病理單克隆抗體檢測是什麼

⑴ 什麼是單克隆抗體 作用是什麼

單克隆抗體指將特定的效應T細胞與小鼠骨髓瘤細胞進行動物細胞融合，形成雜交瘤細胞，該雜交瘤細胞可以長時間存在並合成特定抗體
作用1．檢驗醫學診斷試劑
2．蛋白質的提純
3． 腫瘤的導向治療和放射免疫顯像技術

⑵ 單克隆抗體在臨床上的應用

1．檢驗醫學診斷試劑 作為檢驗醫學實驗室的診斷試劑，單克隆抗體以其特異性強、純度高、均一性好等優點，廣泛應用於酶聯免疫吸附試驗、放射免疫分析、免疫組化和流式細胞儀等技術。並且單克隆抗體的應用，很大程度上促進了商品化試劑盒的發展。目前，應用單克隆抗體製作的商品化試劑盒廣泛應用於： ①病原微生物抗原、抗體的檢測； ②腫瘤抗原的檢測； ③免疫細胞及其亞群的的檢測； ④激素測定； ⑤細胞因子的測定。 單克隆抗體對抗原的識別，與多克隆抗體有很大的不同。不同試劑盒因使用的單克隆抗體不同，識別抗原的位點不同，導致檢測結果有一定差異。因此，標准化問題還需要進一步研究。 2．蛋白質的提純 單克隆抗體是親和層析中重要的配體。將單克隆抗體吸附在一個惰性的固相基質（如Speharose 2B、4B、6B等）上，並制備成層析柱。當樣品流經層析柱時，待分離的抗原可與固相的單克隆抗體發生特異性結合，其餘成分不能與之結合。將層析柱充分洗脫後，改變洗脫液的離子強度或pH，欲分離的抗原與抗體解離，收集洗脫液便可得到欲純化的抗原。 3． 腫瘤的導向治療和放射免疫顯像技術 將針對某一腫瘤抗原的單克隆抗體與化療葯物或放療物質連接，利用單克隆抗體的導向作用，將葯物或放療物質攜帶至靶器官，直接殺傷靶細胞，稱為腫瘤導向治療。另外，將放射性標記物與單克隆抗體連接，注入患者體內可進行放射免疫顯像，協助腫瘤的診斷。目前單克隆抗體主要為鼠源性抗體，異種動物血清可引起人體過敏反應。因此，制備人-人單克隆抗體或人源化抗體更為重要，但此方面仍未取得明顯進展。

⑶ 單克隆抗體中兩次篩選分別是什麼方法

第二次篩選出能產生特異性抗體的雜交瘤細胞，用連續注射抗原，下面具體介紹一下：

1、在實際免疫過程中，由於採用連續注射抗原的方法，且一種抗原決定簇刺激機體形成相對應的一種效應B淋巴細胞，因此，從小鼠脾臟中取出的效應B淋巴細胞的特異性是不同的，經HAT培養液篩選的雜交瘤細胞特異性也存在差異，所以必須從雜交瘤細胞群中篩選出能產生針對某一預定抗原快定簇的特異性雜交瘤細胞；

2、通常採用有限稀釋克隆細胞的方法，將雜交瘤細胞多倍稀釋，接種在多孔的細胞培養板上，使每一孔含一個或幾個雜交瘤細胞（理論上30%的孔中細胞數為0時，才能保證有些孔中是單個細胞），再由這些單細胞克隆生長，最終選出分泌預定特異抗體的雜交細胞株進行擴大培養。

拓展資料：

單克隆抗體是由單一B細胞克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體，稱為單克隆抗體。通常採用雜交瘤技術來制備，雜交瘤（hybridoma）抗體技術是在細胞融合技術的基礎上，將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為B細胞雜交瘤。

參考資料：單克隆抗體網路：網頁鏈接

⑷ 稽留流產為什麼要做病理單克隆抗體檢查

你說的情況的圖片，或者有做過的具體檢查的單，或者檢查的數值發來看下才能給你建議的，最好發來看下。

⑸ 單克隆抗體制備過程中的專一抗體檢測陽性的檢測原理是什麼

2.雜交瘤陽性克隆的篩選與克隆化在HAT培養基中生長的雜交瘤細胞，只有少數是分泌預定特異性單克隆抗體的細胞，因此，必須進行篩選和克隆化。通常採用有限稀釋法進行雜交瘤細胞的克隆化培養。採用靈敏、快速、特異的免疫學方法，篩選出能產生所需單克隆抗體的陽性雜交瘤細胞，並進行克隆擴增。經過全面鑒定其所分泌單克隆抗體的免疫球蛋白類型、亞類、特異性、親和力、識別抗原的表位及其分子量後，及時進行凍存。抗原-抗體雜交原理

⑹ 單克隆抗體的應用

單克隆抗體,因為是腫瘤細胞和B細胞雜交而成的，所以它有腫瘤細胞無限增殖的特性，又能分泌抗體。

⑺ 什麼是單克隆抗體有何特點及應用價值

分類：分子生物學知識 字型大小： 大大 中中 小小 1975年Kohler和Milstein首先報道，用細胞雜交技術，使經綿羊紅細胞(SRBC)免疫的小鼠的脾細胞，與小鼠的骨髓瘤細胞融合，並由此創建了第一個B細胞雜交瘤細胞株，獲得了抗SRBC的單克隆抗體。他倆首先創立了將能分泌特異性抗體的B淋巴細胞同無限繁殖的骨髓瘤細胞融合技術,為單克隆抗體的制備奠定了基礎。這是免疫學，乃至醫學史上的一個里程碑。

所謂的單克隆抗體是指由單一克隆雜交瘤細胞產生的只識別某一特定抗原表位的同源抗體。

單克隆抗體是經過人工制備的一類特殊抗體,它具有一般抗體的性質;它是B細胞增殖分化為漿細胞所產生的一類球蛋白,存在於體液中,具有免疫功能 ,介導體液免疫;它能與相應抗原(如病原體)特異性結合,在其他免疫分子和細胞的參入下發揮免疫效應.

單克隆抗體的本質是球蛋白,具有球蛋白的理化性質,空間結構和生物學活性.球蛋白對熱和化學物質敏感,加熱和加入化學試劑易破壞其結構,具有一定的半衰期.它和球蛋白一樣具有可變區和恆定區,可變區結合抗原,形成抗原抗體復合物;恆定區有補體結合位點,介導補體發揮作用,形成攻膜復合物,殺傷變異的細胞.

單克隆抗體除了具有抗體的一般性質外,還具有其特殊性.它在結構和組成上高度均一,其類型抗原結合特異性和親和力完全相同,易於體外大量制備和純化,可以廣泛的應用於醫學和微生物學領域.單克隆抗體有小鼠免疫脾細胞(B細胞)和無限繁殖的骨髓瘤細胞融合在一起形成一個雜交瘤細胞.而這個雜交瘤細胞不僅具有無限繁殖的能力,還具有分泌抗體能力,因此在體外培養後,可無限的分泌抗體.

單克隆抗體的制備比較復雜,其中涉及多種生物學技術,在此簡述其過程.用特定的抗原免疫純系動物(如BALA--C小鼠),多次反復經背部皮下多點注射,每次注射應定量,也要注重接種的時間間隔,可適當的添加弗氏佐劑.經過一段時間的飼養後,選擇血清抗體高的接種動物在無菌的情況下處死,取出脾臟剪碎,分離,離心取其懸浮細胞置入培養皿中,備用.在另取純系小鼠的骨髓瘤細胞放進培養皿中,加入一些飼養細胞(如胸腺細胞,巨噬細胞)促使其生長,在該混合液中有多種細胞,為了提取目的細胞--雜交瘤細胞,必須進行HAT選擇,培養獲得純代雜交瘤細胞.在眾多的雜交瘤細胞中,有的不表達免疫球蛋白,有的表達其他類型的球蛋白,因此,要用特異性的檢測方法從眾多的細胞中篩選出陽性雜交瘤細胞.將目的細胞分離成單個細胞讓其克隆化形成細胞株,再轉移至其他培養基中擴大培養.為了大量的獲得抗體,還需要經過小鼠腹腔接種,然後從腹水中分離提純抗體.

單克隆抗體的分離,提純,檢驗.將體外擴大培養液或者小鼠腹腔接種的腹水裝入離心管中置於離心機上高速離心,取其上清液置於玻片上,加入相應的抗原,看是否有凝聚現象.

單克隆抗體問世後取得了輝煌的成就,如應用白喉外毒素單克隆抗體治療白喉棒狀桿菌;應用抗內毒素類脂A的單克隆抗體治療G~菌敗血症等.單克隆技術也因此獲得了1984年的諾貝爾醫學獎.它的主要作用是:用單克隆抗體代替多克隆抗體克服了交叉反應,提高了免疫學實驗的特異性和敏感性,從而促進了醫學檢驗學的發展;用單克隆作親和柱,可分離提純含量極底的可溶性的抗原,如激素,細胞因子和難以純化的腫瘤抗原等;為物質提純開辟了一條新途徑;制備的單克隆抗體識別細胞表面特異性受體,若將抗腫瘤葯物(如毒素或放射性物質)偶連到其上,構建生物導彈,有望攻克人類頑疾--腫瘤.

單克隆抗體有廣闊的發展前景,但有其局限性.單克隆抗體作為外源性的抗原,多次反復的注射後能促使機體發生免疫應答,產生相應的抗抗體,產生排斥現象,因此單克隆抗體應用於臨床有其風險性,在緊急預防的情況下,可以慎用.

總之,單克隆抗體為人類在檢驗疾病,治療疾病方面取得了重大突破,盡管它還有些弊端,相信在不久的將來人類會制備出更加優良的單克隆抗體,為攻克腫瘤作出更大的貢獻!

單克隆抗體的特點是：理化性狀高度均一、生物活性單一、與抗原結合的特異性強、便於人為處理和質量控制，並且來源容易。這些優點使它一問世就受到高度重視，並廣泛應用於生物學和醫學研究領域。

1 作為親合層析的配體

單克隆抗體能與其相應的抗原特異性結合，因而能夠從復雜系統中識別出單個成分。只要得到針對某一成分的單克隆抗體，利用它作為配體，固定在層析柱上，通過親合層析，即可從復雜的混和物中分離、純化這一特定成分。如用抗人絨毛膜促性腺激素(hCG)親合層析柱，就可從孕婦尿中提取到純的hCG。與其它提取方法(沉澱法、高效疏水色譜法等)相比，具有簡便、快速、經濟、產品活性高等優點。

2 作為生物治療的導向武器

脂質體是由既親水又親油的兩親磷脂組成的連續雙分子層微囊，內含水相空間，可包裹水溶性物質。包有細胞毒劑的脂質體膜上偶聯抗體，可定向攻擊靶細胞，稱為免疫脂質體。這種「導向治療」，在動物試驗與體外試驗中已獲得滿意效果。如熱敏免疫脂質體，由抗人乳癌細胞抗體經疏水長鏈脂肪酸修飾，抗體帶上長的疏水碳鏈，部分插入脂質體的脂雙層膜中，抗體Fab段仍暴露在膜表面，因而保持了抗體活性。熱敏免疫脂質體可特異識別靶細胞(人乳癌細胞)，並通過相變溫度引起脂質體破裂，從而定向釋放葯物。另外，可將化療葯物、細菌毒素、植物毒素或放射性同位素等細胞毒劑與抗腫瘤抗原的單克隆抗體直接交聯，利用其導向作用，使細胞毒劑定位於腫瘤細胞把它直接殺傷。這不僅提高了抗體的療效，也可降低細胞毒劑對正常細胞的毒性反應。如應用抗T細胞單抗和柔紅黴素結合物，在體外對非T淋巴細胞就無殺傷作用。但是，要把這種方法應用於臨床，目前還存在不少技術難關，包括人體對鼠源單抗的排異問題等。

3 作為免疫抑制劑

抗人T淋巴細胞單抗(McAb)作為一種新型免疫抑制劑，已廣泛應用於臨床治療自身免疫疾病和抗器官移植的排斥反應。其作用機理有賴於McAb的種類及其免疫學特性。注射抗小鼠Thy-1抗原的單抗，可以抑制小鼠同種皮膚移植的排斥反應。此外，對用於同種骨髓移植的供體骨髓，在體外經抗T細胞單抗加補體處理，能減輕移植物抗宿主病的發生。

4 作為研究工作中的探針

單克隆抗體只與抗原分子上某一個表位(即抗原決定簇)相結合，利用這一特性就可把它作為研究工作中的探針。此時，可以從分子、細胞和器官的不同水平上，研究抗原物質的結構與功能的關系，進而並可從理論上闡明其機理。如用熒光物質標記單抗作為探針，能方便地確定與其結合的相應生物大分子(蛋白質、核酸、酶等)在細胞中的位置和分布。

5 增強抗原的免疫原性

抗體對抗原免疫原性的增強作用由來已久，60年代就已發現幼豬對破傷風類毒素難以產生抗體，注射相應特異性抗體IgG，就能有效地提高對委內瑞拉馬腦炎病毒的免疫應答。1984年以來，Celis等發現，抗乙肝病毒(HBs)IgG可增強HBs抗原對特異性人T細胞克隆的刺激增殖，並可誘生干擾素。在小鼠中發現，當低劑量的HBs抗原不產生免疫反應時，加入抗HBs抗體組成的復合物，則可有效地誘生免疫反應。根據這一作用，現已研製出乙肝的抗原—抗體復合物型治療性疫苗。

6 作為醫學檢驗試劑

單克隆抗體作為醫學檢驗試劑，更能充分發揮其優勢。單克隆抗體的特異性強，大大提高了抗原—抗體反應的特異性，減少了和其它物質發生交叉反應的可能性，使試驗結果可信度更大。單抗的均一性和生物活性的單一性，使抗原—抗體區應結果便於控制，利於標准化和規范化。目前已有許多檢驗試劑盒用單抗製成，其主要用途如下：

(1)診斷各類病原體

這是單抗應用最多的領域，已有大量診斷試劑商品供選擇。如用於診斷乙肝病毒、丙肝病毒、皰疹病毒、巨細胞病毒、EB病毒和各種微生物、寄生蟲感染的試劑等。單抗所具有的靈敏度高、特異性好的特點，使其在鑒別菌種的型及亞型、病毒變異株，以及寄生蟲不同生活周期的抗原性等方面更具獨特優勢。

(2)腫瘤特異性抗原和腫瘤相關抗原的檢測

用於腫瘤的診斷、分型及定位。盡管目前尚未制備出腫瘤特異性抗原的單抗，但對腫瘤相關抗原(如甲胎蛋白、腫瘤鹼性蛋白和癌胚抗原)的單抗早就用於臨床檢驗。

隨著淋巴細胞雜交瘤技術的應用，許多抗人腫瘤標記物的雜交瘤細胞株已經建立，這為腫瘤的早期診斷及其闡明腫瘤的發生、發展，了解腫瘤細胞的生物學活性及其定量研究奠定了基礎。用抗腫瘤單抗檢查病理標本，可協助確定轉移腫瘤的原發部位。以放射性核素標記單抗可用於體內診斷，再結合X-線斷層掃描技術，可對腫瘤的大小及其轉移灶作出定量診斷。

(3)檢測淋巴細胞表面標志

用於區分細胞亞群和細胞的分化階段。例如檢測CD系列標志，有利於了解細胞的分化和T細胞亞群的數量和質量變化，這對多種疾病診斷具有參考意義。細胞表面抗原的檢測，將對白血病患者的疾病分期、治療效果、預後判斷等方面有指導作用。組織相容性抗原檢測是移植免疫學的重要內容，應用單抗對其進行位點檢測可得到更可信的結果。

(4)機體微量成分的測定

應用單抗結合其它技術，可對機體的多種微量成分進行測定。如放射免疫分析，即是利用了同位素的靈敏性和抗原-抗體反應的特異性而建立起來的方法，它可以測至10-9～10-12g，使原來難以測定的激素能夠進行定量分析。除了激素，還可檢測諸多酶類、維生素、葯物和其它生化物質。這對受檢者健康狀態判斷、疾病檢出、指導診斷和臨床治療均具有實際意義。

綜上所述，單克隆抗體在理論和實踐上的應用成為解決生物學和醫學等許多重大問題的重要手段。但是，上述應用的單抗屬於鼠源性，用於人類疾病的預防和治療時會產生異種蛋白變態反應，大大限制了其臨床應用價值。而且，鼠源性抗體在人體內半衰期縮短，生物活性降低。因此，人們一直致力於人源性抗體的研究，如用人脾細胞與鼠骨髓瘤細胞雜交；用EB病毒轉化人的B淋巴細胞；用基因工程法制備嵌合抗體等。但都遇到相當的困難。以分子生物學技術提取、擴增編碼人抗體的DNA，構建質粒，建立組合抗體文庫，再利用供者文庫建立針對某一特定抗原的子文庫是近年來形成的最新方法。以該技術制備的抗體片段(Fab)是人源抗體，具有建庫簡單、抗體表達穩定等特點。迄今已有多種抗體產生。可以預見，該技術具有良好的發展和應用前景。

單克隆抗體綜述

一、抗體的定義和第一代單克隆抗體（經雜交瘤細胞生產）

抗體是在對抗原刺激的免疫應答中，B淋巴細胞產生的一類糖蛋白。它是能與相應抗原特異的結合、產生各種免疫效應（生理效應）的球蛋白。國際衛生組織將具有抗體活性及化學結構與抗體相似的一類蛋白統一命名為免疫球蛋白，它與抗體都是指同一類蛋白質。70000之間，稱為「重鏈」（H鏈）。輕、重鏈之間和兩重鏈之間由二硫橋連接，這樣的四鏈結構（L2H2）組成一個免疫球蛋白分子。550個氨基酸殘基，相對分子質量在55000;抗體的基本結構如圖所示，由四條肽鏈組成，其中兩條相對分子質量較低的肽鏈約含210個氨基酸殘基，相對分子質量約24000，稱為「輕鏈」（L鏈）；另兩條相對分子量較高的肽鏈約含450，其相應的抗體分別命名為IgG、IgM、IgA、IgE和IgD。以重鏈抗原性差異來進行抗體的血清學分類：用分離純化的各種重鏈免疫動物獲得相應的抗血清，再通過免疫交叉反應等血清學檢測方法，分析其結構的異同，反復的驗證，最後發現人類有5類不同的重鏈，分別為）與多種細胞結合，(5)可能造成免疫損傷。IgG占成人血清中抗體總量的75%以上，是人類血清中主要的一類抗體，由B細胞產生，其功能結構也是研究最清楚的。它主要的生理功能有：(1)中和毒素和病毒，(2)凝集和沉澱抗原，(3)激活補體，(4)通過特異的膜受體（Fc單克隆抗體技術的應用是現代生物科學領域中的重要進展之一。單克隆抗（Monoclonalantibody，簡稱McAb）具有廣泛的應用價值，它為生物學和醫學等自然科學的研究開辟了新的途經。

二、 第二代單克隆抗體：經過基因重組的嵌合或人源化單克隆抗體

嵌合抗體：指用人的恆定區取代小鼠的恆定區，保留鼠單抗的可變區序列，形成一個人-鼠雜合的抗體。其研製程序快，可大幅度降低異源抗體的免疫原性，卻幾乎保持親本鼠單抗全部的特異性和親和力。另外，它還具有人抗體的效應功能，如補體固定、抗體依賴細胞介導的細胞毒作用（ADCC）等。嵌合抗體成功的例子有：

Rituxan：Idec Pharmaceutical/Genentech的小鼠抗CD20抗體，含人IgG1κ恆定區，用於治療B淋巴瘤。它的抗淋巴瘤作用主要可能來自於補體作用、ADCC和誘導腫瘤細胞凋亡。

Remicade：Centocor公司的抗TNF-α抗體，用於治療風濕性關節炎和節段性回腸炎。

Simulect: Novartis公司的抗CD25抗體，用於抗移植排斥。

Erbitux：美國Imclone公司的抗EGFR（Her-1）單克隆抗體，目前FDA已批准其用於治療結直腸癌。

人源化抗體：利用現有的無數已詳細分析過的小鼠抗體，取其與抗原直接接觸的那段抗體片段（互補決定區，CDR）與人的抗體框架嫁接，經親和力重塑，可維持其特異性和大部分的親和力，同時幾乎去除免疫原性和毒副作用。

成功的例子：

Herceptin：Genentech公司的抗HER2/neu抗體，用於治療乳腺癌。

Synsgis：Medimmune公司的抗F抗體，用於治療呼吸道病毒感染。

Zenapax：Protein Design Labs（PDL）/Roche的抗CD25抗體，用於抗移植排斥。

h-R3：古巴分子免疫學中心的抗EGFR（Her-1）單克隆抗體，用於治療頭頸癌。

三、 噬菌體展示抗體和全人抗體

（1）噬菌體顯示技術制備人源性抗體

基於噬菌體可把抗體片段表達在外膜的能力而建立一系列的抗體文庫，然後用目的抗原來篩選文庫中相應的抗體片段，再經體外加工可形成有功能的完全人抗體。用此方法可制備針對簡單或復雜抗原的單抗，並得到中等親和力的抗體，但該方法需用高通量篩選。現有一些已進入臨床II/III期研究，如Cambridge Antibody Technology（CAT）的D2E7和CAT-152，分別用於治療風濕性關節炎和青光眼。D2E7是抗TNF-α單抗，現正由Abbott Laboratories開發。從其2002年6月份提供的臨床III期數據看，有望於近期進入市場。

（2）轉基因動物制備人源性抗體

抗體衍生物：有的研究者正在開發更容易生產和使用的單抗衍生物，最成功者當屬賓夕法尼亞大學的Mark Greene。他在尋找抗體互補決定區CDR衍生的多肽小分子[16]，並成立了CDR Therapeutics（現屬Xcyte Therapies）以加速其多肽生產的商業化。他的多肽有親本單抗的親和力和選擇性，但作為小分子，多肽應無免疫原性，且更容易制備。

⑻ 什麼叫單克隆抗體

單克隆抗體是由單一B細胞克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。

1、單克隆抗體制備的宿主動物一般選用BALB/c小鼠，鼠單抗的應用范圍相當廣泛，一些國內外公司均開發出了兔的單克隆抗體制備技術。

2、單克隆抗體是親和層析中重要的配體，單克隆抗體對抗原的識別，與多克隆抗體有很大的不同。不同試劑盒因使用的單克隆抗體不同，識別抗原的位點不同，導致檢測結果有一定差異。

(8)病理單克隆抗體檢測是什麼擴展閱讀：

1、單克隆抗體技術將產生抗體的單個B淋巴細胞同骨髓腫瘤細胞雜交， 獲得既能產生抗體， 又能無限增殖的雜種細胞，並以此生產抗體。

2、抗體葯物可以定向製造，就是根據需要制備具有不同治療作用的抗體葯物。基於這些特點，我們可以用來製成「生物導彈」運送葯物至病害部位，主要是癌細胞，從而達到治療效果。

3、單克隆抗體技術在食品生產加工以及科學研究中得到廣泛的應用，食品基質中的細胞、大分子聚合物的小分子半抗原物質均能通過單克隆技術研究或檢出。

4、我國的單克隆抗體葯物從無到有，並且在我國醫葯市場發揮越來越重要的作用。單克隆抗體在我國市場仍屬高端產品，主要依賴進口。

⑼ 今天去醫院做了一個檢測，叫什麼BLDK，病理單克隆抗體檢測。有沒有專家知道有關這方面的內容的

抗體是與抗原特異性結合的，而單克隆抗體是一種靶向性極為突出的抗體，能夠很好地與相應抗原結合，病理單抗檢測就是檢測某種疾病的一種很好的手段，准確性較好