抗體檢測為什麼要有質量控制區

㈠ HIV核酸檢測的質量保證和質量控制

質量控制要考慮從樣品接收到發出報告整個過程每個環節的管理過程，包括：（1）人員；（2）實驗室分區和環境；（3）儀器；（4）檢測過程（試劑、操作過程，外部質控品使用）。
所有相關檢驗人員需經操作培訓，能獨立熟練地操作，並經考核合格，持證上崗。
1 實驗室分區和環境
HIV-1病毒載量檢測實驗室原則上應分為三個獨立工作區：試劑准備區、樣品處理區、擴增產物分析區，並設在不同房間。嚴格要求三區的空氣流向：從試劑准備區到樣品處理區，然後到擴增產物分析區，不能逆向流動。
2 儀器設備質量控制
加樣器、溫濕度計須經計量部門校準，每年一次；HIV-1病毒載量檢測儀、實時熒光PCR儀、離心機可以委託公司校準，每年一次。冰箱、水浴箱用校準合格的溫度計測量溫度，並做好記錄。
3 檢測過程質量控制
保證所有試劑盒有效並經國家食品葯品監督管理局注冊，使用無DNA和RNA酶的水；嚴格執行儀器和試劑的標准操作程序（SOP），不得擅自修改。每次實驗需同時使用試劑盒內的外部質控品以及一個HIV-1 RNA為5000～15000拷貝/毫升的外部外部質控品；每次實驗按照試劑盒說明書的要求使用試劑盒提供的外部質控品，並滿足外部質控品的要求。
4 外部質量控制
國家艾滋病參比實驗室每年組織兩次病毒載量的能力驗證項目，每次5個樣品。

㈡ 愛滋病和HIV的區別

HIV是愛滋病的英文縮寫.
英文名稱：human immunodeficiency virus, HIV

(以下是網上找的資料)
HIV概述
從1981年開始，美國疾病控制中心（CDC）不斷收到有關卡波濟肉瘤（kaposi』 sarcoma）的病例報告，由於新發現的病例與以往的有所不同，死亡率高，而且發病率呈快速上升趨勢，引起了CDC的高度重視，1982年9月，CDC正式提出了獲得性免疫缺陷綜合症(acquired immunodeficiency syndrome, AIDS或艾滋病)的概念，隨後的調查研究證明這是一種新的傳染病。1983年，法國巴斯德研究所的Montagnier等首先從一例淋巴瘤患者的淋巴結中分離出一種病毒，被稱為淋巴結病相關病毒（lymphadenopathy associated virus, LAV）,1984年初，美國國立衛生研究院國立癌症研究所的Gallo 等從艾滋病患者的外周血單核細胞（PBMC）中分離到稱為人嗜T淋巴細胞病毒Ⅲ型（human T-cell lymphotropic virus type Ⅲ, HTLV-Ⅲ）的病毒。同年，美國加州大學的Levy等也從艾滋病患者的外周血淋巴細胞中分離出一種病毒，稱艾滋病相關病毒（AIDS related virus, ARV）。1986年，國際病毒分類委員會（International Committee on Taxonomy of Viruses, ICTV）將LAV/HTLV-Ⅲ/ARV統一命名為人免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus, HIV），又稱艾滋病毒。
由HIV感染而引起的疾病稱為艾滋病，全稱為獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS），該病患者的免疫功能部份或完全喪失，CD4+細胞數目減少，繼而發生機會性感染、腫瘤等，臨床表現多種多樣。該病傳播速度快、病死率高，且目前無法治癒，引起了各國政府和社會的關注。
HIV在病毒分類學上屬逆轉錄病毒科（Retroviridae）慢病毒屬（lentivirus），目前已發現兩種HIV，分別為HIV-1和HIV-2。兩者具有相似的病毒結構和傳播途徑。HIV-2主要分布於非洲西部，在歐洲和美洲的一些感染者中也被檢測到。其毒力和傳播力都低於HIV-1，引起的艾滋病病程較慢且較緩和。HIV-1廣泛分布於世界各地，是引起全世界AIDS流行的病原，目前HIV的研究也是以HIV-1為主進行的。
HIV的流行呈世界性分布，非洲為HIV的發源地和重災區，歐洲和美洲也為主要流行區，近年HIV在亞洲的流行呈高速增長的趨勢。我國自1985年首次發現HIV感染者，至今已有60～80萬人發生了感染，專家估計，如果不迅速採取有效的預防措施，按目前的年平均30%的增長速度，到2010年，我國的HIV感染者將超過1000萬。在非洲的有些國家，HIV的感染率達總人口30%以上。因此，預防和治療艾滋病，已不僅僅是挽救個人生命的問題，而是關繫到民族存亡的大事。

HIV的一般概念
艾滋病病毒（HIV）顆粒呈球形，直徑90 nm～130nm。病毒的核心呈中空錐形，由兩條相同的單鏈RNA鏈、逆轉錄酶和蛋白質組成。核心之外為病毒衣殼，呈20面體立體對稱，含有核衣殼蛋白質。最外層為包膜，包膜上的糖蛋白有刺突狀結構，是HIV與宿主細胞受體結合位點和主要的中和位點（圖）。

HIV屬逆轉錄病毒科慢病毒屬，其RNA中含有gag、env 和pol基因以及6種調控基因 〔tat, vif, vpr, vpx (vpu), nef, rev〕。gag基因編碼病毒的核心蛋白；pol基因編碼病毒復制所需要的酶類（逆轉錄酶、整合酶和蛋白酶）；env基因所編碼病毒包膜蛋白，是HIV免疫學診斷的主要檢測抗原。調控基因編碼輔助蛋白，調節病毒蛋白合成和復制。
現有兩型HIV：HIV-1和HIV-2，它們主要區別在於包膜糖蛋白上。HIV是一種變異性很強的病毒，不同的病毒株之間差異很大，甚至同一毒株在同一感染者體內僅數月就可以改變，使原中和抗體失去中和效能，這給HIV疫苗的研製造成很大困難。目前在全球流行的HIV-1毒株已出現三個組，即M、O和N 組，其中M組又可分為A到J共10個亞型，而且亞型間的重組體已有發現。HIV-2現有A～F共6個亞型。目前也有學者根據病毒的生物學特性對HIV-1進行分群，如根據病毒與宿主細胞結合所利用的輔助受體的不同（CCR5、CXCR4），分為R5和X4毒株；或根據宿主范圍及復制特性不同，分為非合胞體誘導株（NSI）和合胞體誘導株（SI）；有毒力株和無毒力株；快/高型和低/慢型等。
HIV對外界抵抗力較弱，遠較乙型肝炎病毒（HBV）對外界的抵抗力低得多。對熱、乾燥敏感，不耐酸。60 ℃以上就可被滅活。因此，注射器具、醫療用具通過高 溫消毒、煮沸或蒸汽消毒完全可以達到消毒目的。HIV對化學品也十分敏感，常用的消毒劑如70%酒精、10%漂白粉、2%戊二醛、4%福爾馬林等均能滅活病毒。

HIV的傳染源
艾滋病病人和無症狀HIV攜帶者為主要傳染源。

HIV的傳播途徑
① 性接觸傳播。主要為男性同性戀及男女之間的異性性接觸，女性同性戀少見。目前男女之間異性傳播已成為HIV傳播的主要方式，而女性對HIV的易感性比男性高4倍。
② 通過輸血或血製品傳播。主要為被HIV污染的注射用具、血液及血液製品。
③ 母嬰傳播。包括宮內、分娩過程及產後等。據美國CDC的調查結果，在≤13歲的小兒HIV/AIDS中，70%以上都是在圍生期由母親傳播給嬰兒的。
④ 亞型及其分布。HIV為逆轉錄病毒，而逆轉錄酶缺乏校正修復功能，因而HIV的變異頻率非常高，每一輪復制都會引入約10個鹼基的錯誤。高的變異頻率使世界不同地區甚至同一感染個體不同時期HIV的基因組都有較大差異。根據HIV gag和env區的基因序列，目前HIV-1可分為M、N和O三個進化組，兩個進化組之間序列的異質性超過45%。依據env區序列，M組又可分為A-J 10個亞型，亞型之間序列的異質性為30%。A和D亞型主要見於中非；B亞型見於北美、歐洲、澳大利亞等；C亞型在南非、印度及中國；E亞型在中非、泰國及中國；F亞型在巴西和扎伊爾；G亞型在俄羅斯、台灣及加彭；H亞型見於非洲；I亞型在塞普勒斯；J亞型在非洲。O組最初從喀麥隆分離而來，主要分布於喀麥隆、加彭等國。N組為新近分離的一個組，其具體分布有待進一步調查。

HIV的基因組結構及功能
HIV基因組為單股正鏈RNA二倍體，每條RNA鏈長約9.8kb，兩條鏈的5』端借氫鍵形成二聚體。與其他逆轉錄病毒相同，HIV的基因結構從5』端到3』端依次為5』LTR-gag-pol-env-3』LTR。5』端有帽狀結構m7G5ppp5GmpNp，3』端有polyA序列。除三個編碼結構蛋白的基因gag、pol、env外，HIV還有較其他逆轉錄病毒更多的調節基因（regulatory gene）和附加基因(accessory gene)，其編碼的的調節蛋白在病毒的整個感染及復制過程中具有非常重要的作用，目前已發現至少有7種：tat、rev、nef、vpr、vpu、vpx和vif。
1．長未端重復序列：
HIV基因組兩端的長未端重復序列（long terminal repeat, LTR）不編碼病毒產物，對於病毒基因表達的起始和調節至關重要，其上有許多細胞轉錄因子的結合位點，可分為調節單位、核心轉錄單位和反式激活效應元件單位（TAR）三個不同的調控功能區。
2． Gag基因：
即組特異性抗原基因，編碼分子量為55KD的前體蛋白（P55），由未拼接的病毒mRNA表達。P55經病毒蛋白酶切割，由N端至C端形成P17、P24、P15三種蛋白。P17稱為基質蛋白（MA），附著於病毒脂質又層膜的內側，形成毒粒的內膜，起穩定毒粒的作用。P24稱及殼蛋白，形成病毒的錐形核。P15進一步被裂解為P9和P7兩種核殼蛋白，與病毒的RNA結合。
3． Pol基因：
Pol基因編碼病毒的逆轉錄酶（RT）P66和整合酶（IN）P32，由未拼接的病毒mRNA表達。RT由兩個亞單位P66和P51構成，其N 端完全一致，具DNA聚合酶活性，而C端由於病毒蛋白酶的不對稱切割，使一個亞單位C端的部分氨基酸被切除而失去RNA酶H的功能，另一亞單位C端的RNA酶H功能域則未被切除。HIV進行復制時，首先在RT的N端的DNA聚合酶功能區的作用下，以RNA為模板合成互補的DNA，表現出逆轉錄酶活性，然後在P51的協助下，P66 C端的RNA酶H功能區降解RNA/DNA 雙鏈中的RNA鏈，表現為RNA酶H活性，最後以此單鏈DNA為模板，由P66亞單位合成互補DNA而成雙鏈DNA，表現出DNA聚合酶功能。整合酶能夠將逆轉錄成的雙鏈DNA整合入宿主染色體DNA，整合過程可分三步：首先由IN在病毒線狀平端DNA的3』端由3』→5』方向切下2個核苷酸，形成CA-OH-3』，同時在宿主DNA雙鏈整合部位上各切開一5bp的切口，然後在IN的作用下，CA-OH-3』與宿主DNA切開部位的5』-P形成磷酸二酯鍵，最後整合部位被修補完整。
4． Env基因：
Env基因編碼病毒的膜蛋白，由單一拼接的mRNA進行表達，首先在內質網內合成分子量為88KD的蛋白質，在向高爾基體的轉運過程中被糖基化而成為分子量160KD（gp160）的包膜糖蛋白前體，糖基化為病毒的傳染性所必須。gp160被蛋白酶切割為gp120和gp41兩部分，gp120位於感染細胞和毒粒的表面，稱外膜蛋白，其上有5個高變區（V1~V5）和6個保守區（C1~C6）。高變區中的V3環區是阻斷HIV傳播的中和抗體結合的主要靶位，gp41鑲嵌於病毒的脂質雙層中，稱跨膜蛋白，在病毒感染過程中能夠介導病毒脂膜與細胞膜的融合。gp120與 gp41的N端以非共價鍵結合，當HIV感染T淋巴細胞或巨噬細胞時，gp120首先與細胞表面的CD4分子結合，導致空間構象發生改變，使gp41與細胞膜充分接觸而發生病毒與細胞膜的融合，病毒核心進行細胞。
5．Tat基因：
Tat基因由兩個外顯子構成，編碼HIV復制和基因表達所必須的反式激活蛋白(transactivator, Tat)，又稱反式激活因子（trans-activating factor），能夠增強病毒復制的起始，促進mRNA的轉錄和翻譯。Tat與HIV RNA 5』端LTR結合後能夠極大地提高HIV基因的轉錄水平。另外，tat可能還具有轉錄延伸因子的作用，延長mRNA的轉錄。
6．Rev基因：
Rev基因由兩個外顯子組成，分別編碼25個氨基酸和91個氨基酸的肽段，由完全拼接的mRNA進行表達，兩個肽段結合形成19KD（P19）的病毒顆粒蛋白表達調節因子（regulator of expression of virion protein, Rev）在胞質內合成後由其上的核定位信號（nuclear localization signal, NLS）介導進入核內聚集於核仁。Rev蛋白是HIV復制非常重要的一個反式激活因子，能夠促進HIV的基因轉錄由早期向晚期轉變，即由調節蛋白基因的轉錄向結構蛋白基因的轉錄進行轉變。因此，Rev蛋白對HIV的調節基因具有負調控作用，而對病毒結構基因和附加基因具正調控作用。另外，Rev與其應答元件（Rev responsive element, RRE）的結合還可促進未拼接或未完全拼接的病毒mRNA由胞核向胞漿運輸。
7．Nef 基因：
Nef 基因由單一外顯子構成，編碼27KD的甲基化蛋白。Nef 蛋白是HIV復制過程中的負調節因子（negative regulation factor），具多種功能，既可進行正調節，也可進行負調節。能夠增強或減弱病毒的復制，既能激活T細胞，增加病毒感染，又能抑制病毒的超感染。
8．其他調節蛋白基因：
Vpr基因編碼病毒蛋白r，高度保守。Vpr蛋白非HIV復制所必須，能反式激活病毒基因的表達，在HIV感染未分裂的細胞時使細胞停留在細胞周期的G2期。另外，Vpr基因的存在還可使HIV感染細胞時致細胞病變效應增加。
Vpu基因編碼病毒蛋白u，為HIV-1所特有，Vpu蛋白為非HIV復制所必須的雙親性膜整合蛋白，能夠增強病毒顆粒的組裝和釋放，介導內質網中CD4分子的快速降解。
Vif基因編碼病毒顆粒感染性因子（virion infectivity factor, Vif）。Vif蛋白亦非HIV復制所必須，能夠增加病毒顆粒的感染性。

HIV病毒感染和復制
HIV主要侵犯人體的CD4+ T淋巴細胞和巨噬細胞，其感染過程包括病毒的吸附、侵入、逆轉錄、基因組的整合、表達及釋放等過程。當感染發生時，病毒的外膜糖蛋白gp120首先與細胞表面的CD4分子結合並與輔助受體CCR5或CXCR4等結合，gp120空間構象發生改變，暴露出跨膜蛋白gp41與細胞膜作用，導致病毒包膜與細胞膜融合，病毒核心進入細胞內，脫殼後病毒基因組在RT作用下以病毒RNA為模板合成cDNA，再以此cDNA為模板合成雙鏈DNA，經環化後在病毒IN的作用下隨機整合到細胞染色體上成為前病毒而長期存在並隨細胞的分裂而傳至子代細胞。此前病毒即為病毒復制時的轉錄模板，病毒進行復制時，早期轉錄的長鏈mRNA經拼接後表達病毒的調節蛋白，待調節蛋白的量到達一定閾值後，病毒進入晚期轉錄，產生的未拼接的mRNA部分用來指導合成病毒的結構蛋白，部分作為病毒的基因組，與結構蛋白進行裝配成為病毒核心顆粒，由胞膜出芽時獲得包膜及膜蛋白。

HIV的致病機理
在HIV感染人體的初期會有病毒血症的出現，並有輕度的發熱及淋巴結腫大等症狀，隨後病毒血症大幅降低至難以檢測的水平，抗核心蛋白及包膜蛋白的抗體陸續出現，病程進入無症狀帶毒期，即潛伏感染期（latent infection），病毒可潛伏存在長達數年甚至十多年，其潛伏機制目前尚不清楚。在某些因素的作用下，病毒大量復制，機體再次出現病毒血症並出現艾滋病症狀，體內大量的輔助性T細胞被病毒破壞，造成機體細胞及體液免疫功能降低，無法抵禦外界病原微生物的侵襲而發生免疫缺陷綜合症。有關HIV的致病機理，目前還不十分清楚，一般認為，HIV感染CD4+ T 細胞後，病毒通過基因組整合，以前病毒形式存在於CD4+ 細胞，在感染的早期，通過Th1細胞分必細胞因子IL-2等，在IL-2刺激下CD8+ T淋巴細胞對CD4+細胞產生強大的免疫抑製作用，從而使病毒處於被抑制的潛伏狀態。在感染的晚期，Th2細胞的分泌占優勢，通過分泌IL-10等細胞因子，使CD8+ T細胞失去對CD4+ 細胞的抑制，病毒增殖並釋放出新的病毒顆粒去感染更多CD4+細胞，從而造成CD4+ 細胞的大量死亡最後耗竭而失去其免疫功能。

HIV檢測

一、 HIV 檢測的特殊性
HIV 檢測不同於其他病原微生物檢測，要求十分嚴格，任何錯誤的診斷，包括假陽性或假陰性，都會對被檢者產生十分重要的影響。因此， HIV 檢測必須嚴格按照國家制定的《艾滋病檢測工作管理辦法》和《艾滋病檢測技術規范》（以下簡稱《規范》）進行，檢測的實驗室須經當地衛生行政部門審批合格，從事艾滋病檢測工作的技術人員須接受專門的技術培訓，並獲合格證書，診斷試劑應選擇高敏感和高特異的，篩查呈陽性反應的需用特異性更強的方法（如：免疫印跡試驗）進行確認，整個實驗過程應有嚴格的質量保證體系。

二、 HIV抗體檢測
目前國外用於 HIV 抗體篩查的方法很多，根據檢測原理不同分為酶聯免疫吸附法、凝集法和層析法，可對血液、唾液和尿液標本進行常規或快速檢測。在實際工作中常用的有酶聯免疫吸附試驗（ ELISA ）、明膠凝集試驗和各種快速診斷試劑。自 1985 年第一代 ELISA 試劑問世以來，隨著醫學技術的飛速發展，包被抗原已從一代的全病毒裂解物發展為目前以基因重組和多肽抗原包被和標記、有著良好敏感性和特異性的三代雙抗原夾心試劑，檢測亞型包括 HIV-1 、 HIV-2 和 HIV-1 型的 O 亞型，窗口期由 10 周縮短至 3-4 周。為避免窗口期傳染，荷蘭、法國等國已研製出第四代以重組的多肽抗原和抗 P24 抗體包被的雙抗原夾心法試劑盒，可同時檢測抗原抗體，使窗口期縮短了 2-3 周，但其臨床價值有待評估。按《規范》要求，我國采供血機構進行血液篩查和各醫療衛生機構常規篩查檢測宜採用 ELISA 法，自采自供血的單位必須進行 HIV 抗體檢測，在尚未建立艾滋病篩查實驗室的偏遠地區或大醫院急診手術前可由經過培訓的技術人員在規定的場所用快速試劑進行血液篩選。對用 ELISA 試劑或快速診斷試劑進行的篩查實驗如呈陰性反應，即報告 HIV 抗體陰性；對呈陽性反應的標本，篩查實驗室應用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的試劑進行重復檢測，如兩種試劑復測均呈陰性反應，則報告 HIV 抗體陰性；如均呈陽性反應，或一陰一陽，需送艾滋病確認實驗室進行確認。篩查試劑必須是 HIV-1/2 混合型、經國家葯品監督管理局（ SDA ）注冊批准、批批檢合格、臨床評估質量優良、在有效期內的試劑。

HIV 抗體篩查呈陽性反應的標本由於存在假陽性的可能，必須做確認試驗。國際上有 3 種確認試驗方法，包括免疫印跡試驗、條帶免疫試驗及免疫熒光試驗，目前以免疫印跡試驗最為常用。確認試劑必須經 SDA 注冊批准。免疫印跡試劑有 HIV-1/2 混合型和單一型，按《規范》要求，一般先用 HIV-1/2 混合型試劑進行檢測，根據《規范》中判定免疫印跡試驗結果的基本原則並參照所用試劑說明書綜合判定，無 HIV 抗體特異帶出現的報告 HIV 抗體陰性；出現 HIV 抗體特異帶，符合 HIV-1 抗體陽性判定標准，則報告 HIV-1 抗體陽性。如出現 HIV-2 型的特異性條帶，需用 HIV-2 型免疫印跡試劑再做單一的 HIV-2 型抗體確認試驗，呈陰性反應，報告 HIV-2 抗體陰性；呈陽性反應的則報告 HIV-2 抗體血清學陽性，如需鑒別應進行核酸序列分析。如果出現 HIV 抗體特異帶，但帶型不足以判定為陽性，則判為 HIV 抗體不確定。對 HIV 抗體不確定者應按《規范》要求進行隨訪，必要時可做 HIV-1 P24 抗原或核酸測定，但檢測結果只能作為輔助診斷依據，確認報告要依據血清學隨訪結果。

由於目前唾液檢測試劑的敏感性和尿液檢測試劑的特異性明顯低於血液檢測試劑，故我國 SDA 已注冊批準的 HIV 抗體篩查和確認試劑只能用於血液標本檢測。

三、 HIV 抗體檢測的質量控制
在所有實驗中必須包含有內部對照質控血清和外部對照質控血清。

內部對照質控血清指試劑盒內提供的陽性和陰性對照血清。內部對照是質量控制的基礎，每次檢測必須使用內部對照，而且只能在同批號的試劑盒中使用。

外部對照質控血清是由實驗室設置的弱陽性對照，一般以該試劑盒臨界值（ Cut off ）的 2-3 倍為宜。該血清可到專門單位購買，也可由實驗室自己制備。制備方法是：收集 HIV 抗體陽性和陰性血清， 56 ℃ 30min 滅活， 3000rpm 離心 15min ，弱陽性對照可以用 HIV 抗體陰性的健康人血清梯度稀釋 HIV 抗體強陽性血清、或用試劑盒內提供的陽性和陰性對照血清混合並標定後得到，一般按一年使用量配製，用 0.2 μ m 濾膜過濾除菌，按一周實驗用量分裝、分類、標記並封口， -20 ℃ 凍存。該血清不可反復凍融，融化後應存放 2 -8 ℃ ，一周內使用。原則上每次實驗必須使用外部對照質控 血清，以便監控本次實驗的重復性和穩定性，同時了解各批試劑盒的批間差異，繪制質量控制圖。

四、 HIV-1 P24 抗原檢測
HIV 感染人體後有一段窗口期，在這段時期病毒抗體不能被檢出，但可以檢測到病毒相關抗原或分離病毒。故在窗口期檢測抗原是早期輔助診斷和縮短窗口期的一種方法，在感染早期和發病期抗原檢出率相對較高。 HIV-1 P24 抗原檢測還適用於： HIV-1 陽性母親所生嬰兒的早期輔助鑒別診斷；第四代 HIV-1 抗原 / 抗體 ELISA 試劑檢測呈陽性反應、但 HIV-1 抗體確認陰性者的輔助診斷；監測病程進展和抗病毒治療效果。

P24 抗原檢測一般用 ELISA 雙抗體夾心法試劑，必須經過 SDA 批准注冊。

HIV-1 P24 抗原的陽性結果必須經過中和試驗確認 , 該結果僅作為 HIV 感染的輔助診斷依據，不能據此確診； HIV-1 P24 抗原檢測陰性只表示在本試驗中無反應，不能排除 HIV 感染。

五、HIV核酸檢測
HIV 核酸檢測，通常是檢測 HIV RNA ，以前只能定性檢測血液中是否存在病毒核酸，而目前的技術可定量檢測血液中病毒復制水平。 HIV 核酸定性檢測可用於 HIV 感染的輔助診斷，如窗口期輔助診斷、病程監控、指導治療方案及療效測定、預測疾病進程等。通常使用 PCR 或 RT-PCR 技術，使用分子生物學實驗室通用的擴增試劑，引物可來自文獻或自行設計，應盡量覆蓋所有或常見的毒株，也可使用復合引物。 HIV 核酸定量檢測多用於監測 HIV 感染者的病程進展和抗病毒治療效果，目前常用的測定方法有逆轉錄 PCR 實驗（ RT-PCR ）、核酸序列擴增實驗（ NASBA ）、分支 DNA 雜交實驗（ bDNA ）等。在不同 HIV 定量檢測方法的選擇中，由於目前用於統一不同定量方法檢測值的標准品尚未問世，因此不同定量方法結果之間還無法直接進行比較，建議同一病人治療前後用同一方法進行 HIV 定量檢測。

值得注意的是， HIV 核酸定性檢測陰性，只可報告本次實驗結果陰性，但不能排除 HIV 感染； HIV 核酸檢測陽性，可作為診斷 HIV 感染的輔助指標，不能單獨用於 HIV 感染的診斷，報告定性檢測結果時還應註明反應條件和所使用的引物序列。報告 HIV 核酸定量檢測結果時應按照儀器讀數報告結果，註明使用的試驗方法、樣品種類和樣品量，當測定結果小於最低檢測限時，應註明最低檢測限水平，低於最低檢測限的結果不能排除 HIV 感染。

六、CD4T淋巴細胞計數
CD4 T淋巴細胞計數是艾滋病診斷、疾病分期、制定抗病毒治療和預防機會性感染方案的實驗室標准指標，美國 CDC1993 年修訂的青年 / 成人艾滋病監測病例分類及擴大的診斷標準是：無症狀 HIV 感染期（ A 1 、 A 2 ）： CD4 絕對數≥ 500/mm 3 或 CD4 百分率≥ 29% ；有症狀感染期（ B 1 、 B 2 ）： CD4 絕對數 200-499/mm 3 或 CD4 百分率 14-28% ； AIDS 期（ A 3 、 B 3 、 C 1-3 ）： CD4 絕對數＜ 200/mm 3 或＜ 14% 。 CD4 T 淋巴細胞計數也是與病毒載量相配合預測疾病進程的可靠指標，這兩個實驗可以相互獨立預測艾滋病臨床過程和生存期。檢測 CD4 細胞數的標准方法是流式細胞儀。影響 CD4 細胞數的因素有季節、晝夜差、某些並發症和皮質醇類葯物等，而性別、成人年齡、緊張、生理性應激和妊娠對 CD4 的細胞數影響不大。由於 CD4 百分數受變異影響較絕對數小，故 CD4 細胞百分率有時比絕對數對臨床更有意義。

七、病毒變異和耐葯性的測定
隨著 HAART 治療的廣泛開展，病毒變異和耐葯株正在不斷出現，甚至對一個葯物的耐葯可引起多種葯物的交叉耐葯。因此近年來各國相繼建立起病毒變異和耐葯的測試方法，目前常用的方法包括基因型 HIV 耐葯測試和表型 HIV 耐葯測試。 表型 HIV 耐葯性測試方法能直接測出 HIV-1 對葯物的敏感度，並能揭示事先存在或交叉的耐葯情況，有利於指導 HIV-1 感染者有效地用葯。目前市面上供應試劑盒已有 2 種，即 AV （ Vicro Antivirogram ）和 PS （ Virologic PhenoSense ），兩者方法均應用從生長於載體中的 HIV-1 而獲得的重組病毒和病人標本中蛋白酶與逆轉錄酶序列，分析與野病毒之間 IC50 值相差倍數，一般達 5—10 倍以上為陽性。這種方法的最大優點是可以獲得各種葯物耐葯量度數據，但不足的是試驗慢又昂貴，技術要求高。當病毒對某些葯物產生耐葯性時，病毒基因會發生一些明確的突變。病毒耐葯基因型的檢測有助於預測某些葯物的治療效果。基因型 HIV 耐葯性測試方法是通過從病人血液標本中分離到的 HIV 基因物質，應用核酸酸序列分析或雜交技術以確定病毒變異的位點，並可參考已有資料庫按不同亞型進行比較。在確認變異後，與既往耐葯或交叉耐葯研究比較，間接地估計葯物耐葯情況，簡單快速，費用低。缺點是能確認所分離到的基因變異，但無法指出葯物耐葯的程度。

應當強調的是，我國自 1995 年進入艾滋病流行的快速增長期，感染者中約 70% 為經靜脈吸毒等血液途徑感染，按艾滋病自然病程，近 1-2 年將會出現艾滋病的發病高潮，醫院系統所承擔的艾滋病檢測工作將愈來愈重，因此各醫院檢驗科應嚴格按《規范》要求，通過 HIV 抗體篩查和確認試驗提供准確的 HIV 感染診斷，通過 CD4 T 淋巴細胞計數和 / 或 HIV 核酸定量檢測為艾滋病診斷、判斷疾病進展和抗艾滋病治療療效觀察提供可靠的實驗室數據。

HIV體外存活期
科學家和醫學權威一致認為HIV在外界環境中無法正常存活，這一觀念徹底否定了HIV在外界環境傳播的可能性。只有在血液，精液，陰道分泌物，乳液，唾液和淚液中才找得到HIV病毒，而且它的病毒載量在這些體液中差別很大。

為了得到有關HIV存活率的資料，實驗室使用了人工培養單位數量多的HIV病毒的。盡管這些人工培養出來的病毒在精確的控制和實驗室有限條件下存活了十幾天甚至幾周，可是CDC研究顯示盡管是載量高，90%-99%的HIV病毒在幾個小時內也會很快死亡。既然實驗室研究用的HIV病毒的載量比在血液或者其他體液中的載量高很多，隨著感染了HIV的人類血液或者其他體液自身死亡，這便降低了理論上在外界感染上HIV的機會。

那些對實驗室結論的不準確的解釋更多的是引起了人們不必要的恐慌。

愛滋病(AIDS)全稱獲得性免疫缺陷綜合症，是由人類免疫缺陷病毒引起的一種免疫系統疾病。其病毒直接攻擊人體的T淋巴細胞，導致人體的免疫系統全面癱瘓，病人最後一般死於腫瘤。傳播途徑：血液、母嬰和性接觸。目前還無特效葯或疫苗可治療。（一般常以雞尾酒療法治療，但副作用較大）

㈢ 血清中禽流感抗體含量的檢測方法

禽流感是由A型流感病毒引起的一種高度接觸性傳染性疾病。給世界養禽業造成了巨大的經濟損失。禽流感病毒可分為不同的亞型，世界各地的禽流感主要由高致病性的H5和H7兩種亞型引起，而人對其中的H1和H3亞型易感。快速診斷禽流感病毒具有重大意義。目前禽流感的實驗室檢測是比較快速、准確的方法。隨著血清學實驗技術和生物工程技術的飛速發展，禽流感診斷技術的研究也不斷取得新進展。瓊脂擴散試驗、血凝和血凝抑制試驗等常規方法的使用雖有一定的優勢，但免疫熒光法和ELASA也日益顯示出其快捷准確的特點：分子生物學的發展為核酸序列分析法的建立創造了條件,也使PCR，RT－PCR及核酸探針等檢測技術成為可能。這篇文章就是對有關該病的診斷方法加以總結，並提出了認為比較可行的改進方法，旨在方便對禽流感做出及時而有效的診斷並採取相應措施。

1. 病毒的分離鑒定

無菌採集病料經處理後接種9－11日齡雞胚，收取尿囊液測定血凝活性。若為陰性則應繼續盲傳2－3代。對具有血凝活性的尿囊液需先用新城疫(ND)抗血清做血凝抑制(HI)試驗!以排除ND感染。然後用免疫擴散等方法來檢測特異核心抗原，核糖蛋白(NP)或基質蛋白(MP)，再用血凝抑制試驗和神經氨酸酶抑制試驗鑒定A型流感病毒亞型。分離鑒定的同時進行致病力試驗，確定毒力強弱。但是流感病毒「O」相毒株不凝集雞紅細胞，故近來在流感病毒鑒定中常用豚鼠或人紅細胞來代替。然而，該兩種細胞無細胞核，沉積慢，一般在紅細胞凝集及凝集抑制測定中需60分鍾才能觀察結果，同時在「U」型孔板中，很難沉積成像眼淚樣的點即當中常有小空[1]。

病毒的分離鑒定對禽流感的診斷比較確實,但操作程序繁瑣、費用多、耗時費力。

2. 血清學診斷技術

2.1 瓊脂擴散(AGP)試驗

進行病毒抗原型特異性鑒定即用已知陽性血清和末知抗原進行AGP試驗。

受檢樣品是具有血凝素活性的雞胚尿囊液。AGP是用來檢測A型流感病毒群特異性血清抗體，即抗核糖蛋白(RNP)和基質蛋白(MP)抗體，因而適用於鑒定流感病毒 。1979年Beard首次將AGP用於禽流感抗體檢測[2]。

此法雖簡單易行，但是敏感性較差，易出現假陽性。AGP最常用的是免疫雙擴散，趙增連、陳海燕等分別開展了禽流感病毒快速定型雙擴散法的研究，不僅提高了其敏感度，且快速省時，在此方法基礎上建立的AGP診斷技術及其診斷試劑盒，在全國范圍內得到推廣應用，並取得良好的效果。

2.2 血凝(HA)和血凝抑制試驗(HI)

一般情況下，新分離毒株要先鑒定出特異性NP或.MP抗原型(用AGP)確定禽流感病毒，再做HA亞型的鑒定[3]。

現已有人採用改進HA試驗方法，稱為HA加敏法。該法測抗體效價比常規性高2－4倍，若抗原用乙醚裂解其敏感性比常規法高4－6倍，但觀察時以30min內為好，否則易出現假陽性。另外，還應注意在HI試驗時，應先除去特異性凝集反應。許多禽類血清都含有非特異性因子，能和紅細胞表面受體競爭性地作用於病毒表面的血凝素而發生非特異性凝集反應。通常用受體破壞酶(RED)即霍亂菌培養液處理法或高碘酸鈉法制備血清[4]。

HA、HI 特異性好，是亞型鑒定的常用方法，但其操作過程繁瑣費時，並且由於用已知HA亞型的抗血清不能檢出新的HA亞型的禽流感病毒，所以用該方法鑒定不如瓊脂擴散實驗簡便和快捷。

2.3 神經氨酸酶抑制試驗(NIT)

根據A 型流感病毒的表面抗原特性,特別是血凝素(HA)和神經氨酸酶(NA)特性，不僅可通過HI試驗對病毒進行堅定，而且可通過NI試驗進行鑒定。1983 R.A.Van.Densen介紹了NI試驗的一種改進法－平板微量NI試驗，此法雖不能提供常量法的定量，但卻是A型流感病毒的病毒分類和抗體檢測的快捷方法， 試驗證明微量NI試驗能對分離物做出准確鑒定而常量NI試驗檢測亞型混合物似更敏感[5]。

目前國家獸醫實驗所已將微量NI試驗列為流感病毒分離物定型及篩選畜禽血清9型NA抗體的常規方法，診斷中也已廣泛採用此法特別是美國在80年代火雞發生流感病毒期間，每次流行所得的血清樣本用微量NI試驗所作出的A型流感病毒亞型鑒定結果已為病毒分離、疫苗接種和流行病學資料所證實。這種方法已被證明是快速的且成本較低和有可重復性。這種技術的可靠性將導致NI試驗的廣泛應用。

2.4 中和試驗(NT)

病毒中和實驗技術是反映機體抵抗特定病毒感染能力的最可靠方法。流感病毒中和實驗技術有以下優點：（1）由於中和抗體作用於流感病毒表面血凝素蛋白（HA），使流感病毒失去感染能力，因此，流感病毒中和實驗主要用於檢測血清中的特異性抗血凝素蛋白抗體。（2）流感病毒中和實驗既能檢測病毒株的功能性變化，又能反映機體的抗病毒水平。（3）該方法主要使用感染性病毒，不需要進行病毒或病毒蛋白的純化，因此，可以被迅速用於檢測新病毒或人群免疫狀態[6]。

以中和試驗(NT)來鑒定或滴定流感病毒時常用雞胚或組織培養細胞，操作方法與其他病毒(如NDV)的中和試驗相同。病毒中和實驗技術是一個相當復雜的過程，參與中和反應的因素有病毒、抗血清和宿主細胞。這些因素的變化都會影響中和實驗的結果。因此，對中和實驗的整個過程進行嚴格的質量控制。每次測定必須設立陽性和陰性血清對照，陽性和陰性細胞對照，以及對病毒使用劑量進行滴定。

NT試驗是最敏感而特異的血清學方法，只有抗體與病毒顆粒上的表面抗原相對應，特別是與吸咐到宿主細胞上的病毒表面抗原相對應，才能在實驗中取得滿意的顯示效果。 因此，某一個血清型的中和試驗抗體只與同組內地其他病原表現出有限的交叉反應。病毒中和試驗操作繁瑣耗時費料，臨床上幾乎不用。但作為經典方法在病毒鑒定中起著重要作用，許多新的檢測方都要與之為標准進行比較[7]。

2.5免疫熒光技術(IFT)

免疫熒光技術就是熒光抗體技術(FAT)。 IFT早在1961年就開始用於人類流感的快速診斷。1984年濱西法尼亞州爆發禽流感時，Skeeles將IFT首次用於AIV的檢測。IFT最早用於病毒的鑒定和定位病毒感染細胞中特異性抗原。主要是核內熒光:用MP抗原的熒光抗體主要出現胞質熒光，核內也有部分熒光[8]。

用於禽流感病毒的診斷常用直接熒光抗體法即在組織觸片上直接染色，以熒光顯微鏡檢查熒光 。一種AIV的熒光抗體可用來檢測不同亞型的其他病毒。

IFT用於診斷具有快速、簡便、敏感性好的特點，而且費用較低，其敏感度同病毒的分離鑒定相當，有時高於用雞胚進行的病毒分離。但是需要注意的是如何避免和降低標本中出現的假陽性(非特異性熒光)問題。

對一株雜交瘤細胞分泌的流感病毒的單克隆抗體進行檢測時，發現間接固相免疫熒光技術的敏感性比HI 高40－150倍。間接免疫熒光技術也可以用來檢測核蛋白(NP)基質蛋的(MP)抗原與抗體的反應，其敏感性很高。但對抗原制備要求較高，需用非離子型去污劑對純化的病毒粒子進行裂解[9]。

2.6 酶聯免疫吸附法(ELISA)

ELISA的基本原理是：酶結合物與相應抗體或抗原特異性結合，再遇酶底物時，在酶的強烈催化下使原來無色的底物產生化學反應，即形成有色的產物，便可用肉眼或分光光度計定量檢測其含量。該方法具有特異性、敏感性、快速性和簡易性等優點。在流感病毒微量中和實驗中，酶結合物（HRP標記的羊抗鼠IgG抗體）與存在於MDCK細胞膜上的病毒核蛋白抗原-核蛋白單克隆抗體復合物結合，HRP酶催化OPD，使無色底物形成橙黃色化合物，再由ELISA檢測儀測定吸光度值，從而獲得中和抗體滴度[11]。

1974年Jenning等首先用ELISA對注射流感病毒所產生的抗體消長規律進行了檢測。Lanbre認為ELISA的敏感性遠高於HI補給結合反應 。Meulemans(1987)對ELISA、AGP、HI檢測AIV抗體進行了比較研究。發現AGP和ELISA一樣均能檢測型特異性抗原(抗體)，但敏感性遠低於ELISA，HI適用於亞型的檢測，其敏感性不如ELISA。1993 年Shodihall用混合纖維素脂膜或硝酸纖維素膜代替微量反應板，建立了快速診斷的DAS－ELISA大大縮短了診斷時間，並可保留ELISA的特異性、敏感性，其結果又不需要特殊儀器分析、可用肉眼判定。

隨著分子生物技術的發展，中國農業科學院哈爾濱獸研所的李海燕等用表達禽流感病毒核蛋白的桿狀病毒感染S9昆蟲細胞，以其表達產物制備抗原，建立了以桿狀病毒系統表達的AIV核蛋白為抗原的禽流感間接(重組核蛋白)ELISA診斷技術(rNP－ELISA)確定了其最適工作條件，並對3138份雞血清進行了檢測。實驗證明rNP－ELISA與全病毒間接ELISA(AIV－ELISA)，AGP及HI的符合率分別為99.9%、97.8%、98.8%，並能100%檢出AGP陽性及疑似HI陽性的血清樣品。 這證明了rNP－ELISA是檢測A型禽流感病毒血清特異性抗體的一種特異、敏感、微量、快捷、經濟的血清學診斷技術[11]。

ELISA方法的敏感性和特異性與抗原的純度直接相關 。1984年Abraham等報道了抗原快速提純法，所需時間比常規法縮短10倍，並且研究結果表明應用提純抗原幾乎全部排除了假陽性反應。

目前美國Kiregard Reery和Labortories有試劑盒出售。ELISA成為AI流行病學普查及早期快速診的最有效和最實用的方法。

3 分子生物學技術

近年來，隨著現代生物技術的發展，分子生物技術已被大量應用於禽流感的快速診斷。

3.1聚合酶鏈反應(PCR)及反轉錄---聚合酶鏈反應(RT—PCR)

PCR是近來發展成熟起來的一種體外基因擴增技術，能在數小時內使DNA呈指數增加。已成功地用於多種病毒的基因檢測和分子流行病學調查等其檢測原理為：尋找傳染性因子的特異DNA序列。對待測樣品進行PCR擴增， 如果檢測出了相應的擴增帶，則判為陽性反應；反之，無擴增帶則為陰性反應。

鑒於引起致病的禽流感病毒多是H5和H9血清亞型，在PCR技術的基礎上，崔尚金等(1998)建立了一種直接檢測禽糞樣和雞胚尿囊液中AIV—H9亞型RNA的RT－PCR反應，並將此法與AGP和電鏡技術作了比較，結果表明引物的特異性決定了產物的特異性，並且該方法靈敏度高，檢測過程僅需8h左右，並且大大縮短了感染後的檢出時間。

應用毛細管PCR(15min30個循環)代替常規PCR(2.5個小時30個循環)以進一步縮短檢測時間的研究也已展開並進入更深入的領域，以期用於不同樣品(組織、組織液、分泌液、糞便等)的檢測，區分高致病力毒株和低致病力毒株與非致病力毒株，從而深入探討該方法在AIV的臨床早期診斷，流行病學調查及發病機制中的應用價值，為我國制定AIV的綜合防制措施做出貢獻[12]。

3.2 核酸探針技術/核酸分子雜交技術

這項技術是目前生物化學和分子生物學研究應用最廣泛的技術之一，是定性和定量檢測特異DNA或RNA的有力工具。

核酸探針技術的原理，在進行雜交時，用一種預先分離純化的已知DNA或RNA序列片段去檢測末知的核酸樣品，對作檢測用的已知DNA或RNA序列片段加以標記的片段就稱為核酸探針。作為核酸探針的DNA或RNA是各種病原微生物基因的一部分。 在變性分開的待檢DNA或RNA單鏈中加入與其有互補作用的核酸探針。探針在一定條件下就能與原來變性分開的DNA或RNA單鏈上的互補區段形成氫鍵，從而結合成雜交雙鏈，通過洗滌，除去未雜交上的標記物，然後進行放射自顯影，即可確定原待檢樣品有無與探針互補的DNA或RNA序列。

Bashiruddin等(1991)報道了擴增HA基因來分析致病毒株與非致病毒株的差異，證實了致病毒株與非致病毒株氨基酸的差異，顯示了本方法的應用前景[13]。

3.3熒光PCR法

利用生物學手段，用熒光PCR方法快速檢測禽流感病毒的方法已在北京通過專家鑒定，這一研究成果不僅在國內屬於首次，而且在國際上也屬於先進水平。它與國際標准方法雞胚病毒分離相比，不僅無需做雞胚病毒分離培養，而且時間也由原來最短的21d縮短為4h。

4 電鏡技術

由於流感病毒為正粘病毒，屬於形態特徵性強的病毒,因而可用電鏡技術來診斷。為提高禽流感的檢出率，除樣品制備技術外，取病料的部位和時間也是獲得准確檢驗結果的關鍵。病料的採集部位及取材時間應根據禽流感病毒在動物體內分布特徵及其感染特性而定[15]。

5 流感實驗室檢測中應注意的若干問題（高致病性流感病毒）

（1）禁止在同一實驗室，更不應在同一接種櫃中，同時處理接種未知臨床標本、已知陽性標本

（2）禁止在同一實驗室，同一時間處理，接種采自不同動物的標本；動物標本（如禽、豬等）必須與人的標本分別保存。

（3）接種後剩餘原始標本，尤其分離出病毒的標本需暫時凍存，有條件的應置-70℃或以下保存，以便需要時可進行復查，待分離物經國家流感中心鑒定完後方可處理掉。分離陰性的標本應隨時棄之。

（4）嚴禁實驗室交叉污染：在病毒分離時嚴禁設陽性對照及操作在人群中已消失的流感病毒。

（5）向國家流感中心送毒株時，量至少需5 ml，同時需自己保存一些，以便寄送過程發生意外時可繼續補送。

（6）流感病毒在-20℃～-40℃ 時不穩定，故不宜在此溫度下長期保存。

（7）雞胚中分離出的流感病毒，應盡量別在MDCK細胞上傳代。因當今國內所用的MDCK細胞屬腫瘤細胞系，一旦病毒通過它傳代就無法用於疫苗制備。

（8）寄送毒株時一定需附上送檢表。寄送毒株需及時，尤其鑒定不出的，異常的毒株應盡快向國家流感中心寄送。寄送時用快速直送國家流感中心[16]。

總結

使用常規方法檢測禽流感及其抗體仍是目前世界上普遍接受的方法。這些方法包括病毒的分離、瓊脂擴散實驗鑒定病毒和測定特異性的血清抗體，血細胞凝集及其抑制試驗鑒定病毒或血清抗體亞型。 採用雞胚中和試驗來鑒定病毒或血清抗體亞型也是一種可以接受的方法，但相對血凝抑制試驗較為麻煩。隨著科學技術的發展，檢測該病毒和血清的方法出現了免疫光法和ELISA法，這些方都有快捷的特點，特別是日益完善並趨向成熟的ELISA檢測方法,因其簡捷、敏感、特異性強等優點而越來越得到廣泛的重視和應用。隨著分子生物學的發展，核酸序列分析法越來越可能成為一種更准確可行的方法,特別是它能從分子生物學的發展，核酸序列分析法越來越可能成為一種更准確可行的方法，特別是它能從分子水平揭示HPAIV甚至潛在HPAIV毒株。這種方法雖然在一般實驗室還不能應用,但RT－PCR技術為從基因水平檢測禽流感病毒RNA提供了靈敏、特異和快捷准確的方法。正在進行的應用毛細管PCR代替常規PCR，以進一步縮短檢測時間的研究和根據禽流感NP的高度保守性而建立的rNP－ELISA檢測法，不僅具有與AGP、HI同樣的特異性，而且具有更高的靈敏性，可在微克水平上進行檢測!都是很有前途的方法。將rNP－ELISA檢測技術及其成套的成品試劑組裝成診斷試劑盒，也取得了很好的實驗效果。

在以上各種檢測方法及科學技術發展的基礎上，將PCR技術與ELISA技術結合起來，建立一種新的實驗室檢測AIV的方法，將有較大的研究價值其實。其實驗原理（以此類方法中最簡單的雙引物雙標記法為例）如下：

PCR的一對引物中!其中一種引物用生物素標記，另一種引物用地高辛標記，酶標微孔板上用生物素的親和素包被(生物素的親和素與生物素特異的結合)。PCR擴增後純化片段加入微孔板中。此時，微孔板上包被的生物素親和素將與引物上的生物素結合而捕捉了PCR片段，再在微孔板中加入辣根過氧化物酶標記的抗地高辛抗體，該抗體將與另一引物上的地高辛結合，從而形成生物素親和素－生物素－PCR片段地－高辛－抗地高辛－酶的復合物。加入酶的相應底物進行顯色，便可判斷PCR擴增的有無。由於該方法是PCR技術和ELISA技術的結合，所以它是一種兩級放大系統,即PCR放大和ELISA放大。故而它的靈敏度更高，同時這種方法避免了PCR產物分析時的電極及染色過程，所以更為快捷、簡便、靈敏。

㈣ 大規模抗體檢測有什麼意義

3月25日，德國著名病毒學家德羅斯滕教授發表講話稱，感染新冠病毒後的病人會形成抗體，其中一部分無症狀感染者可能在自己毫不察覺的情況下獲得免疫，未來可以通過大規模抗體檢測，核實這部分數據，這對整個疫情發展的建模和對未來的預測有非常重要的意義。

關於抗體，一個很重要的概念是滴定度，它反映的是抗體結合抗原特異性位點的最低濃度。我們不斷稀釋血清，直到最後抗體和血清樣本不再呈現陽性，這個最低濃度即滴定度被用來表示抗體的數量。機體受到攻擊時，可以產生很多抗體，對病毒起作用的抗體，我們稱之為中和抗體。

通過中和實驗檢測，我們能知道中和抗體的滴定度。在一定數量抗體里，可能有很多的中和抗體，也可能只有很少的中和抗體。如果中和抗體多，當然對於抵禦病毒非常有利。精確的了解免疫系統有多少中和抗體對於疫苗的開發以及檢測非常重要。

(4)抗體檢測為什麼要有質量控制區擴展閱讀：

日本市民：希望自己的數據能對社會有幫助

東京都啟動檢測前，在板橋區內，受委託的結核預防會(位於東京)護士戴著防護面罩、口罩和手套介紹了采血的情景。流程與體檢采血一樣，1～2分鍾內完成。協會負責人表示：「我認為通過了解感染的實際情況，將有助於今後的政策。」

在宮城縣名取市的檢測地點，縣結核預防會的護士等人對隨機抽選的居民實施采血。家住該市的打工男性(69歲)表示：「疫情擴大期完全沒有出現身體不舒服的情況，但想進行查看。希望自己的數據能對社會有幫助。」

東京都福祉保健局體制支援擔當部長田中愛子說：「抗體檢測對制定今後的防疫對策也是十分重要的，請收到檢測通知的人務必前來檢測。」

㈤ 艾康檢測試紙 T線和C線 哪個先出現 還是同時出現 大概相差多長時間 如果先出現 是出現哪條線啊

緩沖液混合著血清先流過T線（測試區），然後才能流過C線（質量控制區），如果是強陽性，那麼肯定是T區先顯示，但如果是弱陽性往往需要過一段時間T區才能顯示，此時C區可能比T區更早顯示。無所謂時間差。不過弱陽性往往為假陽性。 另外說一下，試紙的檢測結果是不準確的，其准確度不能完全讓人滿意並且不被國家標准所承認的，實際工作中也不能用試紙條來做最終判斷，試紙條的結果只能作為參考。一般來說，剛剛度過窗口期的這段時間試紙條經常檢測不出而為假陰性，而在正常人中又時常出現假陽性。如果您要准確診斷，應該到當地疾病預防控制中心做一個專業的檢測，這個檢測是免費並且保密的。

㈥ 為什麼制備單克隆抗體時要用已免疫的B淋巴細胞 為什麼用選擇培養基選出雜交瘤細胞後還要進行抗體陽性檢測

書上說的B淋巴細胞是指效應B細胞（漿細胞），只有已免疫的B淋巴細胞（即效應B細胞）才能分泌抗體。
漿細胞有專一性，還要進行抗體陽性檢測是因為：第一次用選擇培養基篩選出的雜交瘤細胞有多種，因為當初取自小鼠脾臟的效應B細胞有多種，總共能分泌多種不同抗體，這次篩選只是去處未融合細胞和同種融合細胞，所以最後體內體外培養前還有一步分離各種雜交瘤細胞，專一抗體陽性檢測是為了保證我們現在所需要制備的這種單克隆抗體一直存在，避免實驗操作失誤導致產生的這種單克隆抗體的雜交瘤細胞死亡。

㈦ elisa實驗原理是什麼

elisa實驗原理是將一定濃度的抗原或者抗體通過物理吸附的方法固定於聚苯乙烯微孔板表面，加入待檢標本，通過酶標物顯色的深淺間接反映被檢抗原或者抗體的存在與否或者量的多少。

ELISA技術作為免疫標記技術（包含免疫熒光技術，免疫放射技術，免疫酶技術和免疫膠體金技術）中的一種，已廣泛應用於科研和臨床實驗中，具有快速、定性或者定量甚至定位的特點。

ELISA可用於測定抗原，也可以測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑：固相的抗原或抗體、酶標記的抗原或抗體和酶作用的底物。

根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件，可設計出各種不同類型的檢驗方法。

檢測方法

一、雙抗體夾心法

該方法適用於測定二價或二價以上的大分子抗原，不適用於測定半抗原及小分子單價抗原，因其不能形成兩位點夾心。

二、競爭法

該方法一般用來檢測具有較少表位的小分子物質，當然，這種方法也可以用來檢測大分子抗原物質甚至是抗體。檢測大分子抗原物質時，由於空間位阻的影響，使得該檢測方法沒有雙抗體夾心法檢測大分子抗原物質靈敏度高。

三、間接法測抗體

本法只要更換不同的固相抗原，可以用一種酶標抗體檢測各種與抗原相應的抗體。主要用於對病原體的檢測而進行傳染病的診斷。

四、雙抗原夾心法測抗體

雙抗原夾心法與間接法都可以對抗體進行檢測。

五、捕獲法測抗體

將抗IgM抗體包被於固相微孔板，用無關蛋白載體對未結合位點進行封閉後，加入待測樣本，接著加入抗原物質，然後加入針對該抗原的經生物素標記的特異性抗體和HRP標記的鏈霉親和素，經TMB底物顯色和終止反應後即可計算濃度。

以上內容參考：elisa試劑盒 - 網路

㈧ 臨床檢驗質量控制是什麼 有何意義

定義：

臨床檢驗質量控制是利用現代科學管理的方法和技術檢測分析過程中的誤差，控制與分析有關的各個環節，確保實驗結果的准確可靠。

意義：

1、有利於提升整體檢驗結果的精確性 ；

2、有利於增強階段質量控制是確保醫療服務質量提升的核心；

3、有利於提升臨床檢驗質量控控制對策。

(8)抗體檢測為什麼要有質量控制區擴展閱讀

推進醫療機構檢查檢驗結果互認是國家深化醫葯衛生體制改革的任務要求。《廣東省進一步改善醫療服務行動計劃實施方案(2018-2020年)》提出，要繼續擴大檢查檢驗結果互認范圍，有條件的地區探索在質量控制的基礎上實現區域內檢查檢驗結果互認。

據了解，不同醫院的檢驗儀器、人員素質、檢測方法、實驗室管理等方面可能會存在差異。因此，要實現臨床檢驗結果互認，就必須確保各醫療機構具有統一的檢驗質控標准，實現檢驗結果一致化。

據介紹，佛山市臨床檢驗結果互認技術平台將由臨床檢驗質控機構負責管理，利用互聯網技術每天實時監測各醫療機構的檢驗質量信息，通過實時比對了解各醫療機構之間的檢驗結果是否一致，及時向實驗室反饋質控信息，確保醫療機構間檢驗結果一致化，保障檢測質量。