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衣原體檢測標本是什麼

發布時間:2022-06-13 16:36:59

① 衣原體感染的檢查

1.抗原檢測
(1)塗片鏡檢可取眼結膜、宮頸拭子或刮片做塗片,下呼吸道感染纖維支氣管鏡刷取分泌物或灌洗液檢測上皮細胞胞漿內的沙眼衣原體包涵體。方法簡便,但檢出率低於30%。
(2)酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測臨床標本中衣原體抗原,該方法敏感、簡便快速,但與細菌有交叉反應,可出現假陽性,尤其是鼻咽部標本。
2.核酸檢測
聚合酶鏈反應(PCR)用於檢測衣原體DNA,能從標本中直接鑒定衣原體的種和型別。核酸探針檢測活檢標本中的衣原體DNA。
3.抗體檢測
生殖道感染無並發症者可產生低滴度的抗體;約20%急性衣原體尿道炎患者不產生抗體。常用的有:
(1)補體結合試驗適用於性病淋巴肉芽腫、鸚鵡熱及肺炎衣原體感染診斷,敏感度較低。
(2)微量間接免疫熒光試驗本實驗是診斷肺炎衣原體感染最敏感的方法之一。若雙份血清效價呈4倍增加,或單份血清IgM抗體效價≥1:16,或IgG抗體效價≥1:512,可診斷為急性感染。
(3)直接熒光抗體測定可以檢測衣原體各種類型的標本,該法敏感、特異、快速,為一種操作性和實用性都很強的診斷技術。

② 女性支原體衣原體的檢驗

支原體主要存在於人和動物的腔道粘膜。支原體生殖道感染與非淋菌性尿道炎或宮頸炎有關,此外可引起前列腺炎、附睾炎、輸卵管炎、流產、死產和不育症等。能引起人類非淋菌性尿道炎的主要有解脲支原體、人型支原體、生殖支原體。在正常人的泌尿生殖道中也可能有支原體寄生。
實驗室診斷主要採用液體分離培養和固體分離培養法
[原理]
解脲支原體(Uu)具有尿素酶,能分解尿素產氨,使含酚紅指示劑Uu液體培養基pH值升高變鹼性,液體顏色由黃變紅。
人型支原體(Mh)具有精氨酸酶,能分解精氨酸產氨,使含酚紅指示劑的Mh液體培養基pH值升高,液體顏色由黃變紅。
生殖支原體在含5%CO2環境中的固體培養基上,可形成煎蛋狀集落。但是,由於生殖支原體生長緩慢,而且需要的營養成分復雜,因此,分離培養的難度較大。目前主要靠DNA探針及PCR技術檢測生殖支原體。
[方法]
1.標本採集:
男性:用無菌棉拭子插入尿道約2cm處旋轉,靜止數秒鍾後取材。女性:抹去宮頸口粘液,用無菌拭子插入宮頸管l-2cm旋轉取材。
尚可用前列腺液、精液、尿液離心沉澱物作標本。
2.接種:將標本洗入Uu或Mh液體培養基,或用濾菌器過濾接種。
3.培養:置37℃恆溫箱孵育1~3天,每日觀察培養基顏色變化。
[結果]
液體培養基由黃色變紅色,清亮透明可初步判斷為Uu或Mh陽性。
衣原體:專性細胞內寄生,並有近似的細胞壁結構,含DNA、RNA及核蛋白體,具有獨特生活周期的原核細胞型微生物。
衣原體的發育周期分為原體和始體兩個階段。原體具有傳染性,可在宿主細胞外存活,始體僅存在於細胞內無傳染性。能引起人類非淋菌性尿道炎的主要有沙眼衣原體。
實驗室診斷主要是衣原體抗原檢測(快速膠體金法)
[原理]
衣原體脂多糖抗原與膠體金標記的單克隆抗體結合形成復合物,復合物經虹吸作用而移動,在結果窗被含有的單克隆抗衣原體抗體捕獲而形成黑色沉澱線。
[方法]
1、取材:
男性:用無菌棉拭子插入尿道約2cm處旋轉,靜止數秒鍾後取材。
女性:抹去宮頸口粘液,用無菌拭子插入宮頸管l-2cm旋轉取材。
尚可用尿道取材、潰瘍部位或腹股溝橫痃抽吸液。
2、標本處理:將拭子置於採集管內加入提取緩沖液於刻度,800C水浴10分鍾,放置室溫冷卻至少5分鍾。
3、檢測:滴加5滴標本提取物於試驗板的檢測窗,靜置15分鍾,讀取結果。
[結果]
結果窗出現一條黑線,表明試驗陽性,如無,試驗陰性。
結果窗出現一弱黑線,表明結果可疑。

③ 衣原體和支原體檢查取什麼做檢驗標本

宮頸口的或者陰道分泌物,去醫院直接和大夫說我查支原體衣原體,很簡單,二天後出結果!!

④ 衣原體感染的檢查項目有哪些

生殖道衣原體感染的診斷需要依靠性接觸史、臨床表現和化驗檢查結果。當有典型的尿道炎、宮頸炎症狀時,診斷不難。但由於無症狀感染多見,化驗檢查顯得十分重要。
通過化驗可以確定病因,從而針對病因進行治療,並有助於對病人的性伴侶做治療以防止進一步傳播;還可發現無症狀感染者,有助於消除傳染源;在女病人中檢查並治療衣原體感染將能防止異位妊娠或不孕的發生。
診斷沙眼衣原體感染的化驗檢查方法包括標本塗片染色顯微鏡檢查、衣原體培養法、衣原體抗原檢測、DNA檢測及PCR檢測。塗片檢查是一種簡便、價廉的診斷方法,可用於新生兒眼結膜刮片的檢查,但它不適宜用於生殖道沙眼衣原體感染的診斷,因為在這種情況下,它的敏感性和特異性均較低。
血常規
周圍血白細胞計數一般正常,嗜酸性粒細胞增多。
x線檢查
衣原體肺炎胸片無特異性,多為單側下葉浸潤,表現為節段性肺炎,嚴重者呈廣泛雙側肺炎。沙眼衣原體肺炎胸片顯示雙側廣泛間質和肺泡浸潤,過度充氣征比較常見,偶見大葉實變。
直接塗片鏡檢
取咽分泌物、痰、呼吸道教膜或其他部位標本做塗片,進行GZmesa染色,原體染成紅色,始體染成深藍色。沙眼衣原體包涵體因含有糖原。801染色染成褐色。
快速抗原檢測
多採用單克隆抗體直接免疫熒光法檢測標本中的衣原體,還可應用2I—IsA法加入抗衣原體抗體、酶標抗體18G及底物進行比色定量檢測。這兩種方法簡便敏感。
衣原體分離
肺炎衣原體培養最好用Hela細胞或Hep一2細胞,一般取氣管或鼻咽吸取物作為臨床標本,及時接種。衣原體鑒定多採用Hela細胞或Hep一2細胞培養後通過特異性單克隆熒光抗體法(MFA),該技術敏感性高,特異性強,如能早期採集標本,可在48h內獲得陽性結果。
血清學檢全
採用補體結合試驗,著恢復期血清抗體效價比急性期血清效價增高4倍或4倍以上,即有診斷意義,但無早期診斷意義。微量免疫熒光法(MrF)適用於沙眼衣原體。
PcR技術
普通PcR技術檢測肺炎衣原體特異性DNA,具有快速、簡便、特異的優點,敏感性高於細胞分離技術,但在檢測咽拭於標本中效果不夠理想。用套式PcR(nPcR)檢測可顯著提高其敏感性。

⑤ 衣原體dna檢測是什麼

衣原體檢查就是通過具體感染的症狀,通過x線檢查、病原學、血清學等檢查做綜合分析,對是否感染了衣原體及嚴重程度進行診斷或對治療效果進行評估。致病性衣原體主要有肺炎衣原體及沙眼衣原體,主要引起肺炎及上呼吸道系統炎症和泌尿生殖系統感染。對於支原體感染導致的肺炎症狀,臨床上一般進行血液檢查和胸部x線檢查。泌尿系統感染還需要做塗片檢測及細胞培養等病原學檢查以及血清特異性抗體檢測。
病原衣原體主要有肺炎衣原體、沙眼衣原體、鸚鵡熱衣原體,前兩者臨床最常見。肺炎衣原體被認為是引起肺炎、支氣管炎及其他呼吸道感染的常見病原菌。沙眼衣原體除可導致沙眼外,還是公認的性疾病傳播的傳染源之一。在非淋菌性尿道炎中,幾乎一半是由沙眼衣原體感染造成的,其可引起尿道綜合征和性病淋巴肉芽腫,男性尿道炎、附睾炎,女性不孕、子宮頸炎、盆腔炎等。新生兒通過產道感染,可引起新生兒眼炎或新生兒肺炎。沙眼衣原體還可以引起成人肺炎,對孕婦危害也較大,可造成宮外孕、流產、死胎、絨毛膜羊膜炎、早產等。鸚鵡熱衣原體可引起鸚鵡熱,是人類吸入受感染的鳥排泄物的塵粒而感染,發病時常有高燒、頭痛、肌肉痛、寒戰和上下呼吸道不適,部分患者可並發腦炎、心肌炎或血栓性靜脈炎。

⑥ 肺炎衣原體的鑒定檢測方法

臨床依據患者的症狀和體征,很難鑒別細菌性、病毒性、肺炎支原體或肺炎衣原體的感染,以致在臨床用葯上存在困難,一般只能依賴實驗室通過人體體液標本進行病因檢測。碘染色法和姬姆薩染色法不適用於Cpn的檢測。細胞免疫組織化學法對組織切片進行生物素-抗生物素-過氧化物酶系統著色(又稱ABC法)。在冠狀動脈硬化斑塊上可檢出Cpn-EB,透射電鏡證明在AS泡沫細胞內有特徵性的0.4µm大小的EB。該系統設備價格高昂,技術要求高,只限於科研應用。故不適合直接塗片。
目前常用的檢測方法有如下幾種:
分離培養
分離培養是Cpn特異性實驗室診斷方法,可用鼻咽或喉拭子、痰和胸腔積液標本分離Cpn,鼻咽部拭子是進行分離的理想標本,喉和痰液分離Cpn有何差別還不清楚。Cpn需要在組織中進行培養,無細胞培養基不適合Cpn繁殖,Cpn能在呼吸道來源的細胞系如:HEp-2和HL細胞系中穩定生長。拭子採用滌棉、金屬線為好,拭子既應注意防污染,亦要防止細胞和Cpn受抑制,取得的標本通常置於加抗生素和小牛血清的蔗糖磷酸緩沖液(保存於4℃,不超過24h),標本置於室溫會降低其活性,如果不能在24h內處理,標本應置於−70℃冰箱保存。接種後72h,要證實菌株,可用Cpn特異性或衣原體種特異性(即抗LPS)熒光結合單克隆抗體進行染色。Cpn包涵體不包含糖原,因此不被碘染色。
但是,肺炎衣原體的組織培養較其他衣原體困難,在作分離培養時,常採取以下措施以增強肺炎衣原體的感染性及促進其在細胞中的生長:①接種物離心(3000r/min)。②培養細胞用30µg/ml的二乙氨基乙基葡聚糖(DEAE-dextran)預處理。③加入細胞生長抑制劑,如環己酞亞胺1µg/ml以抑制宿主細胞生長。Kuo等在研究肺炎衣原體培養所需氨基酸時發現,賴氨酸和蛋氨酸的部分或完全缺失可不同程度地促進肺炎衣原體的生長,但該促進作用在加入環己酞亞胺後變得不明顯。Theunissen等觀察了SPG保存液的pH、離子強度、溫度對肺炎衣原體感染HL細胞的影響,發現pH大於8或小於5,原體的存活率迅速減低;在含10%小牛血清的SPG中,外加NaCI濃度小於80mmol/L時原體的活性受到影響,而0.346~4mmol/L的Ca2+或0~2.5mmol/L的Mg2+對原體感染性的影響不明顯;在0~20℃24h內,SPG中原體95%以上存活,溫度超過20℃,原體的存活率隨存放時間的延長下降迅速 。
血清學檢測
最常用的血清學方法是補體結合反應。一般用加熱處理過的衣原體懸浮液作為抗原(屬特異抗原)來測定被檢血清(屬特異血清)。哺乳動物和禽類一般於感染後7d、10d出現補體結合抗體。通常採取急性和恢復期雙份血清,如抗體滴度增高4倍以上,認為系陽性。關於血清學普查判定標准,國內暫定1∶16或以上為陽性,1∶8為可疑,1∶4以下為陰性。
酶聯免疫吸附試驗(ELISA)
ELISA已用於痰標本的Cpn抗原檢測。優點為特異性強、操作簡便、易於自動化,並且可用於大批量標本的檢測,另外,快速試驗過程僅需1h,臨界值易判斷,由於可檢測血清中IgM和IgG,故能區分急性感染和既往感染,適合於臨床實驗室作為Cpn感染的常規檢查;缺點為敏感性差,陽性預期值較低,不適合人群的篩查。
微量免疫熒光抗體檢測(MIF)
MIF技術對肺炎衣原體的診斷是特異的且敏感性高,因此被國內外學者譽為Cpn感染診斷的「金標准」。MIF抗體包括3種:IgM、IgG和IgA。初次感染(原發感染)時,IgM於發病後3周出現,IgG於發病後6~8周出現,而IgA反應較弱或不出現;再次感染(重復感染)時,IgG常在1~2周內出現,且效價可以很高,但往往沒有IgM出現或其效價很低。目前診斷標准為:①急性感染:雙份血清抗體效價升高4倍以上或IgM=1∶16或IgG≥1∶512;②既往感染:IgM<1∶16且1∶16≤IgG<1∶512;③未感染過∶IgG1∶8。總之,MIF試驗是經典的國際通用的方法,對Cpn的診斷具有高度的特異性。但該方法的抗原片製作過程復雜,實驗室要求條件高。
無論採用何種檢測方法,急性期及恢復期的雙份血清標本中,肺炎支原體特異性抗體滴度呈4倍或4倍以上增高或減低時,均可確診為肺炎支原體感染,這是目前國際上公認的標准。
分子生物學檢測
用分子生物學方法檢測血管組織中Cpn,結果取決於樣本收集和操作、引物設計、核酸抽提、擴增物的檢測以及假陽性、假陰性結果的預防與鑒別等環節。最常用的引物是omp1、16SrRNA、3SrRNA、Cpn特異性克隆PstI片斷等,測定擴增產物多應用瓊脂糖電泳、Southernblot、EIA、聚丙烯醯胺膠電泳等。目前分子診斷技術中已有聚合酶鏈反應(PCR)、套式聚合酶鏈反應(nPCR)、連接酶鏈反應(LCR)、轉錄介導擴增試驗(TMA)、基因探針雜交等方法。作為分子生物學方法,PCR法具有快速、簡便、靈敏的特點,是Cpn診斷的發展方向。總之,分子生物學方法具有快速、簡便、靈敏的優點,是Cpn感染診斷的重要手段。很多學者建議將各種分子生物學方法之間或與其他診斷方法聯合應用,並且證明了聯合應用能提高Cpn感染診斷的敏感性。如PCR與ELISA聯合應用的方法診斷Cpn感染的敏感性高於免疫熒光法、傳統PCR法以及ELISA法。此外,其中基因探針雜交和LCR單獨使用靈敏度不足,宜與PCR聯合應用。nPCR不僅特異性與靈敏度頗占優勢,而且由於無須增添任何設備,能開展PCR檢測的單位均可實施,是較為適合國情的方法 。

⑦ 衣原體標本該怎樣採集處理及檢測

標本採集

取材:男性:用無菌棉拭子插入尿道約2厘米處旋轉,靜止數秒鍾後取材。女性:抹去宮頸口粘液,用無菌拭子插入宮頸管1~2厘米旋轉取材。尚可用尿道取材、潰瘍部位或腹股溝橫痃抽吸液。

標本處理:將拭子置於採集管內加入提取緩沖液於刻度,80攝氏度水浴10分鍾,放置室溫冷卻至少5分鍾。

檢測:滴加5滴標本提取物於試驗板的檢測窗,靜置15分鍾,讀取結果。

⑧ 衣原體支原體怎麼檢查

1血常規:周圍血白細胞計數一般正常嗜酸性粒細胞增多
2x線檢查:衣原體肺炎胸片無特異性多為單側下葉浸潤表現為節段性肺炎嚴重者呈廣泛雙側肺炎沙眼衣原體肺炎胸片顯示雙側廣泛間質和肺泡浸潤過度充氣征比較常見偶見大葉實變
3直接塗片鏡檢:取咽分泌物痰呼吸道教膜或其他部位標本做塗片進行GZmesa染色原體染成紅色始體染成深藍色沙眼衣原體包涵體因含有糖原801染色染成褐色
4快速抗原檢測:多採用單克隆抗體直接免疫熒光法檢測標本中的衣原體還可應用法加入抗衣原體抗體酶標抗體18G及底物進行比色定量檢測這兩種方法簡便敏感
5衣原體分離 肺炎衣原體培養最好用Hela細胞或Hep一2細胞一般取氣管或鼻咽吸取物作為臨床標本及時接種目前衣原體鑒定多採用Hela細胞或Hep一2細胞培養後通過特異性單克隆熒光抗體法(MFA)該技術敏感性高特異性強如能早期採集標本可在48h內獲得陽性結果
6血清學檢全 採用補體結合試驗著恢復期血清抗體效價比急性期血清效價增高 4倍或4倍以上即有診斷意義但無早期診斷意義微量免疫熒光法(MrF)適用於沙眼衣原體
7PcR技術 普通PcR技術檢測肺炎衣原體特異性DNA具有快速簡便特異的優點敏感性高於細胞分離技術但在檢測咽拭於標本中效果不夠理想用套式PcR檢測可顯著提高其敏感性

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