿菌的純培養液）測定被檢豬血清中的抗體。其操作步驟如下：

a.材料豬丹毒凝集抗原，玻片，9號針頭，酒精棉球，酒精燈，鉑耳（取血環）等。b.操作用鉑耳取已知抗原1滴，置於玻片上。用酒精棉球擦拭針頭，鉑耳在酒精燈上灼燒消毒。用針頭刺破被檢豬的耳靜脈，以鉑耳取血與玻片上的抗原等量混合，在2～3分鍾內觀察結果。c.結果判定出現顆粒狀的凝集，為陽性反應。否則為陰性。

②試管凝集試驗是一種定量法，用於測定被檢血清或其他體液中有否某種抗體及其效價，可做臨床的輔助診斷，或用於流行病學監測。在豬場中，本法常用於豬布氏桿菌病的診斷。

A.材料布氏桿菌病試管凝集抗原（1∶20倍稀釋），布氏桿菌病陽性血清、陰性血清（1∶25倍稀釋），稀釋液（0.5 %石炭酸生理鹽水），滅菌小試管，1毫升吸管，試管架，待檢血清等。B.操作取試管7支置於試管架上，設陽性和陰性血清及抗原對照各1支，測定管4支，以後每增加1個樣品，只需增加4支測定管。

按表10示意稀釋血清，加抗原，完成後每支試管內應含1毫升液體。

④ 一頭豬有豬瘟抗原還有豬瘟抗體是為什麼

本人順便路過這里,發現這個問題。就我所知，回答如下：豬瘟疫苗本身就是抗原，注射後會在體內增殖，伴隨著增殖而刺激產生免疫反應，抗體會在14天到21天時出現明顯檢測信號，隨之抗原消失，消失時間約16天以後，如果用最新的分子診斷方法檢測可發現可持續至40天左右。當然，你用的金標法，最多可在16天內檢測到，如果在16天後檢測到，很可能有強毒感染，而不是疫苗毒持續的結果。

另外，豬瘟疫苗免疫失敗的現象比較常見，如果在免疫後很長時間內還能檢測到豬瘟，很可能豬群中原本就有豬瘟毒感染，而沒有發病，這樣會導致檢測結果抗原抗體同時陽性。

抗體陽性並不代表沒有野毒感染。抗原陽性也並不代表抗體陰性。

⑤ 母豬豬瘟抗體為陽性說明什麼

如果你豬場做豬瘟免疫的話，說明是好的，豬瘟的抗體還有，但沒有做免疫的話，有可能是感染豬瘟病毒了。但你還是要多方面的考慮，也有可能是你做的豬瘟免疫，但也同時感染了豬瘟病毒，那麼也能檢測陽性，如果你不放心的話，最好做一下PCR，就能確定是不是得豬瘟病了。

⑥ 豬病進行抗體檢測，想問一下有誰知道那個阻斷率是什麼還有盡可能的詳細說明一下有關抗體檢測結果的分析

阻斷率是在競爭ELISA方法時用的，比如豬瘟抗體就是用阻斷率來表示。抗體結果分析，無非就看陰陽性，整個抗體水平整齊度，用來監測疫苗的效果，也可以提示某些疾病的感染

⑦ 抗原 檢測與抗體檢測的區別

目的不同：抗原檢測是檢查體內是否還有病原體，抗體檢測是檢查機體對病原體是否有抗性。
時間點不同：抗原檢測一般在潛伏期、急性期或病程初期，抗體檢測要晚一些，不同時間段檢測到不同的分型抗體可以判斷病程進展程度。
病程初期一般呈抗原陽性，抗體陰性；病程恢復期抗原陰性，抗體陽性。（不同的傳染病，抗原轉陰及抗體陽轉有不同表現）。
沒有哪個更好之說，也不能只看單一的檢測結果，都很重要，它們不可能有相同的結果（定量），在疾病診斷上缺一不可。

⑧ 抗體和抗原是什麼意思

對於你的補充問題
對乙型肝炎的診斷，主要靠化驗檢查。常規檢查有肝功能，包括血清膽紅素（T-BiI）谷丙轉氨酶（GPT）。乙肝表面抗（HBsAg）等。血清膽紅素及谷丙轉氨酶升高，均說明肝內有炎症。乙肝表面抗原陽性說明已感染了乙肝病毒。

如果乙肝表面抗原為陽性者，可進一步檢查乙肝系列。它們分別為：（1）乙肝表面抗（HBsAg），（2）乙肝表面抗體（抗-HBs）。（3）e抗原（HBeAg).(4)e抗體(抗-HBe).(5)核心抗體(抗-HBc)。簡單地講；第（1）項代表感染。第（2）項代表抵抗力。第（3）項代表病毒復制。第（4）項須結合第（1）項分析；第（1）項陽性者第（4）代表病毒復制。第（1）項為陰性者，第（4）項陽性只能說明感染過乙肝把病毒已經痊癒。第（5）項陽性的臨床意義與第（4）項大致相同。平時說的大三陽指第（1），（3），（5）項陽性，為急性期感染。平時說的小三陽指第（1），（4），（5）項陽性，多為慢性期感染。所謂的攜帶者，指第（1），（5）項陽性。乙肝患者痊癒後，多有第（2），（4），（5）項陽性或第（4），（5）項陽性或第（2），（4），（5）項單項陽性。

個別病人需做特殊檢查，可檢查HBV-DNA，PCR，以確定有無病毒復制。慢性患者，須查甲胎球蛋白（AFP），以排除肝硬化及肝腫瘤。除做化驗檢查外，肝病患者還應該做B型超聲檢查。

抗原(antigen, Ag)是一類能誘導免疫系統發生免疫應答，並能與免疫應答的產物(抗體或效應細胞)發生特異性結合的物質。抗原具有免疫原性和反應原性兩種性質。

免疫原性是指抗原刺激機體後，機體免疫系統能形成抗體或致敏T淋巴細胞的特異性免疫反應。
反應原性是指產生的抗體或致敏T淋巴細胞能與抗原進行特異性結合的免疫反應。

既具免疫原性又具反應原性的抗原稱免疫原。某種物質之所以能成為一個良好的免疫原，是因為它有特異的化學結構，這就是抗原決定簇。抗原決定簇可以與相應的淋巴細胞表面的受體蛋白結合引起免疫應答。一個抗原決定簇只能激活一種淋巴細胞(對於B細胞)只刺激產生一種類型抗體。一個抗原可以有一個或多個抗原決定簇。抗原功能性決定簇的總數稱抗原結合價。抗原決定簇少，抗體與抗原結合就少，往往就見不到反應。天然抗原或復雜的半抗原決定簇往往多達幾十個，因此可以與很多抗體分子交互結合。

有些分子本身沒有免疫原性，不能引起免疫反應，但是如果把它們和某些載體分子，如蛋白質分子結合起來就有了免疫原性，就能使動物對這一復合分子產生特異的抗體。這種本身無免疫原性，但有反應原性，一旦把它與載體結合就有了免疫原性的物質，就稱半抗原或不完全抗原。如寡糖，類脂和一些簡單的化學物質等。嗎啡就是一種半抗原，把它與蛋白分子結合起來，就可以使動物體產生相應抗體，此抗體可作為檢測是否吸毒的試劑。

抗原相對分子量一般都在10X103以上，而在4X103以下者一般無免疫原性。在一定相對分子量范圍內，分子量大者免疫原性強，這是因為：
1、相對分子量大，表面抗原決定簇就多，而淋巴細胞要求一定數量抗原決定簇刺激才能活化；
2、大分子化學結構穩定，在水中呈膠體，不易被機體破壞或排除，這樣在體內存留時間就長，有利於持續刺激淋巴細胞。核酸本身免疫原性很低，但只要有5個核苷酸與蛋白質分子載體連接，就能刺激機體產生抗體。

抗原可分外源性抗原和內源性抗原兩類，前者如細菌、病毒、花粉、各種毒素以及小型動植物；後者主要為機體從未接觸過的物質或構象發生改變的自身成分，如變性的IgG重鏈、晶狀體物質、精子、腦組織等。

抗體是人或動物受抗原物質（如細菌或其毒素、病毒等）刺激後，由漿細胞合成和分泌的一種特異性蛋白質。抗體是人體抵抗感染的一種重要武器。19世紀末，德國科學家Behring發明了用含白喉抗毒素的動物血清注射給白喉患兒，使其治癒。此後醫學家們用含有不同抗體的動物血清或人血清來治療或預防多種傳染病。由於Behring開創了抗體治療傳染病的方法，對防治傳染病作出了卓越貢獻，本世紀初榮獲諾貝爾醫學獎。但傳統的人工生產抗體的方法是將抗原物質（如細菌或其毒素等）注射給動物（如馬、羊等），使動物產生針對該抗原物質的抗體。人們抽取免疫動物的血液，分離出含抗體的血清。這種體內生產抗體的傳統方法有許多缺點。例如所獲得的抗體不純，不能連續生產，動物飼養與管理工作繁重等，故長期以來醫學家們一直在探索在試管內（即體外）生產抗體的方法， 1976年英國劍橋大學兩位科學家Milstein和Koh1er將小鼠骨髓瘤細胞與免疫小鼠的脾細胞雜交。小鼠骨髓瘤細胞能在體外無限增殖傳代並能分泌無抗體活性的球蛋白；免疫小鼠脾細胞能產生針對某種抗原的抗體，但不能在體外無限增殖。將兩者融合成一種雜交瘤細胞，後者繼承了兩個親代細胞的特點，既可在體外無限增殖，又可產生針對某種抗原的抗休。一個雜交瘤細胞在體外不斷增殖所形成的細胞集團，被稱之為克隆。在同一克隆中所有的細胞產生相同的抗體，此抗體稱之為單克隆抗體（簡稱McAb）。它是單一特異性的高純度的抗體，可在體外連續大量生產。McAb在臨床醫學及基礎醫學領域發揮了巨大作用，給某些難治疾病的診斷、防治帶來了新的希望。如針對某種腫瘤細胞的McAb與毒素、抗癌葯物或放射性物質結合成復合物（醫學上稱為生物導彈），將此復合物注射到病人體內，可定向殺傷McAb所針對的腫瘤細胞，而對其它正常細胞則無作用，這是任何其它抗癌治療方法辦不到的。因此，單克隆抗體技術被譽為現代生物科學的一項革命性突破，是當今四大生物工程技術之一。由於Milstein和kohler的傑出貢獻，1984年他倆共同獲取了諾貝爾醫學獎。