『壹』 D-D二聚體是什麼太高或太低會的什麼病
在全血或血漿中,採用針對D-D的抗體可以很容易地檢測D-D含量。近10年來,已建立了多種有價值的D-D的檢測方法。早在80年代末90年代初期,人們發現D-D對臨床上疑診為靜脈血栓形成的患者高度敏感,但不特異。在這些患者中,當血漿D-D濃度低於:某一臨界值時,其陰性預測值大於90%,由此可以作為排除VTE的篩選試驗。 近年來,隨著方法學的不斷進步,建立多種適用於急診的簡單快速的敏感方法,D-D檢測的臨床應用越來越廣泛。大量研究已經證實了D-D在排除診斷下肢深靜脈血栓形成和肺栓塞中的應用價值,已將其作為首選篩選指標之一。最近,D-D檢測的應用巳深入到彌散性血管內凝血、心血管疾病、激素替代治療、惡性腫瘤以及抗凝治療領域。 正常范圍:定性 陰性;定量 小於75μg/L。 檢查介紹:血漿D二聚體測定是了解繼發性纖維蛋白溶解功能的一個試驗。本試驗的影響因素很多,結果判斷時須加以考證。 臨床意義:D二聚體主要反映纖維蛋白溶解功能。增高或陽性見於繼發性纖維蛋白溶解功能亢進,如高凝狀態、彌散性血管內凝血、腎臟疾病、器官移植排斥反應、溶栓治療等。
『貳』 蛋白質放置一段時間後,形成二聚體,用什麼方法檢測
蛋白質放置一段時間後,形成二聚體,用什麼方法檢測
融合蛋白(fusion protein)有兩種不同的含義,一種是通過DNA重組技術得到的兩個基因重組後的表達產物。另一種含義就是介導兩個細胞質膜融合的一組蛋白,如在仙台病毒脂雙層外側小葉中含有的兩種糖蛋白之一,介導病毒被膜與宿主細胞質膜的融合作用。另一種糖蛋白是血細胞凝集素神經醯胺酶。 兩個不同的蛋白質連成一個大分子。可以通過化學方法連接,也可通過基因的融合來實現。
『叄』 D-二聚體的測定方法
乳膠凝集法
原理: 被檢血漿中D-二聚體與包被在乳膠顆粒上的單抗相作用,產生絮狀沉澱反應。
優點: 快速
缺點: 定性實驗; 半定量測定須多次倍比稀釋測定費試劑,且結果重復性差。
酶聯免疫吸附法(ELISA)
原理: 採用2 個針對D-二聚體的單抗建立的抗原為中心,兩種抗體夾心法,並加入辣根過氧化酶的底物以作顯色反應。
缺點:
1) 抗體與纖維蛋白(原)的D片斷有部分反應。一般情況下D片斷吸有一個抗體結合部位,因此不再與帶顯色物的抗體結合,但有時掛鉤現象干涉實驗結果。
2) 操作步驟復雜、費時,抗原抗體反應受溫度時間影響。
3)每次實驗需帶標准曲線,因此需留一批標本同時測定,不適用於臨床病人及時診斷及治療的需要。
NycoCard D-二聚體測定
原理:免疫過濾膠體金顯色反應法採用同種抗體夾心,即以包被的抗體捕獲血漿中抗原(D-二聚體),加入偶聯有膠體金的同種抗體顯色。因此也是以抗原為中心,抗體為三明治兩側,但為同種抗體。因抗體特異性高,可與含D-二聚體的 多種片斷結合使試驗靈敏度增高。雖偶可與D片斷結合,但不發生掛鉤現象。
優點: 快速(2min),定量檢測,靈敏度高,無掛鉤,高溫不溶
缺點: 特異性不強,受脂質顆粒干擾,肉眼比色,不可信影響,但閱讀儀結果與ELISA結果可媲美。
D-二聚體在深靜脈血栓中的診斷價值,其實D-二聚體不僅在深靜脈血栓形成中具有很大價值,在其他疾病中也有著非常重要的意義,當然,對這意義的理解是和對D-二聚體的了解分不開的。
D-二聚體的形成和檢測方法
在凝血過程中,凝血酶使纖維蛋白原水解,釋放出纖維蛋白FPA和FPB,然後形成纖維蛋自單體(SFM),SFMY鏈之間形成ε(—γ谷氨醯胺)—賴氨酸交聯,然後形成纖維蛋白。這種γ鏈之間的共價交聯是形成DD的結構基礎。交聯纖維蛋白在溶解過程中,釋放出X』、Y』、D』、E』等碎片,並形成DD、DD/E、YD/YD、YY/DD等復合物。這些碎片進一步降解為最小的片段DD和DD/E復合物,DD分子量約62000D,在體內半衰期>3h,主要經腎臟排泄(1,2)。因此可以作為鉸鏈的纖維蛋白溶解的一個標志,而單鏈的D可以來源於纖維蛋白原和沒有鉸鏈的纖維蛋白。目前有許多單克隆抗體能夠區分D—二聚體和單體的D,可以在纖維蛋白原存在的情況下,監測纖維蛋白降解產物。這些抗D—二聚體的抗體不僅可以檢測游離的D—二聚體,而且可以檢測大的纖維蛋白復合物中聚合的D域,包括在凝血過程早期形成的鉸鏈的纖維蛋白復合體。對D—二聚體抗原的測定因此可以早期發現血管內凝血。很多的試驗說明低水平的D—二聚體可以排除靜脈血栓形成或者肺動脈栓塞。升高的D—二聚體可能是靜脈血栓性疾病,也有可能是其他一些原因,造成血管內外的纖維蛋白的形成。
目前,應用較多的檢測主要有:酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、乳膠顆粒凝集試驗(LATEX)、免疫過濾膠體金染色法、雙抗體RBC凝集法和放免法。臨床最常用是:ELISA、LATEX和免疫過濾膠體金染色法,其中LATEX法測定速度快,但敏感度不如ELISA法;ELISA法敏感度高,但檢測時耗時較長(3,4)。由於不同的檢測方法其靈敏度不同,其正常參考值隨檢測方法的不同而不同,且隨年齡的增長而有所增高⑵。
『肆』 怎麼樣檢測蛋白質二聚體
如果蛋白質是有二聚體的結構,那麼表現出來的分子量應該是蛋白質理論分子量的兩倍。SDS-PAGE因為有SDS和在上樣緩沖液中加入2-ME的作用,會完全破壞二聚體的結構。雖然不能檢測二聚體,但是可以檢測出單體的分子量。
所以二聚體的檢測需要保護蛋白質的結構不被破壞,可以通過非變形電泳也就是Native-PAGE,或者分子排阻色譜也就是分子篩(SEC)來進行檢測。其他也可以用HPLC,質譜等手段。
『伍』 血漿D-二聚體測試�1�3
1 D-二聚體的形成
當機體發生凝血時,凝血酶作用於纖維蛋白原,使其轉變為交聯纖維蛋白,同時,纖溶系統被激活,降解交聯纖維蛋白形成各種FDP碎片。由於r鏈的交聯,便產生了包含r鏈相連的2個D片段,即D-二聚體。
2 D-二聚體的檢測方法
D-二聚體是交聯纖維蛋白的降解產物,具有較強的抗原性。D-二聚體抗原分析方法很多:有酶聯免疫吸附法(ELISA)、免疫滲濾法和膠乳凝集法。以上三種方法均有不同的特點,免疫ELISA測定法精確、定量,有很高的敏感性,能較好的起到血栓性疾病的篩查作用,但由於操作要求嚴格且費時,不能滿足急診要求。膠乳凝集法快速簡單,但只是半定量,敏感性低,不能完全起到篩查作用,而免疫滲濾法具有前二者的優點,有較高的應用前景。
3 D-二聚體測定的臨床意義
D-二聚體測定是診斷活動性纖溶較好的指標,對血栓形成性疾病如彌漫性血管內凝血(DIC)、深靜脈血栓形成、腦血管疾病、肺栓塞、肝臟疾病、惡性腫瘤、外科手術後、急性心梗等疾病均有重要的診斷價值,同時D-二聚體檢測還可用於溶栓葯物的治療監測指標。
3.1 彌漫性血管內凝血(DIC) D-二聚體測定是診斷DIC的特異性試驗之一,通過對DIC患者進行血小板計數、纖維蛋白原定量、FDP和D-二聚體測定,其中僅D-二聚體能反映凝血酶原和纖溶酶的活性;若D-二聚體的含量>0.5mg/L,對DIC高危患者具有極高的預報價值。
3.2 深靜脈血栓形成(DIV)的篩查 深靜脈血栓形成單憑臨床症狀不能完全確診,必須依賴靜脈造影術,但靜脈造影屬有創傷性檢查。因此,有效的篩查試驗顯得尤為重要。臨床實踐證明D-二聚體檢測是DIV篩查的有效手段。靜脈造影確診為DIV的病人D-二聚體水平均升高。所以臨床上懷疑為DIV時如果血漿D-二聚體測定結果正常,可完全排除DIV的診斷,從而避免了做靜脈造影檢查給病人帶來的痛苦和危險。
3.3 腦血管疾病 我們對80例腦血管患者的血漿D-二聚體進行檢測並作統計處理,其結果顯著高於正常對照組(P<0.01),其中缺血性中風急性期又顯著高於恢復期(P<0.01),而中風恢復時則不升高,與健康老年人對照組相同(P>0.05)。血漿D-二聚體濃度的變化與年齡有關,≥75歲的高齡組患者與正常人有較大差異,而低年齡組中差別不顯著。
3.4 肝臟疾病及惡性腫瘤 在肝臟疾病中,D-二聚體含量明顯增高,且與肝病的嚴重程度呈正相關。本院測定58例肝病患者,其中肝硬化和肝臟腫瘤患者明顯高於急、慢性肝炎病人。在肝臟疾病患者中,D-二聚體增高提示患者體內纖溶增高,可能伴有一種隱匿性DIC過程,所以血漿D-二聚體測定對肝臟疾病的診斷、預後判定是較有價值的試驗指標。
3.5 外科手術患者 我們對多例術後患者血漿D-二聚體水平的變化進行檢測,結果表明術後患者血漿D-二聚體水平均高於正常人,且增高水平明顯。其中胸外科大手術高於其他手術,表明術後患者體內有微血栓形成,並有纖溶活性增強。因此,動態觀察術後患者D-二聚體水平對患者預後的判定有重要意義。
3.6 溶栓治療的監測 在溶栓葯物的作用下,血栓被迅速溶解,血漿中D-二聚體明顯增高。因此,在溶栓過程中用葯前、中、後動態檢測D-二聚體濃度變化對監測溶栓葯物的效果具有較大的臨床價值。
此外,在產科疾病、惡性腫瘤等其他疾病,患者D-二聚體也升高。D-二聚體作為凝血與纖溶平衡失調的指標,將日益受到重視。
『陸』 D-D二聚體
D-二聚體是纖維蛋白單體經活化因子XIII交聯後,再經纖溶酶水解所產生的一種特異性降解產物,是一個特異性的纖溶過程標記物。D-二聚體來源於纖溶酶溶解的交聯纖維蛋白凝塊。
D-D二聚體是機體凝血過程可能會產生的一種二聚體復合物。正常機體中一般不產生或產生量極少。
為維護正常生理狀態,在外傷或血管受損的情況下,血栓的形成可防止血液從損傷的血管中流失。病理狀態下,機體發生凝血時,凝血酶作用於纖維蛋白,轉變為交聯纖維蛋白,同時纖溶系統被激活,降解纖維蛋白形成各種碎片。r鏈能把二個含D片斷的碎片連接起來,形成D-二聚體。
D-二聚體水平的上升,代表血塊在血管循環系統中形成,是急性血栓形成的一個敏感的標記物,但不具特異性。D-二聚體的升高反映了體內存在著凝血及纖溶活性增強的重要分子標志物。
增高:見於繼發性纖維蛋白溶解功能亢進,如高凝狀態、彌散性血管內凝血、腎臟疾病、器官移植排斥反應、溶栓治療等。
心肌梗死、腦梗死、肺栓塞、靜脈血栓形成、手術、腫瘤、彌漫性血管內凝血、感染及組織壞死等也可導致D-二聚體升高。
正常值參考范圍 <0.2mg/L。
D-二聚體_網路
『柒』 血漿D-二聚體測試
1 D-二聚體的形成 當機體發生凝血時,凝血酶作用於纖維蛋白原,使其轉變為交聯纖維蛋白,同時,纖溶系統被激活,降解交聯纖維蛋白形成各種FDP碎片。由於r鏈的交聯,便產生了包含r鏈相連的2個D片段,即D-二聚體。 2 D-二聚體的檢測方法 D-二聚體是交聯纖維蛋白的降解產物,具有較強的抗原性。D-二聚體抗原分析方法很多:有酶聯免疫吸附法(ELISA)、免疫滲濾法和膠乳凝集法。以上三種方法均有不同的特點,免疫ELISA測定法精確、定量,有很高的敏感性,能較好的起到血栓性疾病的篩查作用,但由於操作要求嚴格且費時,不能滿足急診要求。膠乳凝集法快速簡單,但只是半定量,敏感性低,不能完全起到篩查作用,而免疫滲濾法具有前二者的優點,有較高的應用前景。 3 D-二聚體測定的臨床意義 D-二聚體測定是診斷活動性纖溶較好的指標,對血栓形成性疾病如彌漫性血管內凝血(DIC)、深靜脈血栓形成、腦血管疾病、肺栓塞、肝臟疾病、惡性腫瘤、外科手術後、急性心梗等疾病均有重要的診斷價值,同時D-二聚體檢測還可用於溶栓葯物的治療監測指標。 3.1 彌漫性血管內凝血(DIC) D-二聚體測定是診斷DIC的特異性試驗之一,通過對DIC患者進行血小板計數、纖維蛋白原定量、FDP和D-二聚體測定,其中僅D-二聚體能反映凝血酶原和纖溶酶的活性;若D-二聚體的含量>0.5mg/L,對DIC高危患者具有極高的預報價值。 3.2 深靜脈血栓形成(DIV)的篩查 深靜脈血栓形成單憑臨床症狀不能完全確診,必須依賴靜脈造影術,但靜脈造影屬有創傷性檢查。因此,有效的篩查試驗顯得尤為重要。臨床實踐證明D-二聚體檢測是DIV篩查的有效手段。靜脈造影確診為DIV的病人D-二聚體水平均升高。所以臨床上懷疑為DIV時如果血漿D-二聚體測定結果正常,可完全排除DIV的診斷,從而避免了做靜脈造影檢查給病人帶來的痛苦和危險。 3.3 腦血管疾病 我們對80例腦血管患者的血漿D-二聚體進行檢測並作統計處理,其結果顯著高於正常對照組(P
『捌』 D2聚體的D-二聚體測定較FDP測定的優點
D-二聚體可作為溶栓效果的定量監測指標,而FDP(纖溶蛋白/原降解產物)可來自纖維蛋白原,且在原發性纖溶中也升高。 因此後者不能作為溶栓效果的定量指標。但是,金乳膠顯色的D-二聚體免疫過濾法由於對各種復合有D-二聚體的片斷,如來自纖溶蛋白的 X 碎片復合D-二聚體均敏感,因此使試驗的特異性降低。該測定法在定量檢測中的實際臨床意義尚有待更多臨床實踐資料的證明。
D-二聚體或FDP測定都可作為溶活性增強的某些疾病的輔助診斷,例如DVT、DIC腎功能、衰竭及溶栓療效判斷。理論上, DIC說明纖溶形成的小碎片對FDP檢測法不敏感,而D-二聚體試驗較之敏感。因此某一具體測定方法在疾病後中的敏感性尚有待臨床資料的結論。
D-二聚體可採用血凝標本(血漿), 而FDP是能採用血清標本。後者受血清制備是否完全的影響。
FDP乳膠顆粒法3分鍾完成試驗, D-二聚體膠體金免疫過濾法2分鍾完成試驗。前者為半定量測定, 後者若採用讀數儀可與ELISA法比美。
『玖』 D-二聚體(D-Dimer)試劑的D-二聚體測定的特點
1) 方法學原理:單克隆抗體免疫滲濾金標法,叢玉隆教授《今日臨床檢驗學》書推薦了該方法(P155) 。
2) 特異性:採用針對D-Dimer結構的抗原決定簇單克隆抗體。只對纖維蛋白降解產物D-二聚體有專 一性,血漿其他成份如纖維蛋白元,纖維蛋白單體等不會發生交叉反應。
3) 每個試劑盒提供質控品。
4) 抗干擾性強,高值膽紅素及血紅蛋白的存在不影響測定;但是血漿標本中含有血細胞或血小板可干擾結果 ;因此按規定離心去除。D-二聚體臨床應用:正常人D-二聚體<0.3mg/L。D-二聚體增高,提示體內存在各種血栓性疾病,同時也反應了體內纖溶活性的增強。